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1、检验科性能验证程序文件一寸光阴不可轻性能验证1 .目的验证检测试剂在仪器上的性能指标。2 .适用范围适用于检验科检验项目试剂的性能指标验证。3 .职责3.1 科主任：负责审批性能验证计划。3.2 技术负责人：3.2.1 负责制定性能验证方案和计划。3.2.2 负责组织性能验证的实施。3.2.3 负责定期对科室性能验证数据的统计、分析和总结。3.2.4 负责组织对上述活动的可行性和有效性评审。3.3 各专业组技术管理员：3.3.1 负责组织本组人员完成本组性能验证的验证工作。3.3.2 负责对本组性能验证数据的统计、分析和总结工作。3.4 检验人员：3.4.1 负责协助科室技术负责人和本组技术管
2、理员完成本组的性能验证工作。3.4.2 负责完成本组机能验证工作中应承担的检验工作。3.4.3 负责认真填写本组机能验证的检验记录。4 .内容4.1 生化：生化室项目需要验证的参数包括批内精密度、批间精密度、正确度、线性范围、参考区间、可报告区间等。适用时,还要考虑分析灵敏度（仅对那些在接近的低值有临床意义的项目有必要进行确定，必要时,可引用说明书中给出的低值）和干扰试验。4.1.1 精密度：4.1.1.1 标本准备及要求：可采用新鲜或冻存的样本。当样本中待测物不稳定或样本不易得到时,也可考虑使用基质与实际待检样本相似的样本,如质控品。应至少评估2个浓度水平样本的不精密度。当2个浓度水平样本的
3、不精密度有显著差异时,建议增加为3个浓度水平。所选样本的被测物水平应在测量区间内,适宜时,至少有1个样本的被测物水平在医学决定水平左右。注1:通常较高值样本的不精密度较小,较低值样本的不精密度偏大。对低值有临床意义的检测项目,宜评估有判断价值的低水平样本的不精密度。注2:如检测结果没有明确的医学决定水平,可在参考区间上限左右选1个浓度,再根据检验项目的特点在测量区间内选择另一个浓度。注3：如与厂商或文献报导的不精密度比较,所选样本水平宜与被比较的样本水平接近。4.1.1.2 方案：方案1:对验证材料每天分析1批次,2个浓度,每个浓度重复测定4次,连续5天。记录结果并计算均值、标准差和批内、批间
4、变异系数CV(%)。方案2:批内精密度:浓度分别处于一般和病理水平的夹杂新鲜临床标本,按照临床标本相同的检测方法,同批次内检测夹杂的新鲜临床标本20次。记录结果并计算均值(X)、尺度差(SD)和批内变异系数CV(%)o一寸光阴不可轻批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控的前提下），同批次内检测混合的新鲜临床标本20次，同一批号室内质控品某一时间段（至少20天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。4.1.1.3结果判断4.1.2 正确度4.121 标本准备及要求按照如下优
5、先顺序选用具有互换性的标准物质或基质与待测样本相类似的标准物质：1）有证标准物质（CRM）,包括国家标准物质（如GBW）、国际标准物质（如WH0、IFCC）、CNAS认可的标准物质生产者（RMP）提供的有证标准物质、与我国签署互认协议的其他国家计量机构提供的有证标准物质（如NIST、JSCO等；2）标准物质（RM）,如厂商提供的工作标准品；3）尺度物质（RM）,如厂商提供的工作尺度品；4）正确度控成品；5）正确度验证室间质评样本，如CNAS认可的PTP提供的正确度验证样本。宜根据测量区间选用至少2个浓度水平的尺度物质样本。6）卫生部或省临检中心室间质评质控血清含盖的项目，则以卫生部或省临床检验
6、中心室间质评结果为准。卫生部或省临检中心室间质评未涉及的项目，经由过程仪器之间的比对来验证。4.122 方案方案1：根据测量区间选用2个浓度水平的室间质评血清，每个浓度水平每天重复测定2次，连续测定5天，记录检测结果，计算全部检测结果的均值和偏倚。方案2:使用5个水平的室间质评血清，每个水平重复测定3次。记录结果，计算每份质控血清均值与靶值的偏倚。4.123 线性范围4.1.3.1目的：在确定某项目检测上限的同时检测其检测上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。4.1.3.3验证频率：仅在更换试剂盒厂家时进行验证。一旦验证通过，无特殊情况，不重复验证。一寸光阴不可轻4.134
