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1、第1章发酵工程章节测试一、单选题1 .下列关于传统发酵技术操作及原理的叙述错误的是（）A.果酒发酵和腐乳制作中主要参与的微生物都含线粒体B.发酵过程都要进行严格的无菌操作C.发酵过程中主要参与的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNAD.果酒和果醋制作过程中发酵液PH都逐渐降低2 .老面是指馒头发酵后剩下的含有酵母菌的生面团，可用于再次发酵。老面发酵与酵母发酵的基本原理相同，但由于老面中混有杂菌，在酵母菌将葡萄糖分解成酒精后，部分酒精可进一步被氧化成乙酸，导致面有酸味。为了中和酸味，人们常往发面中加入适量食用碱，碱与乙酸发生反应的同时能产生CO?下列说法正确的是（）A.葡萄糖分解生成酒精的过程
2、属于吸能反应B.老面发酵时有酸味可能是因为醋酸菌在缺氧条件下将酒精转化成乙酸C.酵母菌和醋酸菌的代谢类型相同D.老面发酵时添加的食用碱可使面团更膨松3 .下列关于对微生物筛选的叙述中，不正确的是（）A.用含酚红的培养基筛选出能分解尿素的菌株B.用不含碳源的培养基筛选出自养微生物C.利用高温培养条件筛选耐热的Taq细菌D.用高浓度NaCl的培养基筛选耐盐突变菌株4 .发醉工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养、接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。下列关于发酵工程的认识不科学的是（）A.发酵工程具有条件温和、产物单一和污染小的特点B.发酵工程的产品包括微生物的代谢物、菌体本身C.
3、通常所指的发酵条件包括温度、溶解氧和PH的控制D.发酵工程与传统发酵技术都需要添加菌种5 .下图为传统黄酒酿制的主要工艺流程。其中加酒药后的1012h为前发酵，随后的6d左右为主发酵，最后是30d左右的后发酵。下列说法错误的是（）浸米-蒸煮,冷却一落缸搭窝一糖化、发酵一加曲冲缸一开耙+后发酵一煎酒一包装tt酒药水、麦曲A.蒸煮的主要目的是除去杂菌，利于酵母菌进行繁殖B.黄酒酿制过程中酵母菌的有氧和无氧呼吸都会发生C.主发酵阶段开耙搅拌，可以防止温度过高影响发酵D.煎酒目的是杀死酒中的大多数微生物，延长保存期6 .土壤具有微生物生长繁殖需要的一切营养物质及各种条件，是微生物良好的生活场所，素有“
4、微生物的天然培养基”之称。下列说法错误的是（）A.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同C.在统计菌落数目时，为了保证结果准确，一般采用数目较大的平板进行计数D.显微镜直接计数法的统计结果一般是活菌数和死菌数的总和7 .水生植物浮萍生长速度快、富含淀粉，在工业上可作为微生物发酵生产乙静的原料。下列分析正确的是（）A.发酵过程中淀粉先水解为蔗糖，蔗糖再水解为葡萄糖B.发酵产物乙醇可用漠麝香草酚蓝水溶液来鉴定，颜色变化为蓝T绿一黄C.发酵产生乙醇过程中能量转化的完整表示是：
5、稳定化学能一活跃化学能和热能D.葡萄糖分解产生丙酮酸的过程中生成少量ATP,丙酮酸转化为乙醇过程中不生成ATP8 .齐民要术记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列叙述错误的是（）A.该方法依据的原理是醋酸菌在氧气、糖源充足时将酒精转化为醋酸B.加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高醋酸菌失水过多C. “衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的D. “挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧9.下列关于制备牛肉膏蛋白脓固
6、体培养基的说法，错误的是（）A.先调节pH,再将培养基进行灭菌B.锥形瓶中的培养基灭菌后才能倒平板C.倒平板时锥形瓶的棉塞可以随意放置D.平板冷却凝固后，要将平板倒过来放置IO.青霉菌产生的青霉素是人类发现的第一种抗生素。青霉素发酵过程中，总会产生头抱霉素。青霉菌产生青霉素的代谢途径如下图所示，下列关于青霉素工业化生产的叙述不正确的是（）青震素前体物质A.将血红蛋白基因转入青霉菌中有可能提高菌体对氯的吸收和利用率B.发酵过程中，环境条件变化会影响微生物的生长繁殖和代谢过程C.菌种选育时，敲除青霉菌株中控制酶B合成的基因可使其只产青霉素D.分离、提纯产物以获得微生物细胞本身或其代谢产物是发酵工程
