输血科AB0血型鉴定:盐水介质凝集试验.docx
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1、输血科ABO/Rh血型鉴定盐水介质凝集试验操作规程1 .目的规范ABO血型鉴定操作,保证临床用血的安全性和有效性。2 .职责输血科工作人员负责ABO/Rh血型鉴定3 .适用范围适用于输血科ABO/Rh血型鉴定标本4 .实验原理根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及0型4种。利用红细胞凝集反应,通过正反定型准确鉴定ABo血型。正定型:是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应A抗原或/和B抗原;反定型:是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A或和抗Bo5 .所需材料与设备5.1 材料抗-A、抗-B、抗-D试剂:A、B、O型反定型红细胞;生理盐水;试管;
2、5.2 标本EDTA-K2抗凝血3ml5.3 设备普通离心机;显微镜;6 .操作步骤6.1 将标本离心,分离血浆与红细胞,吸取红细胞制成3%悬液。6.2 正定型:取试管3支,分别标注抗-A、抗B、抗-D,用滴管分别加抗A、抗-B、抗-D试剂各2滴于试管底部,再以滴管分别加入3%红细胞悬液于3支试管中,混匀。6.3 反定型:另取试管3支,分别标注A、B、O细胞,用滴管分别加受检者血清各2滴于试管底部,再以滴管分别加入A、B、O型反定型红细胞,于3支试管中,混匀。6.4 离心1500g*15s6.5 轻轻摇动试管,使沉于管底的红细胞悬浮起来,先以肉眼观察有无凝集或溶血现象,如肉眼观察未见凝集现象,
3、将反应物倒于玻片上,用显微镜观察。6.6 ABo血型结果判定:见表一6.7 Rh血型结果判定:红细胞与抗-D试剂凝集为抗-D阳性;无凝集为抗-D阴性。6.8 凝集强度判定:4:红细胞凝集成一大块,背景清晰透明;3+:红细胞凝集成数小块,背景尚清晰;2+:红细胞凝集分散成许多小块,背景可见游离红细胞;1 +:肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞;:镜下可见数个红细胞凝集在一起,周围有许多游离红细胞;镜下未见凝集,红细胞均匀分布;混合外观凝集:指镜下可见少数红细胞凝集,而绝大多数红细胞仍然分散分布。表一、ABO血型结果判定受检者红细胞+标准血清(正定)受检者血清+标准红细f包(反定)受检者血型抗A
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