7、方案方案1：不同浓度标本制备：取高值和低值标本各一份，按如下配比：标本1：低浓度样本；标本2：三份低浓度标本与一份高浓样标本混匀；标本3：二份低浓度标本与二份高浓样标本混匀；标本4：一份低浓度标本与三份高浓样标本混匀；标本5：高浓度样本。检测时，按标本123,4,5,5,4,3,2,1,1,2,3,4,5排列，每个标本测量3次，记录浓度以理论浓度为纵坐标(Y),实测浓度为横坐标(X)。由统计学计算出己和回归方程Y=aX+b0方案2：取高值标本和低值标本各一份，将两者按一定的比例稀释成系列不同浓度的标本(如4:0、3:1、2:2、1:3、0:4等)，浓度范围遍布整个预期可报告区间，分别上机按低到
8、高各重复测定3次，计算线性回归方程Y=aX+b及相关系数R2。4.135验证结果判断a在0.951.05范围内，b接近,R0.9759R20.95,则判断为线性范围验证通过。4.1.4参考区间4.1.4.1 标本挑选挑选年龄、性别等均匀分布，吻合建立参考区间的健康体检者血清标本20份，对不同项目的参考区间举行验证。如碱性磷酸酶(A1.P)等在不同年龄人群的不同参考区间应分别举行验证，如某些年龄人群标本不易获得时，可暂不做验证，但需与临床沟通，关于性激素等检测项目因心理周期变革等因素导致无法获取有效人群标本，暂不做验证，但亦需与临床沟通。4.1.4.2 结果判断：规定小于或等于2份标本结果超出参
9、考区间,即为验证通过。或R=测定结果在参考范围内的例数/总测定例数90%即合格。4.1.5最大稀释倍数和可报告范围验证4.151仅对于那些临床可报告区间大于分析测量范围的检测项目才需要进行验证。通常是在线性范围高值的基础上外延至最大稀释度倍数对应的值。4.1.6携带污染验证4.162评价方案：选取一份检测线性范围内的高浓度标本（三）,以及一份低值标本或生化纯水(1.),按照下列次序进行检测：H、H、H、1.、1.、1.,测定值分别为：H1.、H2、H3、1.I、1.2、1.3,计算携带污染率=(1.1.-1.3)/(H3-1.3)*100%o4.163结果判断：携带污染率W2%。4.2免疫-定
10、性(E1.ISA法)操作者熟习检验程序和评判操作程序，对操作程序校准为最佳状态，严格按操作程序举行验证。从以下几方面举行验证：灵敏度、特异性、吻合率、检出限、CUtOff值验证、重复性和比对试验。421符合率、敏感度和特异性一寸光阴不成轻4.2.1.1根据C1.SI发布EP12-A2文件要求(应参考定量分析将偏倚和不精密度应用于定性试验的评价，除阴性和强阳性标本外，选取在临界值附近的浓度用于定性试验不精密度的研究。)来验证本实验室定性实验的符合率、敏感度和特异性，计算了近一年参加卫生部临检中心室间质评的对比结果，将两方结果输入表格中通过公式计算各项性能指标。实验方法(新方法)金尺度阳性(n)阴
11、性(n)合计阳性a(真阳性)b(假阳性)a+b阴性c(假阴性)d(真阴性)c+d合计a+cb+da+b+c+d总吻合率=(a+d)(a+b+c+d)x100%,灵敏度=(a+d)(a+b+c+d),特异性=d(b+d)421.2结果判断按照卫生部临检中心对室间质评结果的要求认为80%及以上即为满意，故选择80%作为评价结果是否可接受的标准。灵敏度95%o特异性295%。4.2.2人员比对4.2.2.1方法拔取至少20份标本(包括阳性、阳性和弱阳性)，先由实验室经验丰富的操作人员举行实验，以其实验结果作为参照，一切从事该项目检测的人员均对同标本举行操作，将各自结果与参照结果举行比对。参考人员结果
12、阳性（n）阴性（n）合计阳性a（真阳性）b（假阳性）a+b检测人员结果阳性c（假阳性）d（真阳性）c+d合计a+cb+da+b+c+d总符合率=（a+d）（a+b+c+d）x100%4.222结果判断以本实验室参加人员检测结果与参考人员检测结果是否达到80%以上（80%以上即可，如能做到更高，可以以更高的标准来判断）来作为判断标准。4.2.3定性实验的检出限将定值样品进行倍比稀释(如稀释到原浓度的2、4、8、16倍)后进行检测。首次出现阴性的前一个稀释倍数为该实验的检出限。4.2.4CUt-Off值验证方法1：在临界值基础上，准备出-20%浓度样本和+20%浓度样本(即定值样品本身)，对以上低
