《保健食品用核糖核酸标准文本.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《保健食品用核糖核酸标准文本.docx（15页珍藏版）》请在课桌文档上搜索。
1、ICSxxxxxxxCCSXXX中国营养保健食品协会团体标准T/CNHFAXXX-XXXX保健食品用核糖核酸RibonucleicAcidforHealthFoodProductsXXXX- XX-XX 实施XXXX-XX-XX发布中国营养保健食品协会发布本文件按照GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由中国营养保健食品协会归口。本文件起草单位：中国农业大学营养与健康系、大连珍奥生物技术股份有限公司、珍奥集团股份有限公司。本文件主要起草人：许文涛；朱龙佼；贺晓云；王佳；陈玉琦；陈玉平；曾峥；黄国新；贾顺义；马媛；杨亚囱；李梦琦。1范围本文件
2、适用于以酿酒酵母或产玩假丝酵母为主要原料，经液体发酵后得到菌体，再经过提取、分离、干燥等工艺制得的保健食品用核糖核酸的生产、检验和销售。本文件规定了核糖核酸的定义、缩略语、技术要求、检测方法、检验规则、标志、包装、运输、贮存和保质期。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志GB1886.15食品安全国家标准食品添加剂磷酸GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB4789.3食品安全国家
3、标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母菌计数GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB5009.11食品安全国家标准食品中总碑及无机种的测定GB5009.12食品安全国家标准食品中铅的测定GB5009.17食品安全国家标准食品中总汞及有机汞的测定GB/T5461食用盐GB7718食品安全国家标准预包装食品标签通则GB25579食品安全国家标准食品添加剂硫酸锌GB29201食品安全国家标准食品添加剂氨水GB
4、29206食品安全国家标准食品添加剂硫酸铉GB29207食品安全国家标准食品添加剂硫酸镁GB29211食品安全国家标准食品添加剂硫酸亚铁GB31640食品安全国家标准食用酒精QB/T2684甘蔗糖蜜中华人民共和国药典2020年版四部通则0982粒度和粒度分布测定法中华人民共和国药典2020年版二部凡例第十五条溶解度测定法卫法监200184号可用于保健食品的真菌菌种名单T/CNHFAXXX-XXXX国家质量监督检验检疫总局令(2005)第75号定量包装商品计量监督管理办法3术语和定义、缩略语3.1 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。核糖核酸RibonucIeicAcid：以酿酒酵母或产肮假丝
5、酵母为主要原料，经液体发酵后得到菌体，再经过提取、分离、干燥等工艺得到的产品，可用作保健食品原料3.2 缩略语下列缩略语适用于本文件。RNA：核糖核酸RibonucIeicAcid4技术要求4.1 工艺要求以酿酒酵母或产肮假丝酵母为主要原料，经液体发酵后得到菌体，再经过提取、分离、干燥等工艺得到。4.2 原辅料及加工助剂要求4.2.1 酵母：应符合卫法监200184号规定4.2.2 磷酸：应符合GB1886.15标准规定。4.2.3 食用盐：应符合GB/T5461标准规定。424硫酸锌：应符合GB25579标准规定。4.2.5 氨水：应符合GB29201标准规定。4.2.6 硫酸镂：应符合GB
6、29206标准规定。4.2.7 硫酸镁：应符合GB29207标准规定。4.2.8 硫酸亚铁：应符合GB292”标准规定。4.2.9 食用酒精：应符合GB31640标准规定。4.2.10 糖蜜：应符合QB/T2684标准规定。4.3 产品要求4.3.1 感官要求感官要求应符合表1规定。项目指标检验方法色泽淡黄色或淡黄褐色取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘气味无臭味，略带酸味中，在自然光线下，观察其色泽和状态，嗅形态粉末，无肉眼可见杂质其气味，检查有无正常视力可见杂质等。4.3.2理化指标理化指标应符合表2的规定。表2理化指标项目指标检验方法核糖核酸含量(以干基计)/(%)90.0附录A中的A.2鉴
7、别通过试验附录A中的A.3溶解性微溶于水，不溶于酒精中国药典2020版二部凡例第十五条溶解度测定法粒度(80目)过筛不低于80%中国药典2020版四部通则0982粒度和粒度分布测定法第二法(筛分法)PH(0.2%水溶液)3.0-4.2附录A中的A.4干燥减量,w%8.0GB5009.3直接干燥法浊度通过试验附录A中的A.5吸光度比(A260ZA28O)1.8附录A中的A.6脱氧核糖核酸通过试验附录A中的A.7增色效应/(%)20.0附录A中的A.84.3.3污染物限量污染物限量应符合表3的规定。表3污染物限量项目指标检测方法铅(以Pb计)/(mgkg)0.9GB5009.12总神(以AS计)/