7、的中心环节H.某同学设计了如图所示的果酒和果醋发酵装置，下列有关叙述正确的是（）A.进行果醋和果酒发酵的最适温度相同B.该装置既可阻止空气进入，也便于发酵产生的气体排出C.去除弯管中的水，该装置即可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D.发酵过程中，发酵液的PH逐渐降低，密度逐渐升高12 .传统发酵技术在食品工业中有着广泛的应用，下列有关叙述错误的是（）A.利用啤酒酵母生产啤酒时一般先通入适量氧气，后密封发酵B.家庭制作果酒、果醋时不需对发酵原料严格灭菌C.制作果醋所需的适宜温度比制作果酒所需适宜温度高D.制作腐乳用到的主要菌种属于原核生物二、多选题13 .下列关于传统发酵技术的说法中，
8、错误的是（）A.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖B.制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将前葡中的糖分解为乙酸C.多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等D.制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳14 .生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（）A.倒成平板后直接培养可判断有无污
9、染B.制备平板时，培养基需先灭菌再倒平板C.生长图形法还可用于某些菌种的筛选D.图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙15.塑料是“白色污染的主要元凶”，降解塑料微生物的筛选有助于解决该难题。如图I是研究人员从蜡螟消化道中分离高效降解聚乙烯细菌的操作流程，图2是菌种筛选的结果。下列有关叙述正确的是（）图1图2注：聚乙烯是某些塑料的主要成分，菌种筛选所用固体培养基中因含有聚乙烯微粒而不透明。A.应选择菌落Al进行扩大培养B.扩大培养应选择固体培养基C.培养基中聚乙烯的作用是筛选目的菌和为目的菌提供碳源D.与焚烧相比，利用目的菌降解聚乙烯塑料具有不造成二次污染的优点16.热纤梭菌是一种能高效降解纤维素
10、的嗜热厌氧细菌，可分泌一种多酶复合体将纤维素水解为可溶性糖，在农林废弃物的转化利用中具有应用价值。图是筛选该菌的过程,相关叙述正确的是()B.甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培养基C.用平板乙统计菌落数可准确反映该菌的真实数量D.丙中纤维素的残留量可反映该菌降解纤维素的能力三、非选择题17 .如图甲表示制备固定化酵母细胞的有关操作示意图，乙是固定化细胞或固化酶发酵装置示意图，请回答下列问题：(1)制备凝胶珠需要无菌操作，对需要使用的玻璃器皿，一般用法灭菌。(2)图甲中X溶液为,其作用是o一般用包埋法而不用化学结合法固定酵母细胞的原因是O(3)将固定化酵母细胞和浓度为10%的葡萄糖溶液加入图乙
11、所示反应柱中，置于25C下发酵24h,打开活塞2放出发酵液，用溶液检测，观察发酵液是否呈现灰绿色。通过对发酵液进行可得到纯度较高的酒精。(4)淀粉可以被-淀粉酶分解为糊精。石英砂能吸附a淀粉酶，可以作为固定化酶的载体。将洁净的石英砂与a淀粉酶混合后装入反应柱中，需用蒸储水充分洗涤，其目的是o再将配制好的淀粉溶液加入到反应柱中，然后取一定量的流出液用Kl一1检测(糊精用KIL检测呈现红色)，结果如下表所示。若各组呈现的红色有显著差异，则流出液中淀粉水解产物浓度最高的是组。组别反应柱长度(cm)反应柱中的淀粉溶液的流速(mLmin)I150.4II150.2III100.4IV100.218 .乙
12、醇等“绿色能源的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为:(1)玉米秸秆预处理后，应该选用酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。(2)从以下哪些微生物中可以提取上述酶？A.酿制果醋的醋酸菌B.生长在腐木上的霉菌C.制作酸奶的乳酸菌D.制作果酒的酵母菌E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物(3)若从土壤中分离生产这种酶的微生物，所需要的培养基为(按功能分)，培养基中的碳源为O(4)从生物体提取出的醐首先要检测,以便更好地将前用于生产实践。(5)发酵阶段需要的菌种是,生产酒精时要控制的必要条件是O19 .发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产
