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1、附录A（资料性）常用实验动物的保定方法常用实验动物的保定方法如表A.1所示。表A.1常用实验动物的保定方法实验动物种类一般保定方法特殊保定方法注意事项小鼠用右手拇指和食指的指腹捏住小鼠尾部中央，将小鼠提起来，放在笼盖上或其他粗糙面上。右手轻轻牵拉小鼠尾部，促使小鼠前肢抓握粗糙面，左手拇指和食指轻柔地捏住小鼠颈背部到背中央的皮肤，提起小鼠，翻转抓住颈背部的左手，右手拉住小鼠尾部再用左手的小指压住尾根部位使小鼠身体成一直线，即完成小鼠的抓取和固定。尾鄢脉注射时，将小鼠固定于固定器内，将鼠尾留在外面进行操作：如果要进行解剖、手术、心脏采血等时，将小鼠固定在固定板进行保定。L操作人员将动物笼具从笼架上
2、取下时避免突然晃动，小心打开笼盖，避免过多干扰小鼠。2 .应抓取尾巴中部，不能仅捏住小鼠尾巴的尾端，避免弄破尾端。3 .确保对颈部周围皮肤施加足够的压力，以防止小鼠转动或挣脱保定，但不要将皮肤拉得太紧，以免动物无法呼吸。大鼠操作人员佩戴防护手套，右手轻轻抓住大鼠尾巴的中部并提起，迅速放在笼盖上或其他粗糙面上，左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行，以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余3指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定o此法适用于灌胃、腹腔注射、肌肉或皮下注射时。尾静脉采血或注射时，将大鼠固定于固定器内，将鼠尾留在外面进行操作；解剖或进行外科手术时，将大鼠固定在固定
3、板上或特制的固定架进行保定。1 .操作人员将动物笼具从笼架上取卜避免突然晃动，小心打开笼盖，避免过多干扰，使动物有足够时间意识到人的存在，不至于感到惊慌恐惧。2 .抓取动物时，操作人员应果断用食指和拇指抓取动物肩部，不应犹豫，不应反复抓取，减少动物在空中停留的时间，尽快将动物移至操作台或进行固定。豚鼠抓取幼小的豚鼠时，可用两手捧起来；抓取较大的豚鼠时.，需用两手轻轻扣，按住豚鼠背部，将其托起。豚鼠解剖、心脏采血或进行外科手术时，保定方法与大鼠、小鼠类似。抓取豚鼠不可过分用力抓捏豚鼠的腰腹部，以防造成肝破裂、脾淤血而引起死亡。兔轻轻打开兔笼门，当兔呈安静状态时，一只手伸入笼内，把两耳拿在手心并抓
4、住颈后部皮肤，将兔提起，然后用另一只手托住其臀部。采血、注射、外科手术等时，采用盒式保定架或台式保定架进行保定。绑缚兔四肢时，应将粗棉带打成活结，不能系死结，以免在紧急情况下迅速松绑困难，造成动物四肢骨折或其它部位的损伤。必须将两耳与颈部皮肤同时抓取，不能仅抓两耳，否则，由于兔体重悬空后，紧嵬两耳支撑重量，容易滑脱且可导致耳部受伤。犬操作人员以温和与轻柔的动作只手固定犬头部，另只手抚摸安抚犬以减轻犬的痛苦。进行疼痛等级较高的实验操作时可使用犬头部固定器以防止咬伤，或麻醉后进行实验操作。口面“笼嘴”保定法，在犬安静状态下，迅速将“笼嘴”套于口腔及面部，向后上方套紧，将牵拉开的“烟包”紧缩胶管调整
5、到松紧适宜，再将栓系胶管左右交叉后分别牵引至耳后和颈下适当打结固定即可。1 .要针对不同大小、品系的犬使用不同规格型号的笼嘴，避免因笼嘴大小不适宜引起的动物机械性损伤。2 .保定材料应松软适宜，口径大小可调。猪操作人员抓住猪的两耳，迅速提起，使前肢腾空，同时用膝部夹住猪的胸或腰腹部，使猪的腹部朝前，此法适用于灌药或肌肉注射，多用于小猪保定。侧卧保定适用于生猪的注射、去势等。保定需2人配合，一人抓住一条后肢，另一人抓住耳朵，使猪侧卧倒下，固定头部，根据需要，可以用绳捆绑，固定四肢。仰卧保定适用于前腔静脉采血、灌药等。保定时，将猪放倒，使猪保持仰卧姿势，用绳捆绑，固定四肢。1在动物抓取时应注意抓取
