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1、公共场所卫生检验方法,第3部分：空气微生物,GB/T 18204公共场所卫生检验方法,卫生监测技术规范集中空调通风系统公共用品用具微生物空气微生物化学污染物物理因素,GB/T18204.3-2013空气微生物,规定了公共场所空气中细菌总数、真菌总数、-溶血性链球菌和嗜肺军团菌的现场采样与实验室培养方法。,细菌总数,公共场所空气中采集的样品，计数在营养琼脂培养基上经3537、48h培养所生长发育的嗜中温性需氧和兼性厌氧菌落的总数。,采样方法,撞击法自然沉降法,撞击法,仪器设备：六级筛孔撞击式生物采样器,采样点,布点原则,采样点按均匀布点原则布置1个采样点的设置在中央2个采样点的设置在室内对称点上
2、3个采样点的设置在室内对角线的3个等分点上5个采样点的按梅花布点，其他的按均匀布点原则布置。,采样点距离地面高度1.21.5m，距离墙壁不小于1m采样点应避开通风口、通风道等,采样环境条件,采样时关闭门窗15min30min，记录室内人员数量、温湿度与天气状况等。,采样方法,以无菌操作，使用撞击式微生物采样器以28.3L/min流量采集5min15min,检验步骤,将采集细菌后的营养琼脂平皿置3537、48h培养，菌落计数,结果报告,采样点细菌总数结果计算：菌落计数，记录结果并按稀释比？与采气体积换算成CFU/m（每立方米空气中菌落形成单位）一个区域细菌总数测定结果：一个区域空气中细菌总数的测
3、定结果按该区域全部采样点中细菌总数测定值中的最大值给出。,自然沉降法,布点要求,均匀布点的原则，3个点的设置在室内对角线四等分的3个等分点上，5个点按梅花布点距离地面高度采样点距离地面高度1.21.5m，距离墙壁不小于1m采样点应避开通风口、通风道等,自然沉降法,采样环境条件：同撞击法采样方法：将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，暴露5min,检验步骤：同撞击法结果报告：计数每块平板上生长的菌落总数，求出全部采样点的平均菌落数，检验结果以每平皿菌落数（CFU/皿）给出。,公共场所卫生检验方法,第4部分：公共用品用具微生物,GB/T18204.4-2013公共用品用具微生物规定了公共场所公共用
4、品用具细菌总数、真菌总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌的采样与测定方法。,采样方法,一般要求 随机抽取清洗消毒后准备使用的公共用品用具，无菌操作，使用灭菌干燥棉拭子，于10ml灭菌生理水内浸润（吸取约1ml溶液）后，在用品用具的适当部位来回涂抹进行样品采集，再用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分，将棉拭子放入剩余的9ml生理盐水内，4h内送检。,采集部位与采样面积,1.杯具在茶具内、外缘与口唇接触处，即1cm5cm高处一圈采样。采样总面积为50c.,2.棉织品在毛巾、枕巾、浴巾对折后两面的中央55（25c）面积范围内分别均匀涂抹5次，每25c采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。(规
5、格板)在床单、被单的上下两部即与颈部、脚部接触部位55（25c）面积范围内分别涂抹5次，每25c采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,睡衣、睡裤随机选择2个55（25c）面积范围内分别均匀涂抹5次，每25c采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,3.洁具浴盆：在盆内一侧壁二分之一高度及盆底中央55（25c）范围内分别涂抹采样，每25c采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。脸（脚）盆：在盆内二分之一高度相对两侧壁55（25c）范围内分别涂抹采样，每25c采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,坐便器：在坐便圈前部弯曲处选择2个55（25c）范围内分别涂抹采样，每25c采
6、样面积为1份样品，每件用具共采集2份样品。按摩床（椅）：在床（椅）面中部选择2个55（25c）范围内分别涂抹采样，每25c采样面积为1份样品，每件用具共采集2份样品。,4.鞋类：在每只鞋的鞋内与脚趾接触处55（25c）范围内分别均匀涂抹5次，1双鞋为1份样品，采样总面积为50c.,购物车（筐）在车（筐）把手处选择2个55面积范围内分别均匀涂抹5次，1件物品为1份样品，采样总面积为50c。,美容美发美甲用品理发推子：应在推子的前部上下均匀各涂抹3次，采样面积达到25c为1份样品。理发刀、剪：在刀、剪两面个各涂抹1次，采样面积达到25c为1份样品。美容美甲用品：与人体接触处涂抹采样，采样面积达到2
7、5c为1份样品。修脚工具：在修脚工具与人体接触处涂抹采样，采样面积达50c为1份样品。,其他用品：在用品与人体接触处选择2个55面积范围内分别采样，每25c采样面积为1份样品，每件用品共采集2份样品。,细菌总数平皿计数法,样品接种：根据对样品污染状况的估计，选择12个适宜稀释度的样品均液，每个稀释度分别吸取1ml样品均液于2个无菌平皿中，同时分别取1ml稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。样品的培养：361，482h,结果报告：A-细菌总数测定结果N-平板平均菌落数，单位为CFUb-稀释倍数k-根据采样面积、标准限值单位得出的系数？,大肠菌群多管发酵法,革兰氏染色法1涂片（菌落的选择）2固定（火焰固定，虎口试温）3初染（结晶紫，1min，水洗）4媒染（碘液，1min，水洗）5脱色（95%乙醇，30s）6复染（沙黄，1min，水洗）7镜检,金黄色葡萄球菌平皿鉴定法,小结,1空气微生物的采样方法、采样时间、采样环境条件2空气微生物采样布点数、布点原则等3公共用品用具采样的一般要求4六类公共用品的微生物采样,