13、品的过程。发酵工程则是通过现代工程技术，利用微生物的特定功能，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。请据此回答与发酵及发酵工程相关的问题。(1)在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中,所利用的主要的微生物分别来自于葡萄皮上的和空气中的o酿酒时，会因操作不当使酒变酸，此时在酒的表面会观察到一层膜，产生膜的原因是O(2)现代发酵工程中所利用的微生物需要使用选择培养基进行严格筛选，在微生物学中，将的培养基称为选择培养基。在筛选微生物时，可使用接种环在选择培养基上进行接种这种接种方法称为。(3)利用发酵工程可以大量生产产品，发酵工程的中心环节是o在发酵过程中，需要随时
14、检测培养液中微生物的数量以及等，以了解发酵进程。(4)青霉菌在一定条件下可产生青霉素，青霉素具有杀菌的作用，有同学认为利用青霉菌发酵生产青霉素的过程中不必担心杂菌的污染，你是否认同这样的观点，为什么？O(5)为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌L6xl06个，在4个培养基上分别接种的土壤样液0.1mL,培养后菌落数分别为170、155、176、139个，则土壤样品的稀释倍数为,测定的活菌数比实际活菌数o(填“低”“高”或“基本一致”)20 .食醋起源于中国，具有悠久的历史，春秋战国时期周礼中记载“酷入主酶”，“酶”是指食醋和其它各种酸味品。传统固态酿醋工艺是我国宝
15、贵的民族文化遗产，工艺流程如下图。回答下列问题。I酶制剂I3II稻米一粉碎一A蒸煮一A糖化f酒精发酵一A酒酷、拌戴皮成品一贮存一浓缩一淋醋一封陪一醋酸发酵,画0(1)图中加入的菌种a是O酒精发酵前期，溶液中营养丰富，并有一定量的溶解氯，菌种a会,之后菌种a达到一定浓度后，在无氟的条件下将葡萄糖分解为O(2)菌种b的最适生长温度为o当缺少糖源时，菌种b利用乙醇生成醋酸的过程是O(3)款皮能疏松醋酪、积存和流通空气，醋酸发酵前拌熟皮的目的是,将淋出的生醋经过沉淀进行高温浓缩，高温浓缩有的作用。(4)为纯化和接种醋酸菌，可采用下图中(填字母)所示的划线分离操作。若在划线操作过程中，第一区域划第一条线
16、后灼烧了接种环，则第一区域将出现的现象是；第二区域划线前接种环灼烧后未冷却就开始划线，则第二区域将出现的现象是O21.泡菜是常见的自制食品。为提高泡菜品质，某兴趣小组选取了多个不同的乳酸菌菌种分别进行发酵实验，流程如图所示。回答下列问题：对照组萝卜切条f耀、一加入盐水f装坛发解f定期检测立胎州萝卜酉精消毒、无心加入盐水、f装坛f午期2涮头丸出切条f水清洗、晾晒f接种乳酸菌”发醉fx期检测(1)常见的乳酸菌种类有(答出1种)，其代谢类型均为,因此在发酵过程中应注意(写具体操作，写出2点)。(2)加入的盐水质量分数为一，浓度过高会导致(写出2点)。(3)对照组没有接种也能发酵，原因是o从实验结果分
17、析，图中适合泡菜发酵的菌种为,依据是 OJ1il-IILF.12345时间/d 1234 5时间后参考答案:1. B【分析】果酒制作菌种是酵母菌，代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是1825、前期需氧，后期不需氯，果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是3035、一直需氧；腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为1518：毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。【详解】A、果酒发酵利用的是酵母菌，腐乳制作过程中主要起作用的是毛霉
18、，毛霉属于真核生物，酵母菌和毛霉的细胞均有线粒体，A正确；B、传统发酵技术利用的原料中带有的微生物，不需要经过严格灭菌，B错误；C、传统发酵过程中主要参与的菌种，如酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌等都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA,C正确；D、果酒制作过程中酵母菌无氧呼吸会产生酒精和二氧化碳，二氧化碳溶于发酵液中形成碳酸，果醋制作过程中醋酸菌代谢产生了醋酸，因而果酒制作和和果醋制作过程中发酵液PH都逐渐降低，D正确。故选B。2. D【分析】酵母菌在有氧和无氧的条件下都能生活：在有氧时，酵母菌大量繁殖，但是不起到发酵效果；在无氧时，繁殖速度减慢，但是此时可以进行发酵（酒精发酵【详解】A、葡萄糖分