6、的力度,避免引起动物过度惊恐。2.保定时绳扣应松紧适中，避免创伤性出血等情况的发生。表AJ常用实验动物的保定方法（续）实验动物种类一般保定方法特殊保定方法注意事项非人灵长类动物对于松鼠猴或小短尾猴等体重较大的非人灵长类动物，一只手将其前肢背在后面，另一只手抓住后肢和尾；对于皴猴等小型非人灵长类动物，可用一只手的拇指和中指握住其胸部，另一只手拖住其后肢进行保定。也可采用猴固定椅或两用猴手术固定床进行保定。化学保定：借助麻醉剂对非人次长类动物进行保定，根据不同药物的特点，可以选择【I服、注射或吸入给药方式。L可以通过奖赏的形式训练非人灵长类动物接受物理或化学保定。2 .操作人员在抓取动物时应戴手套
7、，防止被咬伤，也要注意观察动物的状态，注意抓取的力度，避免引起动物过度惊恐。3 .化学保定，应注意麻醉剂的用量，把握好麻醉的深度。牛徒手保定：保定时，先用一只手抓住牛角，然后拉提鼻绳、鼻环，或用一只手的拇指与食指和中指捏住牛的鼻中隔加以固定。牛鼻钳保定：用鼻钳的2个钳嘴钳住2个鼻孔，并迅速夹紧鼻中隔，用一只手或用双手握持钳柄，加以固定，也可以用绳系紧钳柄进行固定。适用于一般检查、灌药、肌肉及静脉注射。柱栏内保定有单栏、二柱栏、四柱栏、六柱栏等多种方法，也可以因地制宜，利用自然树桩进行简易保定。适用于临床检查、各种注射及颈、腹、蹄等部位的疾病治疗。倒卧保定有背腰缠绕倒牛保定和拉提前肢倒牛保定2种
8、方法。主要适用于去势及外科手术。L应采用粗细适宜且结实的绳索进行，并且所有绳结应为活结，以便在危急时刻可迅速解开。2 .根据动物大小选择适宜的保定场地，要求地面平整，没有碎石、瓦砾等，以防动物受伤。3 .倒卧保定时注意掌握牵引的力度和绳扣的紧度，避免因力度过大或紧度过高造成牛身体损伤。f站立保定：两手握住羊的双角，骑跨羊身，以大腿内侧夹持羊两侧胸壁。适用于临床检查或治疗。倒卧保定：操作人员俯身从对侧一手抓住两前肢系部或抓一前肢臂部，另一手抓住腹肋部膝裳处，将羊扳倒，然后改抓两后肢系部，前后一起按住。适用于治疗和简单手术。L动作应轻柔，避免采用粗暴的方式，造成动物痛苦。2.适当限制参与保定的人数
9、，切忌一哄而上，以防惊吓动物。附录B（资料性）常用实验动物的麻醉方法表B.1表B.9推荐了常用实验动物的麻醉方法和剂量表B.1小鼠推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径异械烷1%4%吸入戊巴比妥40mgkg50mg/kg腹腔注射（氯胺酮）+（甲苯噬嗪）(80mg/kg100mg/kg)+(5mg/kg10mg/kg)腹腔注射丙泊酚12mg/kg26mg/kg静脉注射三溟乙醇125mg/kg*300mg/kg腹腔注射表B.2大鼠推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径异械烷1%4%吸入戊巴比妥30mg/kg60mg/kg腹腔注射（氯胺酮）+（甲苯嚏嗪）(40mg/kg80mg/kg)+(5mg/kg10mg/kg
