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1、结核病实验室生物安全,什么是生物安全,生物安全是指对由现代生物技术的开发和应用过程中可能产生的负面影响，所采取的有效预防和控制措施.,保护人（实验人员、同事、实验室辅助人员）物品(标本和器材等)环境(空气、土壤、水),生物安全的目的,国家发展与改革委员会科技部建设部国家环保部国家质检总局（中国合格评定国家认可中心）国家卫生计生委农业部民航局其它有关部门,实验室管理部门,国家对病原微生物实行分类管理，对实验室实行分级管理。国家实行统一的实验室生物安全标准。实验室应当符合国家标准和要求。,基本规定,病原微生物的分类和管理,国家根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为
2、四类：第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。,第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。,结核分枝杆菌危害等级,根据卫生部病原微生物危害等级分类，结核分枝杆菌属于第
3、二类，即指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。,实验室的设立与管理,国家根据实验室对病原微生物的生物安全防护水平，并依照实验室生物安全国家标准的规定，将实验室分为一级、二级、三级、四级。,BSL-1,BSL-2,BSL-3,原则：定向气流,设施设备,标准操作程序,个人防护装备,管理,实验室生物安全控制要素,结核菌是通过气溶胶传播,涂片培养液的倾倒和转移；高速混合含菌液体；滴加、接种培养物；取样器和振荡器的使用；容器内外压力不同时打开容器,可能产生气溶胶的操作,实验室仪器设备操作及其危险性,在实验室中使用离心机、搅拌机、匀浆机、振荡器、
4、超声波粉碎仪和混合仪处理含有感染性结核菌的材料时，以及打开培养容器；冻干和过滤也可以产生感染性气溶胶,保证实验室通风,保证实验室的窗户可以通风将含有气溶胶的空气与室外空气进行交换，以排出或稀释气溶胶浓度。,如果实验室进行了正确的试验操作，那么与患者的一次不加防护的咳嗽相比，在操作中产生的气溶胶是很少的。,实验室危险,给予口罩或面巾 教会如何较卫生的方式咳嗽 分开的区域侯诊 尽快接受相关检查(在排队前)转诊到专门的结核病诊断和治疗场所(机构),对结核病可疑症状者或结核病患者应该采取：,根据我国发布的人间传染的病原微生物名录的要求，对于结核分枝杆菌大量活菌操作须在符合生物安全三级（BSL-3）的环
5、境中进行；样本检测，包括样本的病原菌分离纯化、药物敏感性实验、生化鉴定、免疫学实验、PCR核酸提取、涂片、显微观察等初步检测活动，可以在符合生物安全二级（BSL-2）的环境中进行。,结核分枝杆菌实验操作要求,用于保护操作人员、处理样品安全与环境安全的通风安全柜，柜内保持负压状态，适用于生物危险度等级为1、2、3的媒质的操作。级生物安全柜为临床生物防护中应用最普遍的一类生物安全柜。,级生物安全柜,安全柜的最佳放置位置,安全柜应该放在什么地方？尽量隔离安全柜降低人流尽量离开风管出口尽量离开门和窗口,注 意,A,B,C,D,A，B:不可 D，C:建议,Installation,生物安全柜的使用,准备
6、：在开始工作前应考虑实验中的操作步骤和所需设备，充分做好准备工作。准备好消毒剂和处理遗撒事件的物品。尽量减少房间内的走动，保证正常气流。前窗开至适当高度，打开安全柜的灯和风机。让生物安全柜工作区排气几分钟之后再开始工作,生物安全柜的使用,操作：消毒桌面（75%酒精，使用紫外线作为表面消毒的效果不一定能完全无菌）安全柜内只放本次实验所需的物品。所有物品离前窗至少15cm，即在隔栅之后，所有污染性的操作尽量远离工作区域的后部。大物体之间要保持一定距离。,生物安全柜的使用,操作：干净和被污染的物品分开放置；被污染的物品尽量不要进入干净区域，应放置在工作区域的后部。操作时物品和手臂不要频繁穿过前窗。操
7、作完毕后，将物品表面用适当的消毒液擦拭后移出，用消毒液擦拭安全柜内面。,污染区,工作区,清洁区,不要覆盖前、后、侧边的隔栅,操作完毕后用消毒液擦拭安全柜内面,生物安全柜内发生意外应急处理,用蘸取消毒液的纱布或纸巾覆盖溅出物，静置使消毒液和溅出物接触至少15分钟用适当的消毒液擦拭溅出物周围表面或其他容器表面换新手套，净化安全柜几分钟将污染物高压灭菌,生物安全柜外发生意外应急处理,发生重大溅洒事故时，所有人应立即离开实验室，待气溶胶沉降完全后再处理。,可以在 BSC内用火焰?,在生物安全柜内所形成的几乎没有微生物的环境中，应避免使用明火。使用明火会对气流产生影响。在对接种环进行灭菌时，可以使用微型
8、燃烧器或电炉，而不应使用明火。,高压灭菌器使用,负责高压灭菌的人员应接受过良好的培训并持证上岗。灭菌前：检查灭菌容器的盖子，将盖子旋松后再放入消毒物品。容器內各种液体约装八分满，切勿装满。具有挥发性的物质，不可高压灭菌。灭菌前务必确定水位在正常要求水位以上。,高压灭菌器使用,灭菌过程中：随时查看所设定温度（121度）、压力是否正确。（121度，30分钟）灭菌后：开门前务必确定內锅压力表已经归零。灭菌器中各项物品及灭菌器本身均高温，取出物品时应戴手套。随时保持锅內清洁，以延长使用年限。,个人防护装备(PPE),在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷
9、濺物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。,N95是感染防护的最低标准，N95口罩非常重要，“NIOSH”认证。,不合格,个人防护装置选择原则,要求工作人员应掌握的要点必须十分了解和掌握自己工作性质和特点所涉及的实验工作需要使用个人防护装备的类型正确的使用方法使用前应仔细检查，不使用标志不清、破损或泄漏的防护用品,个人防护,出实验室前，一定要洗手！,废弃物处理,传染性废弃物对实验员和环境危险性极大.在废弃物离开实验室前必须高压灭菌或去污染处理.,结核菌污染物品灭菌,结核分枝杆菌对湿热敏感100煮沸5min可杀死痰中结核杆菌。121压力蒸汽30min，可杀灭动物脏器、痰或培养基中的结核分枝杆菌。,生物安全意识至关重要！谢谢！,