13、、高浓度样本分别测定20次，记录阴性及阳性结果数，即为CUt-Off重复性验证。应至少有19次以上(N95%)阳性反应或者有19次以上(95%)阴性反应为通过。方法2：连续统计上百份已检测样本结果，计算临界值结果所占的比例,小于5%为可接受限。425精密度425.1批内精密度验证4.2.5.1.1验证方法选弱阳性室内质控品在同一批试验内，按规定的操作方法，一天内平行做20个测试相同的样本，计算其x、S与CV。4.251.2结果判断一寸光阴不可轻定性实验(E1.ISA)的批内变异CV%应010%(请确认)。或用卫生部临检中心的允许总误差、说明书、C1.1.v88等做判定尺度。4.252批间精密度
14、验证4.2.5.2.1方法选择弱阳性室内质控品，每天按照常规标本的方法一样测定，连续测定20天，计算其x、S与CV。42522结果判断定性实验（E1.ISA）的批间变异CV%应515%（请确认）。或用卫生部临检中心的允许总误差、说明书、C1.1.A用8等做判定尺度。4.2.6比对试验分别收集化学发光法检测出的HBeAg20例阳性及20例阴性样本，用酶联免疫方法进行比对检测，根据阴阳性结果评价检测结果的符合率。结果判断：用阴阳性判断两种方法检测结果的吻合率。4.3 免疫.定量根据试剂盒说明书或行业内（如C1.1.A，88）要求制定拟验证的性能参数。免疫的定量项目性能验证参考生化的性能验证。4.4
15、 临检（血常规）相关性能参数包括：精密度（批内、批间精密度）、正确度、携带污染率、线性范围、可报告区间、参考区间的验证、不同方法和仪器间的比对、仪器分类结果与手工分类结果的比对、实验室内结果的可比性等，必要时，还要考虑干扰。4.4.1 精密度4.4.1.1.样本检测（可参考）参照美国临床实验室标准化委员会（NCC1.S）EP15A“用户对精密度和准确度性能的核实：批准指南”中关于精密度的内容要求，用两个浓度水平的质控品，每天上机测量4次（连续测定，中间不间断），连续测量5天。4.4.1.2数据分析方法（可参考）按照EP15-A文件之规定，通过EXCe1.软件，计算出批内标准差Switin和批间
16、标准差Stota1.具体的计算公式为：其中：D：表示总共检测天数(D=5);n：单个样本每天重复检测的次数(n=4)；xdi：每个样本每天四次单独检测的结果；xd：每个样本每天四次检测结果的算数均数；xt：单个样本每天检测结果的算数均数的算数均数。441.3结果判断(可参考)4.4.1.3.1于批内精密度的判断，具体的计算和判断过程:1)按照下述公式计算出批内精密度的自由度VoD：表示总共检测天数(D=5);n：单个样本每天重复检测的次数(n=4);因此，按照我们的验证方案，批内精密度(SWithin)的自由度为15o2)按照下述公式计算出C值百分点。一寸光阴不成轻4.1.3.2关于批间精密度
17、的判断，具体的计算和判断过程：1)按照下述公式计算出室内精密度的自由度T：其中，B的计算公式为：其中:D：表示总共检测天数(D=5);n：单个样本每天重复检测的次数(n=4)；xdi：每个样本每天四次单独检测的结果；xd：每个样本每天四次检测结果的算数均数；xt：单个样本每天检测结果的算数均数的算数均数。2)按照下述公式计算出C值百分点。3)计算出verificationva1.ueo4.4.2 正确度4.421实验方案:根据卫生临检中心室间质评结果对血细胞分析项目进行正确度评估，成绩在80%以上者即为验证通过。而没有参加室间质评的仪器，至少使用10份检测结果在参考区间内的新鲜血样本，每份样本
18、检测两次，计算20次以上检测结果的均值，以参加室间质量评价成绩优良的仪器检测结果为标准，计算偏倚。4.422结果符合相关标准。4.4.3 线性范围4.431实验方案选取一份接近预期上限的高值全血样本（三）,分别按100%、80%、60%、40%、20%、10%、0%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定3次，计算均值。以理论浓度为纵坐标，实测浓度为横坐标。由统计学计算出R2和回归方程式Y=aX+b4.432要求:a值在1.0.05范围内，相关系数仑0.975。4.4.4 .2结果吻合相关尺度。4.4.3 线性范围4.4.3.1 实验方案一寸光阴不可轻选取一份接近预期上限的高值全血样本（三）,分别按