10、)腹腔注射丙泊酚7.5mgkg10mg/kg静脉注射表B.3豚鼠推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径异氟烷1%4%吸入戊巴比妥15mgkg40mg/kg腹腔注射（氯胺酮）+（甲苯嚏嗪）(40mg/kg)+(5mg/kg)腹腔注射表B.4兔推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径异氟烷1%4%吸入氯胺酮20mg/kg60mg/kg肌肉注射（氯胺酮）+（甲苯噪嗪）(10mg/kg)+(3mg/kg)静脉注射（氯胺酮）+（地西泮）(60mg/kg80mg/kg)+(5mgkg10mg/kg)肌肉注射表B.5犬推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径异械烷1%4%吸入丙泊酚5mg/kg7.5mg/kg静脉注射戊巴比妥20mg/
11、kg30mg/kg静脓注射氯胺酮5mg/kg肌肉注射表B.6猪推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径异氟烷1%4%吸入丙泊酚0.83mgkgL66mg/kg静脉注射戊巴比妥20mg/kg40mg/kg静脉注射（氯胺酮）+（甲苯哩嗪）(20mg/kg)+(2mg/kg)肌肉注射替来它明+理拉西泮4mgkg6mg/kg肌肉注射表B.7非人灵长类动物推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径异氟烷0.5北3%吸入丙泊酚2mg/kg6mg/kg静脉注射戊巴比妥25mg/kg30mg/kg静脓注射（氯胺酮）+（甲苯曝嗪）(7mg/kg10mg/kg)+(0.15mgkgO.5mg/kg)肌肉注射（氯胺酯）+（地西泮）(5m
12、g/kg*-10mg/kg)+(0.3mg/kg*1mg/kg)肌肉注射替来它明十理拉西泮2mgkg5mg/kg肌肉注射表B.8牛推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径氯胺酮2mg/kg静脉注射戊巴比妥15mg/kg20mg/kg静脓注射表B.9羊推荐麻醉方法及剂量药品剂量途径氯胺的2mg/kg静脉注射戊巴比妥30mg/kg静脓注射附录C（资料性）常用实验动物的镇静方法表C.1表C.9推荐了常用实验动物的镇静方法和剂量表CJ小鼠推荐镇静方法及剂量药品剂量途径地西泮2.5mg/kg5mg/kg腹腔注射乙酰丙嗪2mg/kg5mg/kg皮下注射赛拉嗪5mg/kg10mg/kg腹腔注射美托咪嚏O.1mg/kg
13、0.3mg/kg皮下注射表C.2大鼠推荐镇静方法及剂量药品剂量途径地西泮2.5mg/kg腹腔注射乙酰丙嗪2.5mg/kg皮下注射赛拉嗪1mg/kg5mg/kg腹腔注射美托咪嚏O.1mg/kgO.3mg/kg皮下注射表C.3豚鼠推荐镇静方法及剂量药品剂量途径地西泮5mg/kg腹腔注射乙酰丙嗪2.5mg/kg皮卜.注射赛拉嗪5mg/kg腹腔注射美托味咤O.3mgkg-O.5mg/kg腹腔注射表C.4兔推荐镇静方法及剂量药品剂量途径地西泮1mg/kg2mg/kg静脉注射乙酰丙嗪1mg/kg皮下注射赛拉嗪2mg/kg-5mg/kg肌肉注射美托咪咤O.2mg/kgO.3mg/kg肌肉注射表C.5犬推荐镇
14、静方法及剂量药品剂量途径乙酰丙嗪0.03mg/kg0.06mg/kg肌肉注射赛拉嗪0.5mg/kg1mg/kg肌肉注射美托味咤O.03mg/kgO.05mg/kg肌肉注射表C.6猪推荐镇静方法及剂量药品剂量途径地西泮1mg/kg肌肉注射乙酰丙嗪0.2mg/kg肌肉注射表c7非人灵长类动物推荐镇静方法及剂量药品剂量途径地西泮1mg/kg肌肉注射乙酰丙嗪0.2mg/kg肌肉注射表C.8牛推荐镇静方法及剂量药品剂量途径乙酰丙嗪0.1mg/kg肌肉注射赛拉嗪0.05mg/kg0.2mg/kg肌肉注射美托咪咤5Ug/kg10g/kg静脉注射表C.9羊推荐镇静方法及剂量药品剂量途径地西泮2mg/kg肌肉注