8、(mgkg)W1.0GB5009.11总汞(以Hg计)/(mgkg)0.3GB5009.174.3.4微生物要求微生物要求应符合表4的规定。表4微生物要求项目指标检测方法菌落总数/(CFUZg)1000.0GB4789.2霉菌和酵母菌总数/(CFUg)50.0GB4789.15大肠菌群/(MPNg)0.92GB4789.3金黄色葡萄球菌/25g不得检出GB4789.10沙门氏菌/25g不得检出GB4789.45检验规则5.1 组批同原料、同配方、同工艺生产的，同一包装线当天包装出厂（或入库）的，具有同样质量检验报告单的产品为一批。5.2 抽样按表5抽取样品。表5抽样表批量/箱或桶或袋样本大小（
9、袋或桶）1-5025150035005抽取样品三份，签封。粘贴标签，在标签上注明产品名称、生产厂名及地址、批号、取样日期及地点、取样人姓名。一份用于感官、理化、污染物检验，一份用于微生物检验,一份封存，保留半个月备查。做微生物检验时，取样器和玻璃瓶应事先灭菌（样品不得接触瓶口），当抽取的样本总量少于20Og时，应适当加大抽样比例。5.3 出厂检验531出厂检验项目为感官要求、理化指标、污染物限量、微生物要求。5.3.2每批产品须经厂质量监督检验部门按本标准检验合格后方可出厂，并附有合格证明。5.4 型式检验型式检验项目为本标准技术要求中的全部项目。在正常生产时，型式检验每年至少进行一次，有下列
10、情况之一的，亦应进行型式检验。a）原辅材料有较大变化时；b）更改关键工艺或设备时；c）新试制的产品或正常生产的产品停产3个月后，重新恢复生产时；d）出厂检验与上次型式检验结果有较大差异时；e）国家质量监督检验机构按有关规定需要抽检时。5.5 判定规则5.5.1 验收项目均符合本标准规定时，判整批产品为合格品。5.5.2 如有项目指标不合格，应重新自同批产品中抽取两倍量样品进行复验，以复验结6标志、包装、运输、贮存和保质期6.1 标志产品的标志、标签应符合GB7718的规定，储运图示的标志应符合GBZT191的有关规定。6.2 包装包装材料应清洁、干燥、无毒、无异味，符合食品卫生要求，包装应封口
11、严密。6.3 运输6.3.1 运输工具应保持清洁、干燥，无外来气味和污染物。6.3.2 品在运输时，箱子上不应压重物，保持干燥、洁净，不得与有毒、有害、有腐蚀性物品混装混运，避免日晒和雨淋。6.3.3 货物装卸时应轻拿轻放。6.4 贮存6.4.1 成品不得露天堆放，不得与有霉变、有毒、有异味、有腐蚀性物质存放在一起。6.4.2 成品仓库要保持阴凉、干燥、通风。6.5 保质期产品在本标准规定的条件下存放，自生产之日起，保质期为24个月。（规范性）/（资料性）检验方法A.1一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂（AR）和GB/T6682规定的三级水。试验中所用标准溶液、杂
12、质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601、GBZT602和GB/T603的规定制备。试验中所用溶液，在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2核糖核酸含量的测定方法（定磷法）A.2.1试剂除非另有说明，在分析中仅使用确定为分析纯的试剂和纯化水。A.2.L1标准磷溶液精确称取恒重（105lC烘干）的磷酸二氢钾0.4389g（含磷100mg）,用水定容至100mL成为含磷为1mg/mL的标准溶液。使用时精密吸取ImL,于IoOmL量瓶中，用水稀释至刻度，此稀释液含磷量是10gmLA.2.1.2定磷试剂3molL硫酸-水-2.5%铝酸镂-10%抗坏血酸=1:2:1:1
13、（体积比）。此试剂要按上述次序现配现用，置于棕色瓶中，试剂应为淡黄色或浅黄绿色，如呈棕色或深绿色应弃去。10%抗坏血酸溶液应避光保存于冰箱，可用1个月，当溶液变成棕黄色则不能使用。（注：2.5%钳酸镂溶解后应呈透明液体，若为浊状液体不能使用）A21.3沉淀剂（铝酸铁-过氨酸溶液）于193mL纯化水中，加入钳酸铉0.5g,再加70%过氯酸7mL,摇匀，即可。（注：此溶液保存于冰箱，可用一星期）A21.45%氨水溶液取浓氨水（25%28%）IOmL,加水稀释至50mL,摇匀，即得。A.2.1.55molL硫酸溶液用量筒量取浓硫酸30mL,缓缓注入装有50mL纯化水的100mL量瓶中，放冷至室温，加
14、水稀释至刻度，即得。A.2.2仪器设备A.2.2.150mL凯氏烧瓶A.2.2.2小漏斗A.2.2.3IoomL容量瓶A.2.2.4电炉(I(XX)W)A.2.2.5紫外可见分光光度计A.2.3分析步骤A.2.3.1标准曲线的制作按表3依次在试管中加入不同量10gmL标准磷溶液、蒸储水及定磷试剂，摇匀后于45C恒温水浴中保温20min,冷却于室温，于660nm处测定吸收度。以含磷量(g)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。表3标准曲线制作过程杯号标准磷溶液(mL)含磷量(g)蒸储水(mL)定磷试剂(mL)I003.03.020.552.53.031.0102.03.041.5151.53.