19、100%、80%、60%、40%、20%、10%、0%的比例进行稀释，每个稀释度重复测定3次，计算均值。以理论浓度为纵坐标，实测浓度为横坐标。由统计学计算出R2和回归方程式Y=aX+b.4.432要求:a值在1.0.05范围内,相关系数仑0.975。4.4.4 参考区间挑选身体健康体检者20例，男女各半，无任何体系重大疾病史，目前无主观不适。抽取上述人群的空腹静脉血液，按照尺度操作程序举行相关项目的检测。4.442结果分析判断规定小于或等于2份标本结果超出生物学参考区间，即为验证经由过程。或R=测定结果在参考范围内的例数/总测定例数N90%即及格。4.4.4.3生物学参考区间评审每年一次。如更
20、改检验程序（如在检测方法、仪器、试剂等出现变更）或检验前程序，也应对生物学参考区间进行评审。再者，如在检验程序的执行过程中出现生物学参考区间不适用于实验室所服务的被检测人群的情况，也应对生物学参考区间进行评审。4.4.5 可报告区间结合临床要求，其线性范围可以满足临床的需求，因此可报告区间即为线性范围。大于或小于上述范围时，可用手工法或涂片染色镜检验证，以镜检结果报告或以大于或小于线性值报告。4.4.6.1实验方案取高浓度血液样本，夹杂均匀后连续测定三次，测定值分别为HKH2、H3；再取低浓度血液样本，连续测定3次，测定值分别为1.I、1.2、1.3o按下列公式计算携带污染率。446.2要求结
21、果与厂家性能要求或其它性能标准比较以判断是否可接受。4.4.7 仪器分类与手工分类比对4.4.7.1 实验方案：取20位仪器分类未见明显异常报警之患者样本，每位患者分别用于参考方法和仪器法检测，其中参考方法为人工染色显微镜分析，每份标本推两张血涂片（A片和B片），由两位资深检验人员对每张血涂片分析200个细胞。其中一名使用血涂片A,另一名使用B片，每份样本的人工分类结果取均匀值。4.472判定方法：将仪器法测量结果与人工分析的结果比较，计算两种方法的偏倚，偏倚=I仪器测定值-显微镜计数值I/显微镜计数值*100%,其差值在生物学变异允许范围内即可。4.4.8 不同吸样模式的结果可比性4.4.8
22、.1 实验方案验证方法：每次校准后，取5份临床样本分别使用不同模式进行检测，每份样本各检测2次，分别计算两种模式下检测结果均值间的相对差异。自动均值一手动均值相对偏差=X1.O0%主动均值448.2要求：结果与厂家性能要求或其它性能标准比较以判断是否可接受。4.4.9实验室内结果的可比性4.4.9.1.1新仪器使用前，配套检测体系至少使用20份临床标本（浓度分布吻合相关尺度），每份样本分别使用临床实验室内部规范操作检测体系和被比对仪器举行检测，以内部规范一寸光阴不可轻操作检测系统的测定结果为标准，计算相对偏差，每个检测项目的相对偏差符合标准的比例应80%4.491.2新仪器使用前，非配套检测系
23、统按EP9-A文件与配套检测系统进行比对，至少使用40份临床样本（浓度选择符合相关标准），计算相对偏差，每个检测项目的相对偏差符合标准的比例应80%o449.1.3常规检测仪器使用过程中，至少使用20份临床样本（浓度选择符合相关标准）定期进行一次结果比对，每个检测项目的相对偏差符合标准的比例应280%。4.4.9.2以下情况，可按WS/T407的方法和要求进行比对:如室内质控结果有漂移趋势时、室间质评结果不合格，采取纠正措施后、更换重要部件或重大维修后、软件程序变更后、临床医生对结果的可比性有疑问时、患者投诉对结果可比性有疑问（需要确认时）、需要提高周期性比对频率时。449.3结果判定：结果符