15、射乙酰丙嗪0.1mg/kg肌肉注射赛拉嗪1mg/kg（绵羊）；0.05mg/kg（山羊）肌肉注射附录D（资料性）常用实验动物的镇痛方法表D.1表D.8推荐了常用实验动物的镇痛方法和剂量表DJ小鼠推荐镇痛方法及剂量药品剂量途径持续时间丁丙诺菲0.05mgkg0.1mg/kg皮卜.注射或腹腔注射6h12h卡洛酚5mg/kg皮下注射或腹腔注射24h美洛昔康5mg/kg皮下注射或腹腔注射24h,注：表示持续时间不确定，后表同表D2大鼠推荐镇痛方法及剂量药品剂量途径持续时间丁丙诺菲0.01mg/kg0.05mg/kg皮下注射或腹腔注射8h12h卡洛酚5mg/kg皮下注射或腹腔注射24h美洛昔康1mg/k
16、g2mg/kg皮下注射或腹腔注射24h,表D.3豚鼠推荐镇痛方法及剂量药品剂量途径持续时间丁丙诺菲0.01mg/kg0.05mg/kg皮下注射或腹腔注射6h12h布托菲诺0.2mg/kg2mg/kg皮下注射或腹腔注射4h卡洛酚4mg/kg皮下注射或腹腔注射24h美洛甘康0.1mg/kg0.3mg/kg口服或皮卜注射或腹腔注射24h表D.4兔推荐镇痛方法及剂量药品剂量途径持续时间丁丙诺菲0.02mgkgO.05mg/kg肌肉注射3h布托菲诺0.1mg/kg0.5mg/kg静脉注射2.5h3.5h表D.5犬推荐镇痛方法及剂量药品剂量途径持续时间丁丙诺菲6g/kg10g/kg肌肉注射3h布托菲诺0.
17、1mg/kg0.5mg/kg肌肉注射或皮下注射2.5h3.5h表D.6猪推荐镇痛方法及剂量药品剂量途径持续时间丁丙诺菲0.05mg/kg0.1mg/kg肌肉注射8h12h布托菲诺0.1mg/kg0.3mg/kg肌肉注射4h6h卡洛酚2mg/kg3mg/kg口服12h表D.7非人灵长类动物推荐镇痛方法及剂量药品剂量途径美洛昔康0.1mg/kg0.2mg/kg口服或皮下注射卡洛酚2mg/kg4mg/kg皮下注射或肌肉注射表D.8绵羊推荐镇痛方法及剂量药品剂量途径持续时间丁内诺菲0.005mg/kg0.01mg/kg肌肉注射3h布托菲诺0.5mg/kg皮下注射2.5h3.5h附录E（斐料性）常用实验
18、动物的采血方法及最大采血量血液总量取决于品种、性别、年龄、健康及营养状况。表E.1列出了常用实验动物推荐的采血方法。表E.2中给出了安全性评价研究中常用的不同种属动物的循环血量，以及在毒理学研究中极为常用的破猴和小型猪的数据。所列数值来源不同，但均为成年、健康和处于适当营养水平的动物。表E.3为单次采血及多次采血的体积限度和恢复期。表E.4为基于健康、正常的成年动物，指定体重种属动物的总血容量和推荐的最大采血量。表E.1常用实验动物推荐的采血方法采血方式小鼠大鼠豚鼠兔犬猪非人灵长类绵羊颈静脉采血+前肢静脉采血+后肢静脉采血+股静脉采血+耳静脉采血+尾静脉采血+眼眶静脉丛采血+心脏穿刺采血+割（
19、剪）尾采血+注：+表示推荐的采血方法。表E.2常用实验动物的循环血量种属循环血量（mLkg）推荐的平均值平均值范围小鼠726380大鼠645870兔564470犬857990小型猪6561-68疥猴（恒河猴）564467舜猴（食蟹猴）655575武猴705882,推荐的平均值为平均值范围的中点。表E.3体积限度和恢复期单次采血（如毒性研究）多次采血（如毒代动力学研究）采血量占循环血量的百分比大致恢复期24h内采血量占循环血量的百分比大致恢复期7.5%1周7.5%1周10%2周10%-15%2周15%4周20%3周表E.4指定体重种属动物的总血容量和推荐的最大采血量种属指定体市总血容量(mL)占