19、解生成酒精的过程属于无氧呼吸，产生少量ATP,属于放能反应，A错误；B、老面发酵时有酸味可能是因为醋酸菌在氧气充足条件下将酒精氧化成乙酸，B错误；C、酵母菌和醋酸菌的代谢类型分别是异养兼性厌氧型和异养需氧型，两者代谢类型不同，C错误；D、老面发酵时添加的食用碱，碱与乙酸发生反应的同时能产生CO?可使面团更膨松，D正确。故选D。3. A【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用，通过选择培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。【详解】A、尿素分解菌可以将尿素分解成氨，使酚红指示剂呈红色，应用以尿素为唯一氮源的培养基筛选分解尿素的菌株，可以用含酚
20、红的培养基进行鉴别，A错误；B、不含碳源的培养基能筛选出自养型的微生物，异养型的缺乏碳源不能存活，故可用不含碳源的培养基筛选出自养微生物，B正确；C、高温能抑制细菌生长，但耐热的Taq细菌可在高温中正常生长，因此可利用高温起到筛选作用，C正确；D、高浓度的NaCl抑制细菌生长，可能造成细菌脱水死亡，但耐盐突变菌株可在高浓度NaCl培养基中生长，故可用高浓度Nacl筛选耐盐突变菌株，D正确。故选Ao4. D【分析】发酵工程是利用微生物的生长和代谢活动来生产人们所需产品的工程技术。发酵工程要控制最适发酵的条件、使微生物生长并产生大量的代谢产物；发酵时培养基应满足微生物的需要，要给微生物提供适宜的温
21、度、溶解氧和PH值。在发酵中尽量使培养基原料利用率高，发酵后所形成的副产物尽可能要少，尽可能多的得到特定的发酵产品。【详解】A、发酵工程要控制最适发酵的条件、使微生物生长并产生大量的代谢产物；在发酵中要避免外来微生物的污染，尽量使培养基原料利用率高，发酵后所形成的副产物尽可能要少，尽可能多的得到特定的发酵产品。因此发酵工程具有条件温和、产物单一和污染小的特点，A正确；B、发酵工程就是为了得到某些符合人们需求产品（即微生物的代谢物），所以控制的发酵条件适合特定微生物的生长，因此发酵工程的产品包括了微生物的代谢物、菌体本身，B正确；C、发酵时培养基应满足微生物的需要，要给微生物提供适宜的温度、溶解
22、氧和PH值：所以通常所指的发酵条件主要包括温度、溶解氧和PH的控制，C正确；D、传统发酵技术一般不需要添加菌种，而是利用自然环境中的微生物，发酵工程则需要在严格灭菌的条件下，接种特定的菌种，D错误。故选D。5. A【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。【详解】A、大米蒸煮的目的是杀死杂菌并使淀粉糊化，有利于米曲中淀粉酶发挥作用，A错误；B、黄酒酿制过程中酵母菌的有氧和无氧呼吸都会发生，其中前期有氧呼吸可保证酵母菌大量繁殖，后期无氧呼吸进行发酵产生酒精，B正确；C、酒精发酵需
23、要适宜的温度，主发酵阶段开耙搅拌，可以防止温度过高影响发酵，C正确；D、煎酒目的是杀死啤酒中的大多数微生物，减少有机物的消耗，以延长它的保存期，D正确。故选Ao6. C【分析】测定培养液中微生物的数目，可采用显微镜直接计数（或血细胞计数板计数）法对培养液中的微生物直接计数，也可用稀释涂布平板法将微生物接种于灭菌后的固体培养基上,培养一段时间后，通过计数菌落数目计算培养液中微生物的数目由于采用第一种方法计数时不能剔除死菌，因此统计的结果往往偏大;采用第二种方法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以第一种方法统计的数目比实际活菌数目高，第二种方法统计的数目比实际活菌数
24、目低【详解】A、土壤是微生物的天然培养基，土壤中各类微生物的数量不同，为获得不同类型的微生物需要按不同的稀释倍数进行分离，样品的稀释度直接影响平板上菌落生长的数目，A正确；B、土壤中含有多种微生物，且土壤中各类微生物的数量不同，为了获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，可见，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释度范围不同，B正确；C、为了保证结果准确，一般采用菌落数为30-300的平板进行计数，C错误；D、显微镜直接计数时，由于不能区分活菌和死菌，因此统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，统计结果比实际数值偏大，D正确。故选C。7. D【分析】1、二