24、合相关标准。4.5临检（凝血）精密度（批内、批间精密度）、正确度、携带污染率、线性范围（可能只适用几个项目，如纤维蛋白原等）、可报告区间、参考区间，必要时，还要考虑干扰和实验室内结果的比对等。451精密度、正确度、可报告区间、参考区间可参考血常规的做法。452线性范围（可参考）4.5.2.1实验方案拔取一份接近预期上限的高值(FIB)全血样本（三）,分别按100%、80%、60%、40%、20%的比例举行稀释，每个稀释度重复测定3次，计算均值。将实测值与理论值作比较(偏离应小于10%),计算y=ax+b,验证线性范围。4.522要求：a值在1.0.05范围内，相关系数r0.975,则判断为线性
25、范围验证通过。4.5.3携带污染率453.1实验方案(可参考)高值样本对低值样本的污染：将低值样本架1和3的位置，高值样本置于2位置，每个样本分别测定3次，记录结果：N1.、N2、N3、A1.、A2、A3、N4、N5、N6。计算:低值样本对高值样本的污染：将高值样本置样本架1和3位置,低值样本置于2位置，每个样本分别测定3次，记录结果：A1.、A2、A3、N1.、N2、N3、A4、A5、A6。计算：4.5.3.2要求：CV吻合厂家提供的尺度或相关的机能尺度。454干扰试验（可参考）454.1实验方案：使用溶血样本、黄疸样本及脂血样本，按一定比例加入一般夹杂血浆，以原空白夹杂血浆作为空白对照，分
26、别测定PT、APTTFIB,每个样本重复检测两次取均值，计算偏离值，应10%。454.2要求：结果符合厂家标准或相关性能标准。4.5.5实验室内结果的比对4.5.5.1.1新仪器使用前，配套检测系统至少使用20份临床标本（包含正常和异常结果标一寸光阴不可轻本），每份样本分别使用临床实验室内部规范操作检测系统和被比对仪器进行检测，以内部规范操作检测系统的测定结果为标准,计算相对偏差，每个检测项目的相对偏差符合标准的比例应280%。4.551.2新仪器使用前，非配套检测系统按EP9-A文件与配套检测系统进行比对，至少使用40份临床样本（包含正常和异常结果标本），计算相对偏差，每个检测项目的相对偏差
27、符合标准的比例应80%4.551.3常规检测仪器使用过程中，至少使用20份临床样本（包含一般和异常结果标本）按期举行一次结果比对，每个检测项目的相对偏差吻合尺度的比例应280%。455.1.4以下情况，需要进行比对:如室内质控结果有漂移趋势时、室间质评结果不合格，采取纠正措施后、更换重要部件或重大维修后、软件程序变更后、临床医生对结果的可比性有疑问时、患者投诉对结果可比性有疑问（需要确认时）、需要提高周期性比对频率时。4.6体液尿液分析仪及试带主要对机能（正确度、精密度、参考区间等）举行评判，需要时，还要考虑不同方法的比较，如与镜检的比较。尿干化学的判定尺度和室内质控的判定尺度类似。PH和比重
28、的项目，可参考说明书中提到要求。461精密度461.1批内精密度按常规方法连续检测20次尿液质控品（阴性和阳性），检测结果相差同方向不超过一个级别，但是阴性结果不能检测成阳性，阳性结果不能检测呈阴性。4.6.1.2批间精密度选择室内质控作为衡量批间精密度的依据。每天室内质控品按照常规标本的方法一样测定，连续收集同一批号室内质控品某一时间段（至少20天）的室内质控数据。检测结果相差同方向不超过一个级别，但是阴性结果不能检测成阳性，阳性结果不能检测呈阴性。4.6.2正确度根据卫生部临检中心的室间质评成绩，成绩在80%以上判定为经由过程。4.6.3参考区间4.6.3.1 入选参考区间健康人群的尺度要
29、求近1个月无服药史及发热，无泌尿体系疾病、高血压、糖尿病、肝炎、风湿等全身性疾病，无泌尿体系疾病的家族史、泌尿道外科手术史及泌尿道结石史，无浮肿的现象，女性在非月经期内。4.6.3.2 判断尺度：计算95%分位数的结果。R二测定结果在参考区间范围内的例数/总测定例数N95%即及格。4.7PCRHBV-DNA定量项目（可采用对数参与计算）需要验证的参数包括：精密度（批内、批间）、正确度、线性范围、可报告区间、参考范围。定性检测项目验证内容至少应包括检出限及符合率等。1.1 .1精密度4.7 .1.1批内精密度4.7. 1.1.2实验方法：质控结果在控时，将高低值两个样本在同一批次内分别测定20次