20、总血容量7.5%的最大采血量(mL)占总血容量10%的最大采血量(mL)占总血容量15%的最大采血量(mL)占总血容量20%的最大采血量(mL)小鼠25g1.80.10.20.30.4大鼠250g161.21.62.43.2兔4kg22417223445犬10kg8506485127170小型猪15kg9757398146195薄猴(恒河猴)5kg28021284256殊猴(食蟹猴)5kg32524324965狼猴350g2522.53.55附录F（资料性）常用实验动物的一般给药体积F.1各种给药途径的给药体积及可能的最大给药体积的选择对于各种给药途径的最大给药体积，取决实验动物种属和制剂性，
21、见表F.1。表F.1各种给药途径的给药体积及可能的最大给药体积种鼠给药途径与体积（InLkg）b口服皮下注射腹腔注射肌肉注射单次静脉注射缓慢静脉注射小鼠10(50)C10(40)20(80)0.05(0.1)5(25)大鼠10(40)5(10)10(20)0.1(0.2)5(20)兔10(15)1(2)5(20)0.25(0.5)2(10)犬5(15)1(2)1(20)0.25(0.5)2.5(5)小型猪10(15)1(2)1(20)0.25(0.5)2.5(5)狒猴5(15)2(5)d(10)0.25(0.5)2C狼猴10(15)2(5)d(20)0.25(0.5)2.5(10),给非水溶液
22、后，确定再次给药时间时应考虑前次药物是否已被吸收。肌肉内注射每天不能超过2次。皮下注射每天限制在2-3个部位，前述皮下注射部位，不包括弗氏佐剂的使用。每一栏内有两组数字，左边的数字代表的是指导原则中适用于单次或多次给药时的给药体积。右边括号内的数字代表的是可能的最大给药体积。如果超过这个给药体积那么将会导致动物福利与实验的科学性之间产生矛盾。每部位的InL数。1无数据。F.2静脉内给药速度F.2.1静脉推注：用注射器将少量或单一类药品通过静脉给药的方法，一般注射过程在1min左右。适用于供试品或药物与血液之间要能配伍且粘性不能太大。当大体积的注射物质进入体内时，注射液应预热到动物体温水平。对于
23、啮齿类动物，给药速度不能超过3mLminF.2.2静脉缓慢注射：注射过程超过IOnlin15min,应使用蝶状针，或在浅静脉中留置静脉管套（短期），以便长时间内多次给药。注意给药周期，如静脉输注周期较长，可能会引起肺损害。F.2.3连续输注：为了与临床用药一致，有时需连续静脉内输注。在2h内，单次给药的给药体积应小于循环血量的10%。对动物进行有效保定且不使动物烦躁，以及每次输注时总的持续时间，是维持长时间输注的关键因素。表F.2提供了推荐使用的关于非连续输注给药（每天4h）及连续输注给药（24h）的给药体积、给药速度。表F.2重复静脉内输注的给药体积与速度给药体积与速度每天输注时间小鼠大鼠兔
24、.犬小型猪称猴每日给药体积（最大给药总体积）（mLkg）4hh20b20Iib24h96(192)60(96)24(72)24(96)2460给药体积与速度每天输注时问小鼠大鼠兔.犬小型猪麻猴输液速度(最大输注速度)mL(kgh)4hb5b5bb24h4(8)2.5(4)1(3)1(4)12.5注1：兔给药体枳和速度的确定是基于对胚胎毒性的研究所得的数据，给予22ml(kgh)及以上体积，对胎儿无影响，但母体组织内会形成血管周围粒细胞套及增生的心内膜炎。大鼠输注速度是1mL(kgh)-1m!(kgh),但在胚胎毒性研究中不能超过2mL(kgh),小鼠、犬、琳猴和小型猪的给药体积均为重复给药一个月的数据。注2：表中有两个数据，第二个带括号的数据是推荐的最大值。b无数据。*基于致畸试验。
