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1、环境卫生学监测规范操作解读环境卫生学监测作为医院院感工作的重要工作内容，为医院感染预防和控制提供了重要的参考依据。本文对环境卫生学监测中的空气、物体表面、医务人员手、软式内镜和使用中消毒剂这些常规监测项目进行逐个解读，根据国家规范着重梳理采样检验环节中的具体操作。一、空气监测1、平板暴露法采样操作规范解读1）采样耗材：普通营养琼脂平皿（90mm）。2）采样操作：采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。环境分类培养皿放置数量暴露时间I类环境I级手术室手术区：13周边区：830minH级手术室手术区：4周边区：6Ill级手术室手术区：3周边区：6IV级手术室5IkHkI
2、V类环境房间面积30肝,布5个点（东、南、西、北、中）；其中四个角距墙Imo房间面积30肝，在一条对角线上取3点，即中心一点，两端距墙Im处各取一点。Il类：15minIII、IV类：5mi名词解读：手术区：需要特别保护的手术台及其周围区域。I级手术室：手术台两侧边至少各外推09m,两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域。Il级手术室：手术台两侧边至少各外推06m,两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域。IH级手术室：手术台四边至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域。IV级手术室：不区分手术区和周边区。周边区：洁净手术室内除去手术区之外的其它区域。2、检验操作规范解读1）检验操作
3、:将平皿置36恒温箱培养48h,计数菌落数。2）结果计算：按平均每皿的菌落数报告：CFU/（皿暴露时间）。3、常见错误D暴露时间不够或长时间暴露。影响：这都会对最后的结果准确性产生影响，导致不能达到空气监测的目的。建议：空气监测中的平板暴露法采样应按照环境所属类别暴露对应时间。2）结果计算进行菌落数加和。影响：造成错误的不合格判断。建议：按平均每皿的菌落数与标准值进行比对，手术室的手术区与周边区分开计算平均值。4、问题解答1)问:生物安全柜是否需要进行空气监测？具体怎么进行监测？答：根据SNT3901-2014生物安全柜使用和管理规范721条：生物安全柜的检定周期内应至少开展1次生物安全柜的期
4、间核查；期间核查的内容至少包括垂直气流平均风速、动作窗口气流流向、洁净度。布点情况：采用五点采样法布点进行平板暴露法监测，采样点位置分布示意图为下图Io在每个取样点并列放置3个营养琼脂平皿,共放置15个平皿，暴露30min生物安全柜空气监测布点示意图参考资料：医院消毒卫生标准GB15982-2012医疗机构消毒技术规范WS/T367-2012医院消毒卫生标准GB50333-2013二、物体表面监测1、涂抹采样操作规范解读1)采样液：1Oml无菌0.03molL磷酸盐缓冲液(PBS)或生理盐2）采样操作：采样者使用灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次
5、，并随之转动棉拭子，剪去手接触部分,将棉拭子放入装有采样液的试管中送检。3）采样面积：被采表面=100Cm2,取100cm2o2、检验操作规范解读1）检验操作：充分振荡采样管后,取不同稀释倍数的洗脱液1.0mL接种平皿,将冷至40-45的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL20mL,36oC1C恒温箱培养48h,计数菌落数。2）结果计算：物体表面菌落总数（cfcm2）平均每皿菌落数*采样液稀释倍数采样面积（cm2）3、常见错误D未使用规格板采样。影响：采样面积与结果计算的采样面积不一致，导致最后的计算结果不准确。建议：2）转皿量不确定，较多医院通过棉签涂抹进行转皿。影响：棉签涂抹转皿无法精确计算
6、转皿量，导致结果计算公式中的稀释倍数不准确。建议：使用有刻度的无菌吸管或数字移液枪进行固定Iml的吸取转皿。3）棉拭子不蘸取采样液，直接干采。影响：导致最后的结果值偏低。建议：使用浸有采样液的棉拭子进行涂抹采样。4、问题解答D问：实际物表采样时，采样面积如何确定？答：如果被采面积小于100cm2,取全部表面，比如：门把手等小型物体，此时无需使用规格板；当被采样面积100cm2时，需要借助规格板取100Cm2的采样面积。2)问：规范中指出：若采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。那对应的中和剂应如何选取？答：根据表1进行对应中和剂的选取消毒剂中和剂醇类与酚类消毒剂普通营养肉汤含氯消毒