30、，同时进行质控品的测定，并计算均值、标准差和批内精密度（）。47.1.1.3结果判断本项目的批内精密度实验CV5%（请确认），则认为验证通过。4.7.1 批间精密度一寸光阴不可轻4.7.122 实验方法：取高、低值两个样本，与病人标本一同举行测定20次，同时举行质控品的测定并计算均值、尺度差和批内精密度（）。4.7.123 结果判断本项目的批间精密度实验CV8%（请确认），则认为吻合要求，可以举行常规检测。472正确度根据卫生临检中心室间质评成绩（可以是近来几年的成绩）对HBV-DNA定量测定举行正确度验证，成绩在80%者即为验证经由过程。4.7.3线性范围实验方法：方法1：将病人血清用灭菌蒸
31、储水稀释为5个浓度后，分别将每个稀释度检测2次，计算线性回归系数R2。稀释方案：样本1.20I血清与1801.蒸储水混匀。样本2:20出样本1与1801.蒸储水混匀。样本3:20出样本2与1801.蒸储水混匀；样本4201.样本3与1801.蒸储水混匀。样本5201.样本4与1801.蒸储水混匀。方法2：搜集接近线性范围高限病人血清夹杂，用已检测无扩增的阳性血清稀释5个浓度（如10、100、100O），分别将每个稀释度检测2、次,取其对数值计算线性回归方程y=ax+b及相干系数R2。1.1.1 结果判断计算所得线性回归系数R2N95%之间，认为线性范围验证经由过程。4.7.4 可报告区间结合临
32、床要求，该项目线性范围可以满足临床需要，因此线性范围即为可报告区间（请确认）。4.7.5 参考区间4.7.5.1 实验方法：样本选入原则为健康体检者中无HBV感染、肝功能、B超等正常者20人，其中男女各10人，取血清进行HBV-DNA测定，同时进行质控品的测定。4.752结果判断规定小于或等于1份标本结果超出参考区间，即为验证经由过程。4.8 微生物-人员比对拔取20份标本（包括革兰阳性、革兰阳性），先由实验室经验丰富的操作人员举行试验，以其实验结果作为参照，再由从事该项目检测的人员对标本举行操作，将各自结果与参照结果举行比对，计算吻合率。4.9 微生物-细菌鉴定4.9.1 吻合率以公认的标准
33、菌株按日常操作上机鉴定，比较鉴定的百分率及生化反应的符合率。试验结果和预期结果完全符合；要求鉴定菌种正确，生化反应不符合项数不超过一项。492重复性采用公认的标准菌株及卫生部质评菌株，对同一株细菌在不同工作日进行上机鉴定，比较两次鉴定结果的鉴定百分率及生化反应的符合率。要求两次鉴定完全相同；差异生化反应项数不多于一项。4.10 微生物-药敏试验（K-B法）可采用室内质控的数据。4.10.1 吻合率以公认的尺度菌株按日常操作方法操作，比较药敏纸片的抑菌圈直径大小的差别性。一寸光阴不可轻4.10.2 重复性采用公认的标准菌株，对同一株细菌在不同工作日进行药敏试验，比较两次鉴定结果的鉴定百分率及生化
34、反应的符合率。4.11 微生物-血培养（仪器法）4.11.1 假阳性率对血培养系统阴性瓶盲转血平板，任何细菌生长均视为假阴性,统计分析假阴性结果占总送检血培养数的百分比。全自动血培养分析系统性能验证分析方法：季度回顾分析全自动血培养分析系统的假阴性率和假阳性率。4.11.2假阳性率对血培养系统阳性瓶镜检未见细菌，转转血平板和巧克力平板培养一周后无任何细菌生长均视为假阳性任何细菌生长均视为假阴性，统计分析假阳性结果占总送检血培养数的百分比。全自动血培养分析系统性能验证分析方法：季度回顾分析全自动血培养分析系统的假阴性率和假阳性率。4.11.3报阳时间用一个或多个微生物调制菌悬液浓度为101CFU
35、m1.,接种于各种血培养瓶中模拟常规操作上机测定，观察血培养瓶报阳时间是否适当（72h）。将不同微生物接种在不同的培养瓶内，要求所有被测微生物在参考时间内呈阳性。同时进行验证试验：转钟相应的平板培养基，有相应的微生物生长说明质量有效；无相应微生物生长必须重复试验，检查操作是否有误、培养瓶是否在有效期内；如果重复试验仍未通过，立即停用培养瓶并寻找原因。做好记录，通知供应商或或退回培养瓶。4.12应用说明中的提到的机能验证（节选）4.121分子诊断领域4.12.1.1 定量检测方法和程序的分析机能验证内容至少应包括正确度、精密度、可报告区间等。定性检测项目验证内容至少应包括检出限及吻合率等。验证结