25、氧化碳的鉴定可用澄清的石灰水或溪麝香草酚蓝水溶液，前者的反应现象是石灰水变浑浊，后者的现象是溪麝香草酚蓝溶液由蓝色变黄色再变绿色。2、酒精可用酸性条件下的重倍酸钾溶液鉴定，实验现象是橙色变灰绿色。【详解】A、发酵过程中淀粉先水解为麦芽糖，麦芽糖再水解为葡萄糖，葡萄糖再生成乙醇，A错误；B、发酵产物乙醇可用酸性重倍酸钾来鉴定，颜色变化为橙色T灰绿色，B错误；C、淀粉和乙醇中的能量都是稳定的化学能，发酵产生乙醇过程中能量转化的完整表示是：稳定化学能T活跃化学能、热能和稳定化学能，C错误；D、葡萄糖分解产生丙酮酸的过程为细胞呼吸第一阶段，生成少量ATP,丙酮酸转化为乙醇过程为无氧呼吸第二阶段，不生成
26、ATP,D正确。故选D。8. A【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-35C。【详解】A、该方法的原理是醋酸菌在氧气充足、缺少糖源时可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，A错误；B、加水的目的是对“酒”进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌（失水过多），B正确；C、醋酸菌对氯气的含量特别敏感，“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C正确；D、
27、醋酸菌是一种好氧菌，“挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氯，D正确。故选A。【点睛】9. C【分析】制备牛肉膏蛋白膝固体培养基：（1）计算：依据是培养基配方的比例。（2）称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取。牛肉膏和蛋白陈易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸一加蛋白陈和氯化钠T加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）一补加蒸储水至100mL。（4）调pH。（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌。（6）倒平板。【详解】A、如果灭菌后才调pH,加入的酸或者碱液可能会造成新的杂菌污染，
28、所以先调pH,再灭菌，A正确；B、若倒平板后再灭菌，培养皿中的培养基会沸腾，到处飞溅，所以先在锥形瓶中灭菌，再倒平板，B正确；C、棉塞拿在手里，不能随意放置，会导致微生物污染棉塞，C错误：D、平板冷却凝固后需要倒过来放置，防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，D正确。故选C。10. D【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而
29、可以得到较为专一的产物。【详解】A、青霉菌是需氧型微生物，血红蛋白能运输氧气，将血红蛋白基因转入青霉菌中有可能提高菌体对氧的吸收和利用率，A正确；B、微生物的生长繁殖需要适宜的温度、PH和溶解氧等培养条件，发酵过程中，环境条件变化会影响微生物的生长繁殖和代谢过程，B正确；C、结合图示可以看出，若能将控制酶B合成的基因敲除，则青霉菌能大量生产青霉素，因此选育菌种时，可对青霉菌株中控制酶B合成的基因进行敲除，使其只产青霉素，C正确；D、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，D错误。故选D。11. B【分析】果酒制作的原理：先通气，酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖，后密封，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。果醋制