15、052.0201.03.062.5250.53.0A.2.3.2样品溶液的制备称取样品0.10OOg(精确至0.1mg),置于25mL小烧杯中，加蒸锵水用玻璃棒搅拌,再加入5%氨水溶液ImL左右，搅拌使样品完全溶解，转入50mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，以测总磷和无机磷。A.2.3.3总磷和无机磷的测定取4个50mL凯式烧瓶，1、2号瓶内各加入2mL蒸储水作为空白对照，3、4号瓶中各加入2mL制备的样品溶液，分别加入3mL5mol/L硫酸溶液，在烧瓶口倒置一小漏斗,置电炉上缓缓加热消化至淡黄色为止，取下冷却至室温，加入2滴30%过氧化氢溶液(勿滴于瓶壁)，放回电炉上继续消化至溶液呈无色透
16、明为止。取出，冷却后加1mL蒸储水,于沸水浴中加热10min,以分解消化过程中形成的焦磷酸。然后将凯式烧瓶中的内容物全部转移到50mL容量瓶中，加水定容至刻度，待测总磷。另取4支IOmL离心试管，于两支中各加2mL蒸储水作为空白对照，另两支中各加2mL样品溶液，分别加入8mL铝酸铉-过氯酸溶液，放冰箱中冷藏30min后取出离心，待A.2.3.4比色测定取总磷液测试组和对照组各2mL,分别加水1mL和定磷试剂3mL；取无机磷上清液测试组和对照组各2mL,分别加水1mL和定磷试剂3mL。同A.2.3.1法进行定磷比色测定，从标准曲线中分别查出总磷和无机磷的微克数。A.2.4结果计算总磷量=查得总磷
17、微克数X625（倍）无机磷量=查得无机磷微克数xl25（倍）核糖核酸干基含量（）=总磷量无机磷量样品重量X（I-水分 ）l（）6340X100%31注：625（倍）：被测总磷液的稀释倍数，即样品定容亳升消化后定容亳升数5050立、取出消化的亳升数X测定时样液的毫升数一2xT-625（Irl）125（倍）：被测无机磷液的稀释倍数，即样品定容毫升数无机磷液的毫升数50Nu立、制备无机磷液时取样的毫升数X测定时样液的毫升数=TX2-125（IU）340：核糖核酸中所含四种核甘酸的平均分子量31：磷的原子量A3鉴别A.3.1称取核糖核酸样品加水制成5mg/mL的溶液，并取1mL该溶液加入3,5-二羟基
18、甲苯溶液（取3,5.二羟基甲苯与三氯化铁各0.1g,加盐酸100mL溶解制得）3mL,在沸水浴中加热20min,溶液显绿色。A.3.2称取本品500mg,加少量水调成糊状，再加水约20mL,用5-6%氨水调节PH至7.0,待核酸全部溶解后定容到100mL容量瓶中，配成5mg/mL的溶液，以3000r/min离心10min后，取上清液0.5mL,加水定容至100mL,配制成25gmL的供试品溶液。以水为空白对照，按照紫外-可见分光光度法，在2582nm波长处有最大吸收。A.4PH值取核糖核酸样品0.20Oog放入IOomL烧杯中，然后加入无二氧化碳水75mL,用玻璃棒搅拌溶解，移入100mL容量
19、瓶中，超声1h,放冷至室温，并用无二氧化碳水定容至100mL,然后用校正好的PH计测定其PH值。同一样品两次测定值之差不应超过0.2。A.5.1.1试剂与材料无浊度水：将蒸储水通过0.2m滤膜过漉，收集于用滤过水荡洗两次的烧瓶中。0.ImolZL氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠4g,加水使溶解，冷至室温后，加水稀释至1000mLo福马册浊度贮备标准液(400FTU)：称取1.0Oog硫酸联氨，用少量无浊度水溶解，移入I(X)mL容量瓶中，并稀释至刻度；称取ISOOg六次甲基四胺，用少量无浊度水溶解，移入IoOmL容量瓶中，并稀释至刻度。分别移取硫酸联氨溶液和六次甲基四胺溶液5.0mL,注入100mL
