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1、1 .菌落形态观察观察菌落的大小、形状、隆起度、边缘、表面性状、颜色与透明度、质地和干湿度。2 .革兰氏染色按照革兰氏染色方法进行制片、初染、媒染、脱色、复染、干燥、镜检；干燥后,用油镜观察。3 .鞭毛染色挑取1830h新鲜平板培养物制备菌悬液，制片，室温自然干燥。滴加硝酸银染色A液覆盖35min,用蒸储水充分洗去A液，再滴加B液染色约Imin,当涂面出现明显褐色时，立即用蒸储水冲洗。自然干燥后用油镜观察。菌体呈深褐色，鞭毛显褐色。4 .糖类分解试验将被检菌接种于糖发酵培养基中，37培养23天。如果培养基变黄，说明产酸；如变黄的同时，还有气泡，说明既产酸又产气。培养基仍呈蓝色，说明未产酸。选取
2、木糖、葡萄糖、半乳糖和蔗糖。5 .口引跺（靛基质）试验将待检菌种接种于邓享氏蛋白质的陈溶液中，37C培养12天。于培养液中加入戊醇或二甲苯2-3ml,摇匀，静置片刻后，沿管壁加入试剂2ml,如出现红色沉淀，表示为阳性。6 .淀粉水解试验将LB琼脂加热融化，使冷到50,加入淀粉溶液，混匀后，倾注平板。将细菌划线接种于平板上，37C培养24小时，生长后取出，在菌落处滴加革兰氏碘液少许，培养基呈深蓝色，能水许解淀粉的细菌菌落周围有透明环。9 .V-P试验将被检菌接种于试验培养基中（葡萄糖、K2HPO4、蛋白陈各5g,溶于1OOOml水中，分装于试管中，0.075MPa灭菌10分钟），培养27天后，于
3、培养物中加入Imll0%的NaOH,混匀，再加入34滴2%氯化铁溶液。数小时后，培养基表面的下层出现红色者，为阳性。10 .甲基红（M.R）试验接种细菌，于37C培养27天后，于培养物中加入几滴甲基红酒精溶液（0.1g甲基经溶于300ml95%乙醇中，加蒸储水至50OmI）,如呈红色，表示阳性。11.柠檬酸盐利用试验将被检菌接种到SimmonS固体柠檬酸盐培养基上，37C下培养24天，能利用柠檬酸盐的细菌表现为有细菌生长，培养基变为蓝色，不能利用柠檬酸盐的细菌不生长，培养基不变色。12 .硝酸盐还原试验将被检细菌接种于硝酸盐培养基中，37培养12天，每管中先加入甲试剂0.1ml,再加乙试剂数滴，如出现红色，表示阳性。13 .接触前试验将1ml3%的H2O2倾注于生长物（菌落或菌苔）上，有气泡（02）发生者为阳性。也可于清洁小试管中加少量H2O2（30%）,再用清洁无菌的细玻棒（或火焰封口的毛细管或银铭做成的接种环）醮细菌少许，插入H2O2液面下，有气泡者为阳性。也可在玻片上滴一滴H2O2蘸取少许培养物，混合，有气泡者为阳性。14.16srDNA分析利用PCR技术从短小芽胞杆菌基因组中扩增出16SrRNA序列，然后连接测序载体，送交上海英俊公司完成测序。测序结果提交到NCBL并且进行比对分析,确定菌种的分类学位置。ps:高浓度食盐鉴定金黄色葡萄球菌。