30、作的原理：醋酸菌是嗜温菌，也是嗜氧菌，因此其进行果醋发酵时需要不间断的供氧。【详解】A、果酒发酵的最适温度是1830C,果醋发酵的最适温度是3035C,A错误；B、果酒发酵需要无氧环境，该装置鹅颈中的水可以隔绝空气，创造无氧环境，果酒发酵中产生的气体是二氧化碳，该装置便于二氧化碳的排除，B正确。C、醋酸菌是好氧菌，即使去除方管中的水，该装置也不能满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌呼吸所需的氧气，C错误；D、果酒发酵过程中，葡萄糖分解变成泗精，因此发酵液密度会逐渐减小；同时PH会逐渐降低，呈酸性，D错误。故选B。12. D【分析】参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳
31、制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。【详解】A、利用啤酒酵母生产啤酒时一般先通入适量氧气，让其进行有氧呼吸，大量繁殖，然后密封发酵，产生大量的酒精，A正确；B、家庭制作果酒、果醋时，是利用发酵原料中的菌种，所以不能严格灭菌，B正确；C、果酒制作过程中的发酵温度是1830,果醋制作过程中的发酵温度是3035C,C正确；D、制作腐乳用到的主要菌种是毛霉，毛霉属于真核生物，D错误。故选D。13. BD【分析】参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬
32、菜、谷物上，具有发达的白色菌丝。毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。【详解】A、果酒的制作原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖，A正确；B、制作果醋需要醋酸菌，它是一种好氧的微生物，可将葡萄中的糖（或乙醇）分解为乙酸，B错误；C、多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正确；D、制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸，D错误。故选BDo14. ABC【分析】据图分析，菌落主要分布于添加了乙和丙的区域的交界处，说明该嗜热菌所需生长
33、因子为丙和乙，据此分析。【详解】A、平板上不含任何生长因子，若倒成平板后直接培养，出现菌落，说明已被杂菌感染，因为该嗜热菌不能在缺乏生长因子的培养基中生长，A正确；B、制备平板时，先灭菌再倒平板，B正确；C、不同菌种所需生长因子不同，可利用生长图形法筛选菌种，C正确：D、图中菌落生活在乙丙区域之间，说明同时需要生长因子乙和丙，D错误。故选ABCo15. ACD【分析】按照物理状态对培养基进行分类，可以分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基，一般在固体培养基上进行选择、鉴定等操作，液体培养基用于扩大培养，增加目的菌浓度。【详解】A、降解聚乙烯的细菌将固体培养基中的聚乙烯微粒分解后，培养基中会出
34、现透明圈，透明圈直径与菌落直径之比越大，分解塑料的能力越强，因此应选择菌落Al进行扩大培养，A正确；B、扩大培养应选择液体培养基，B错误：C、聚乙烯是某些塑料的主要成分，培养基中聚乙烯的作用是筛选目的菌和为目的菌提供碳源，C正确：D、与焚烧相比，利用目的菌降解聚乙烯塑料具有不造成二次污染的优点，D正确。故选ACDo16. ABD【分析】由题意知：热纤梭菌是一种能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌，能分泌一种多酶复合体将纤维素水解为可溶性糖，故可以利用以纤维素为唯一碳源的选择培养基将其筛选出来。【详解】A、由题干可知“热纤梭菌是一种嗜热厌氧细菌”，牛粪堆的深层比表层氧气含量更低，温度更高，因此从牛粪堆
35、的深层取样比从表层取样更加合理，A正确；B、热纤梭菌是一种能高效降解纤维素的细菌，图示是筛选能高效降解纤维素的嗜热厌氧细菌，因此甲、丙都是以纤维素为唯一碳源的选择培养基，B正确；C、根据图乙的菌落分布特征，可知为稀释涂布平板法接种的菌种，由于当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落，因此用该方法统计的菌体数量会比活菌的实际数量少，C错误；D、热纤梭菌能分泌一种多酶复合体将纤维素水解为可溶性糖，丙中纤维素的残留量越少说明该菌分解纤维素的能力越强，因此丙中纤维素的残留量可以反映该菌降解纤维素的能力，D正确。故选ABDo17. (1)干热灭菌(2) CaCI2溶液使海藻酸钠与酵母菌混合