36、果应经过授权人审核。4.12.1.2 通过与其他实验室（如已获认可的实验室、使用相同检测方法的实验室、使用配套系统的实验室）比对的方式确定检验结果的可接受性时，应满足如下要求：（八）规定比对实验室的选择原则;(b)样品数量：至少5份，包括一般和异常水平；(c)频率：至少每年2次；(d)判定标准：应有280%的结果满足要求。4.12.1.3 实验室应对新批号或同一批号不同货运号的试剂和关键耗材进行验收，验收试验至少应包括：（八）外观检查：肉眼可看出的，如包装完整性、有效期等；(b)机能验证：经由过程实验才干判断的，如试剂的核酸提取效力和核酸扩增效力、试剂的批间差别、关键耗材的抑制物等：试剂机能验
37、证记录应能反映该批试剂的核酸提取效力和核酸扩增效力。一般情况下，临床实验室采用新批号试剂或关键耗材检测5份过去用旧试剂或关键耗材检测过的患者样品举行验证，吻合附录A.6要求即可视为满足要求。但当实验室怀疑提取试剂有质量问题时，可采用凝胶电泳试验比较核酸提取物与核酸尺度物确认核酸片段提取的完整性、260nm紫外波长测定确认核酸提取的产率、260nm280nm比值确认核酸提取的纯度。核酸扩增效力可经由过程计算尺度曲线的斜率（SIOPe）获得，实验室可参照供应商提供的斜率范围来评判该批试剂的吻合性。用于定性检验的试剂，选择阴性和弱阳性的样品进行试剂批号验证。一寸光阴不可轻用于定量检验的试剂，应举行新
38、旧试剂批间的差别验证，方法和要求参照附录A.6要求。耗材的抑制物验收：对关键耗材应检测是否存在核酸扩增的抑制物，方法和要求参照附录A.6要求。4.12.1.4 实验室使用两套及以上检测体系检测同一项目时，应有比对数据表明其检测结果的一致性，比对频次每年至少2次，每次不少于20份样品，浓度水平覆盖测量范围；比对结果的体系偏倚应吻合附录A.4的要求。使用不同参考区间的检测体系间不宜举行比对。比对记录应由实验室负责人审核并签字，并应保留至少2年。份子诊断项目分析机能尺度A.1应不低于国家标准、行业标准、地方法规要求。A.3设备妨碍修复后，分析体系比对5份样品，覆盖测量区间,至少4份样品测量结果偏倚V
39、7.5%oA.4实验室内分析系统定期比对：样品数位20,浓度应覆盖测量区间，计算回归方程，系统误差应7.5%。A.5留样再测判断标准：按照项目稳定性要求选取最长期限样品，5个样品，覆盖测量区间，至少4个样品测量结果偏倚7.5%。A.6试剂批间差别、耗材的抑制物的验收及格判断尺度：拔取5个旧批号检测过的样品，覆盖测量区间（包括阳性、临界值、低值、中值和高值），至少4个样品测量结果偏倚75%,其中阳性和临界值样品必须吻合预期。A.7没有标准和室间质评要求时，实验室间结果比对合格标准可依据制造商声明的性能标准而制定。4.12.2临床化学领域使用配套分析系统时，可使用制造商的溯源性文件，并制定适宜的正
40、确度验证计划；使用非配套分析系统时，实验室应采用有证参考物质、正确度控制品等进行正确度验证或与经确认的参考方法（参考实验室）进行结果比对以证明实验室检验结果的正确度。如以上方式无法实现，可通过以下方式提供实验室检测结果可度的证明：参加适宜的能力验证/室间质评，且在最近一个完整的周期内成绩合格；与使用相同检测方法的已获认可的实验室、或与使用配套分析系统的实验室进行比对，结果满意。设备妨碍修复后，应首先分析妨碍原因，假如设备妨碍影响了分析机能，应经由过程以下吻合的体式格局举行相关的检测、验证:（八）可校准的项目实施校准或校准验证；(b)质控物检测结果在允许范围内；(c)与其他仪器的检测结果比较，偏
41、差符合附录A.3的要求;(d)使用留样再测结果进行判断，偏差符合附录A.5的要求。4.1221检验程序验证检验方法和程序的分析性能验证内容至少应包括正确度、精密度和可报告区间。4.1222检验程序的确认如果使用内部程序，如自建检测系统，应有程序评估并确认正确度、精密度、可报告区间、参考区间等分析性能符合预期用途。4.12.2.3生物学参考区间或临床决定值一寸光阴不可轻间，样品数量应不少于120例，若分组，每组的样品数量应不少于120例。验证参考区间时，每组的样品数量应不少于20例。4.1224替代方案对没有开展能力验证/室间质评的检验项目，应通过与其他实验室(如已获认可的实验室、使用相同检测方