7、剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂0.现硫代硫酸钠中和剂氯己定、季钱盐类消毒剂0.3%吐温80和0.3%卵磷脂中和剂醛类消毒剂0.3%甘氨酸中和剂表面活性剂的复方消毒剂3%吐温80表1常用消毒剂对应的中和剂参考资料：医院消毒卫生标准GB15982-2012医疗机构消毒技术规范WS/T367-2012三、医务人员手卫生消毒效果监测1、采样操作规范解读1)采样液：1Oml无菌0.03molL磷酸盐缓冲液(PBS)或生理盐2）采样操作：被检人员五指并拢，将浸有采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采样棉拭子，除去手接触部位，将棉拭子放入IOml采样液的试管内送检。3）采样面
8、积：采样面积按平方厘米（Cm2）计算，一只手涂擦面积约30cm2o注意事项：1）若采样时手上有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。具体中和剂的选取参考表12、检验操作规范解读1）检验操作：充分振荡采样管后,取不同稀释倍数的洗脱液LOmL接种平皿,将冷至40-45的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL20mL,36oC1C恒温箱培养48h,计数菌落数。2）结果计算：枷徐主石凿女廿拈Am2、一平均每皿菌落数*采样液稀释倍数物体表面菌洛总数（CfU/cm2）=30*23、常见错误D采样位置错误，部分医院会存在棉拭子涂抹手背和指缝的情况。建议:加强对采样人的培训I,按标准进行指根到指端的涂抹采样。2）转
9、皿量不确定，较多医院通过棉签涂抹进行转皿。影响：棉签涂抹转皿无法精确计算转皿量，导致结果计算公式中的稀释倍数不准确。建议：使用有刻度的无菌吸管或数字移液枪进行固定Iml的吸取转皿。3）棉拭子不蘸取采样液，直接干采。影响：导致最后的结果值偏低。建议：使用浸有采样液的棉拭子进行涂抹采样。参考资料：医院消毒卫生标准GB15982-2012医疗机构消毒技术规范WS/T367-2012四、软式内镜清洗消毒效果监测1、采样操作规范解读1）采样液：50ml含相应中和剂的洗脱液。2）采样操作：用无菌注射器抽取洗脱液，采内镜的内腔面从内镜活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集送检。2、检验操作规范解读D检验操作：将
10、洗脱液充分混匀，取洗脱液ImI接种平皿，加入已溶化的4045C的营养琼脂1520ml;置36C1C恒温培养箱48h,计数菌落数（cfu件）；将剩余洗脱液在无菌条件下采用滤膜（0.45um）过滤浓缩,将滤膜接种于凝固的营养琼脂平板上（注意不要产生气泡）。置36C1C恒温培养箱48h,计数菌落数；2）结果计算：当滤膜法不可计数时：菌落总数（cfu件）=m（cfu平板）x50；式中m为培养皿的平均菌落数。当滤膜法可计数时：菌落总数（CfU/件）=m（Cfu/平板）+mf（cfu滤膜）；式中m为培养皿的平均菌落数；mf为滤膜上菌落数。3、常见错误D采样不规范：随机倾倒不定量采样液。影响：菌落总数计算不
11、准确。建议：使用无菌注射器抽取50ml采样液进行冲洗采样。2）转皿量不确定，较多医院通过棉签涂抹进行转皿。影响：棉签涂抹转皿无法精确计算转皿量，导致结果计算公式中的倍数不准确。建议：使用有刻度的无菌吸管或数字移液枪进行固定Iml的吸取转皿。3）消毒内镜未按规范进行轮捡。建议：根据软式内镜清洗消毒技术规范WS507-2016：监测采用轮换抽检的方式,每次按25%的比例抽检。内镜数量少于等于5条的，应每次全部监测;多于5条的,每次监测数量应不低于5条。参考资料：医院消毒卫生标准GB15982-2012软式内镜清洗消毒技术规范WS507-2016五、使用中消毒剂监测1、采样操作规范解读D采样操作：用
12、无菌吸管或无菌注射器按无菌操作方法吸取1.0ml被检消毒剂，加入9ml中和剂中混匀。2、检验操作规范解读1）检验操作：用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和后混合液1.Oml接种平皿，加入已溶化的4045C的营养琼脂1520ml;将平皿放置36C1C恒温培养箱72h,计数菌落数。2）结果计算：消毒液染菌量二平均每皿菌落数XlOX稀释倍数3、常见错误D消毒剂培养时间错误。影响：导致读取的菌落数会比实际情况少。建议：消毒剂转皿后培养72h之后，再进行菌落数读数。2）使用IOmI中和剂与被采消毒剂混匀，且结果计算公式未对应更改。影响：消毒液染菌量结果不准确。建议：耗材使用9ml中和剂。4、问题解答D问：含氯消毒剂是否需要进行常规的染菌量监测？答：规范未规定含氯消毒剂进行常规染菌量监测。根据病区医院感染管理规范WS/T510-2016：使用不稳定消毒剂如含氯消毒剂、过氧乙酸等时，应现配现用，并在每次配制后进行浓度监测。怀疑医院感染暴发与消毒剂污染有关时，应对消毒剂进行监测，并针对目标性微生物进行检测。