36、液形成凝胶珠酵母菌细胞体积大，难以与载体结合(3) 酸性(浓硫酸酸化)的重铝酸钾蒸储(4) 除去未吸附的-淀粉酶II【分析】固定化细胞的相关知识点，制作过程中的注意事项：(1)酵母细胞的活化。(2)配置氯化钙溶液:要用蒸储水配置。(3)配制海藻酸钠溶液：小火、间断加热、定容，如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。(4)海藻酸钠溶液与酶母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入气泡。(5)制备固定化酵母细胞:高度适宜，并匀速滴入。(1)实验室中常用的灭菌方法是灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，对需要使用的玻璃器皿，一般用干热灭菌法灭菌。(2)据图可知，图甲表示固定化酵母细胞过程，X溶液为CaC
37、I2溶液，该实验中CaCl2溶液的作用是使海藻酸钠胶体发生聚沉，形成凝胶珠。固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法(交联法)，由于细胞相对于酶来说体积更大，难以被吸附或结合，因此多采用包埋法。(3)酒精检测用酸性的重倍酸钾，酸性的重倍酸钾能与酒精反应形成灰绿色。酒精具有挥发性,通过对发酵液进行蒸储可得到纯度较高的酒精。(4)用蒸储水洗涤固定化酶柱的目的是洗掉未吸附的a-淀粉酶，防止产物中混有酶等物质。淀粉可以被a淀粉酶分解为糊精，可以用KI-L检测，呈现的颜色是红色。根据表格分析4组实验如果反应时间越充分，则反应就越充分，流出物中糊精的含量就越高。因II组的固定化酶柱长度最长，淀粉溶液的
38、流速也最慢，所以它的流出物中糊精的含量最高。【点睛】本题考查固定化细胞的相关知识，意在考查学生能从题图中提取有效信息并结合这些信息，运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确结论的能力。M(密封、密闭)【分析】用植物秸秆生产酒精是利用微生物进行发酵的过程。植物秸秆中的有机物主要是纤维素，需要纤维素酶才能将其水解成葡萄糖，生长在腐木上的霉菌及反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中含有纤维素酶，若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所用的培养基为选择培养基，利用的碳源为纤维素。发酵阶段需要的菌种是酵母菌，生产酒精时要控制的必要条件是无氧(密封、密闭
39、)。【详解】(1)植物细胞的细胞壁的主要成分是纤维素，所以其经过预处理后应该选用纤维素酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。(2)因为纤维素分解酶存在于分解纤维素的微生物中，故应从富含纤维素的环境中去寻找纤维素分解菌。生长在腐木上的霉菌和反刍动物瘤胃中生存的某些微生物可以分解纤维素。所以B、E选项是正确的。(3)若从土壤中分离产生这种酶的微生物，需要用以纤维素为唯一碳源的培养基进行筛选，所用的培养基为选择培养基，利用的碳源为纤维素。(4)从生物体提取出的酶首先要检测酶的活力(活性)，只有具有较高活性的酶才能更好满足生产的需求，才能更好地将酶用于生产实践。(5)酵母菌在无氟的条件下产生酒精，所
40、以发酵阶段需要的菌种是酵母菌，在产生酒精时要控制的必要条件是无氧(密闭、密封)。【点睛】本题考综合考察了微生物的筛选原理和工业酒精的生产原理。理解并灵活应用微生物的筛选原理，合理控制发酵条件是本题的考察重点。19.(1)酵母菌毛霉醋酸菌在液面大量繁殖形成(2) 允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长平板划线法(3) 发酵罐内发酵产物浓度(4)不认同，因为青霉素只能杀灭部分杂菌，在青霉素生产过程中如果污染了杂菌某些杂菌会产生酶将青霉素分解掉(5)IO3低【分析】测定培养液中微生物的数目，可采用显微镜直接计数(或血细胞计数板计数)法对培养液中的微生物直接计数，也可用稀释涂布平板法
41、将微生物接种于灭菌后的固体培养基上，培养一段时间后，通过计数菌落数目计算培养液中微生物的数目。由于采用第一种方法计数时不能剔除死菌，因此统计的结果往往偏大;；采用第二种方法计数时，当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,所以第一种方法统计的数目比实际活菌数目高,第二种方法统计的数目比实际活菌数目低。(1)在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别来自于葡萄皮上附着的野生酵母菌和空气中的毛霉。酿酒时，若因操作不当使酒变酸，应该是醋酸菌活动的结果，此时在酒的表面会观察到一层膜，该膜的产生是醋酸菌在液面大量繁殖形成的。果酒变酸也是醋酸菌进行细胞呼吸的结果。(2)现代