42、法的实验室、使用配套系统的实验室)比对的方式，判断检验结果的可接受性，并应满足如下要求：（八）规定比对实验室的选择原则；(b)样品数量：至少5份，包括一般和异常水平；(c)频率：至少每年2次；(d)判定尺度：应有280%的结果吻合要求。4.12.2.5检验结果可比性实验室用两套及以上检测体系检测同一项目时，应有比对数据表明其检测结果的一致性，实验方案可参考中华人民共和国卫生行业尺度WS/T407-2012医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南，或比对频次每年至少1次，样品数量不少于20,浓度水平应覆盖测量范围；比对结果的体系偏倚应吻合附录A.1或A.4的要求。比对结果不一致时，应分析原因，并采
43、取必要的纠正指施，及评估纠正指施的有效性。使用不同参考区间的检测系统间不宜进行结果比对。比对记录应由实验室负责人审核并签字，并应保留至少2年。临床化学检验分析性能要求A.1适用时，性能指标应不低于国家标准、行业标准、或地方法规的要求，如中华人民共和国卫生行业标准WS/T403-2012A.6没有尺度和室间质评要求时，实验室间结果比对及格尺度可依据制造商声明的机能尺度而制订。4.12.3 免疫领域设备故障修复后，应首先分析故障原因，如果设备故障影响了方法学性能，可通过以下合适的方式进行相关的检测、验证：（八）可校准的项目实施校准或校准验证；(b)质控物检测结果在允许范围内；(c)与其他仪器的检测
44、结果比较；(d)使用留样再测结果进行判断。检验方法和程序的分析性能验证内容应参考试剂盒说明书上明确标示的性能参数进行验证，至少应包括：检出限，精密度(包括重复性和中间精密度)、符合率(采用国家标准血清盘或临床诊断明确的阴阳性样品各20份或与其他分析方法比对)；并应明确检验项目的预期用途，如筛查、诊断、确认。注：CUt-Off值可以挑选以下方法之一验证：一寸光阴不可轻4.12.3.1 替代方案对没有开展能力验证/室间质评的检验项目，实验室应通过与其他至少2个以上实验室(如己获认可的实验室或其它使用相同检测方法的配套系统的同级别或高级别医院的实验室)比对的方式判断检验结果的可接受性，并应满足如下要
45、求：(e)规定比对实验室的选择原则；(f)样品数量：至少5份，包括阴性和阳性；(g)频率：至少每年2次;（三）判定尺度：应有280%的结果吻合要求。(i)结果不一致时，应分析不一致的原因，需要时，采取有效的纠正步伐，并按期评判实验室间比对对其质量的改进感化，保存相应的记录。4.1232检验结果可比性如果采用手工操作或同一项目使用两套及以上检测系统时，应至少每年1次进行实验室内部比对，包括人员和不同方法/检测系统间的比对，至少选择10份阴性标本(需有其它标志物阳性的4份以上)、10份阳性标本(至少含弱阳性5份、强阳性1份)进行比对，评价比对结果的可接受性。比对记录应由实验室负责人审核并签字，并应
46、保留至少2年。4.12.4 输血领域设备妨碍修复后，应首先分析妨碍原因，假如设备妨碍影响了方法学机能，可经由过程以下吻合的体式格局举行相关的检测、验证：（八）可校准的项目实施校准或校准验证；(b)质控物检测结果在允许范围内；(c)与其他仪器的检测结果比较；(d)使用留样再测结果进行判断。4.12.4.1 输血相容性检测应对吻合性举行验证。实验室应对检验程序的更改(包括试剂更换、操作程序更改)进行规定并验证。实验室使用非配套或自制试剂时，应进行性能验证并记录。4.12.4.2 通过与其他实验室(如已获认可的实验室、使用相同检测方法的实验室、使用配套系统的实验室)比对的方式确定检验结果的可接受性时
47、，应满足如下要求：（八）样品数量：至少5份，包括正常和异常水平；(b)频率：至少每年2次；(c)判定标准：应有280%的结果符合要求。当实验室间比对不成行或不适用时，实验室应制订评判检验结果与临床诊断一致性的方法，判断检验结果的可接受性。每年评判不少于2次，并记录。1243应至少每年1次进行实验室内部比对，包括人员和不同方法/检测系统间的比对，至少选择2份阴性、2份弱阳性、1份阳性样品进行比对，评价比对结果的可接受性。比对记录应由实验室负责人审核并签字，并应保留至少2年。4.12.5 体液领域设备故障修复后，应首先分析故障原因，如果设备故障影响了方法学性能，可通过以下合适的方式进行相关的检测、验证：（八）可校准的项目实施校准或校准验证；(b)质控物检测结果在允许范围内；一寸光阴不成轻(c)与其他仪器的检测结果进行比较；(d)使用留样再测结果进行判