20、容量瓶中，充分摇匀，在(253)C下保温24h后，用无浊度水稀释至刻度。福马脚浊度标准液(200FTU)：取50mL浊度贮备标准液加入IOomL容量瓶中，用无浊度水稀释至刻度，摇匀。A.5.1.2仪器分光光度计：波长范围360nm910nmPH计100mL容量瓶A.5.1.3分析步骤样品溶液的配制：精密称取本品500mg,于100mL烧杯中，加入75mL纯化水，用玻璃棒搅拌，插入已校准的PH计，缓慢滴加0.1mol/L氢氧化钠溶液并搅拌使完全溶解，并调节PH至6.0.将上述样品溶液转移至100mL容量瓶中，用少量蒸储水洗涤烧杯3次，将洗液并入容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。吸光度测定：分别取浊
21、度标准液(200FTU)和样品溶液，放入Iomm比色皿中，以无浊度水作参比，在波长66Onm处测定吸光度(心)。样品溶液的吸光度应小于浊度标准液，即为通过试验。A.5.2透光率计算法A.5.2.1试剂0.1mol/L氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠4g,加水使溶解，冷至室温后，加水稀释至100OinLoA.5.2.2仪器设备紫外可见分光光度计100mL烧杯100mL容量瓶PH计A.5.2.3分析步骤精密称取本品500mg,于100mL烧杯中，加入75mL纯化水，用玻璃棒搅拌，插入已校准的PH计，缓慢滴加0.1moI/L氢氧化钠溶液并搅拌使完全溶解，并调节PH至6.0。将上述样品溶液转移至100mL容
22、量瓶中，用少量蒸镭水洗涤烧杯3次，将洗液并入容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。测定此溶液660nm下的透光率（T660）。按照下式计算样品的浊度，浊度小于40%即为通过实验。浊度(%) =1-加1-水分(%)100%A.6吸光度比取A.3鉴别A.3.2项下的供试品溶液（25gmL）,以水为空白，按照紫外-可见分光光度法，分别测定26Onm和28Onm波长处的吸光值。并计算比值A260/A280。A.7脱氧核糖核酸A.7.1对照品溶液的制备精密称取脱氧核糖核酸对照品适量，加入0.005mol/L氢氧化钠溶液制成0.05mg/mL的溶液。A.7.2供试品溶液的制备取核糖核酸样品，用0.005mol/
23、L氢氧化钠溶液制成1.0mg/mL（按折干折纯后计算）的核糖核酸溶液。A.7.3测定法精密量取对照品溶液和供试品溶液各2mL,分别加入二苯胺溶液（取二苯胺1g,加冰醋酸100mL,高氯酸IomL,临用前加入1.6%乙醛溶液ImL,混匀）4mL,摇匀，置60C水浴保温1h,迅速放冷；按照紫外可见分光光度法，在600nm波长处分别测定吸收度，供试品溶液的吸收度不得大于对照品溶液的吸收度。A.8增色效应取A.3鉴别A.3.2项下配制的储液（5mg/mL）,加氯化钠-磷酸盐缓冲液（PH7.2）（取磷酸氢二钠1.546g,磷酸二氢钠0.262g,氯化钠8.768g,加水溶解并稀释至IOoomL）按含量测定的结果，制成每ImL中约含12g的溶液，作为供试品溶液。按照紫外-可见分光光度法，在258nm波长处测定吸收度另取供试品溶液6.0mL,置具塞试管中，加饱和的氢氧化钠溶液0lmL,摇匀，加塞，置80C1C水浴中保温IOmin,取出,迅速冷却至富温，在258nm波长处测定吸收度A2,按下式计算，本品的增修隔怫&fX-XXXX20%o增色效应=&X100%A