42、发酵工程中所利用的微生物需要使用选择培养基进行严格筛选,选择培养基是指能够允许某些微生物生长，同时抑制另外一些微生物生长的培养基称为选择培养基。在筛选微生物时，可使用平板划线法在选择培养基上进行接种，这样通过逐步划线可获得单菌落，该接种方法用到的接种工具是接种环。(3)利用发酵工程可以大量生产产品，微生物在发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。该过程中需要保证微生物的正常生长，从而有利于获得需要的发酵产品，在发酵过程中，需要随时检测培养液中微生物的数量以及产物浓度等，以了解发酵进程，同时也可对发酵的条件进行适当的调整。(4)青霉菌在一定条件下可产生青霉素，青霉素具有杀菌的作用，有同学认为利用青霉菌
43、发酵生产青霉素的过程中不必担心杂菌的污染,这种观点是错误的,青霉菌产生的青霉只能抑制细菌和放线菌的生长和繁殖，况且也并不是所有的细菌都能被青霉素抑制，同时青霉素对真菌起不到杀灭的作用，且杂菌污染可能会影响青霉素的产量或者导致青霉素被分解，因此用青霉菌发酵生产青霉素的过程中依然需要防止杂菌的污染。(5)为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌1.6x106个，在4个培养基上分别接种的土壤样液0.1mL,培养后菌落数分别为170、155、176、139个，这里可以设稀释倍数是X,可列出方程式为(170+155+176+139)40.1x=1.6106,解得x=10即土壤样
44、品的稀释倍数为IO3,该方法测定的活菌数比实际活菌数“低皿高，这是因为当两个或两个以上的菌体聚集在一起时，我们通常记作一个菌落。(2) 3035C先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸(3) 醋酸菌为好氧细菌，拌秋皮有利于醋酸菌的繁殖和代谢杀菌(4) A第一条线上有菌落，第二、三条线上无菌落第二划线区域所划的第一条线上无菌落，第二、三条线上有菌落【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌适宜生长繁殖的温度范围是1830C;生产中是
45、否有酒精的产生，可用酸性重格酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为3035。【详解】(1)制酒常用的微生物是酵母菌，故图中加入的菌种a是酵母菌；酵母菌是兼性厌氯菌，在有氧的条件下会大量繁殖，故发酵前期，菌种a会大量繁殖：酵母菌在无氟条件下进行无氧呼吸将葡萄糖分解为酒精和二氧化碳。(2)醋酸发酵中起到主要作用的微生物是醋酸菌，故菌种b
46、是醋酸菌，醋酸菌最适生长的温度为3035；醋酸菌在缺少糖源时，先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。(3)由于醋酸菌为好氧细菌，效皮能疏松醋酪、积存和流通空气，拌数皮有利于醋酸菌的繁殖和代谢；将淋出的生醋经过沉淀进行高温浓缩，高温能将生醋里的一些微生物杀死，故高温浓缩有杀菌的作用。(4)为纯化和接种醋酸菌，可采用平板划线法，平板划线法的具体操作是，从第二次划线开始，划线应从上次划线末端开始，并且最后一次划线不能与第一次划线相连，故选A：灼烧了接种环会将接种环上的菌烧死，若在划线操作过程中，第一区域划第一条线后灼烧了接种环，则第一区域将出现的现象是第一条线上有菌落，第二、三条线上无菌落；未冷却就开
47、始划线可能使菌种死亡，故第二区域将出现的现象是第二划线区域所划的第一条线上无菌落,第二、三条线上有菌落。21.(1)乳酸杆菌/乳酸链球菌异养厌氧盖好坛盖并向边缘的水槽中注满水，注意经常向水槽中补充水5%20%泡菜成熟时间延长、亚硝酸盐含量偏高（3）萝卜切条上附着有乳酸菌菌种2PH最低说明产生的乳酸最多，另外亚硝酸盐含量最少【分析】参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌为异养厌氧生物，在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。【详解】（1）常见的乳酸菌种类有乳酸链球菌和乳酸杆菌，其代谢类型均为异养厌氧，因此在发酵过程中应注意盖好坛盖并向边缘的水槽中注满水，注意经常向水槽中补充水，以保证在无氧环境下发酵。（2）泡菜发酵中，加入的盐水质量分数为5%20%,浓度过高会导致泡菜成熟时间延长、亚硝酸盐含量偏高，亚硝酸盐可转化
