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1、ABO血型鉴定标准操作规程【目的】正确鉴定血型，保障患者的输血安全。【范围】所有送检需要鉴定ABO血型的标本。【职责】配发血室负责临床患者的血型鉴定。【原理】根据ABO血型分类原则，即红细胞上带有什么抗原就称什么血型、同一个体内抗原与抗体互补。根据含某抗原的红细胞与含相应抗体的血清混合可使红细胞发生凝集，反之不发生凝集的原理，利用分型血清或分型红细胞鉴别血型，前者称为正定型（又称红细胞定型），后者称为反定型（又称血清定型）。通过正反定型可准确鉴别ABO血型。【标本采集和处理】1、标本采集：EDTA-K2或EDTA-K3抗凝静脉血2mL。标本保存：室温放置不超过6小时，4保存不超过72小时，无溶
2、血,无凝块及明显乳糜。【设备与试剂】1、人ABO血型反定型用红细胞试剂盒包装规格：每盒内装有Al,B,0试剂各1支，IOml/支主要组成成分：Al型、B型、。型红细胞。储存条件及有效期：2-8C储存，不能冰冻；有效期2个月。2、ABORhD血型检测卡（微柱凝胶）包装规格：2人份/卡，12卡/盒。储存条件及有效期：18-25避光保存，自检定合格之日起12个月。3、抗A抗B血型定型试剂（单克隆抗体）包装规格：10ml。储存条件及有效期：2-8避光保存；储存条件下有效期为24个月。4、红细胞悬液：取标本离心后压积红细胞与生理盐水配制（试管法为3%-5%；微柱凝胶法为05%-08%）.5、BaSo20
3、05-2BaSo2002-2型医用低速离心机：珠海贝索生物技术有限公司。6、TD-3A型血型血清学用离心机：长春博研科学仪器有限责任公司。【操作步骤】1、试管法正定型：a）取洁净小试管（内径IOnIm义60mm）3支，分别标明抗-A,抗-B。b）抗-A,抗-B管中分别按标记加入相应抗体血清1滴，并加入受检者3%5%红细胞悬液1滴，混匀。c）放入BaSo2002-2型离心机以3400rmin离心15秒。d）检查是否有溶血，然后轻轻摇动试管，肉眼观察有无凝集现象，必要时须用低倍镜观察，记录结果。反定型：a）取被检者血清（或血浆）各1滴（50ul）分别加于3支标记好的小试管中；b）分别各加1滴（50
4、UI）AKB、0试剂红细胞，混匀；c）放入BaSc）2005-2型离心机以3400rmin离心15秒；d）检查是否有溶血，然后轻轻摇晃试管，肉眼观察有无凝集现象，必要时须用低倍镜观察，记录结果。2、微柱凝胶法（ABO、RhD血型检测卡）a）取ABO、RhD血型检测卡,在卡上标记患者信息，将卡上的锡纸膜撕开。b）将受检者0.5%-0.8%红细胞悬液分别加入第一至第三支微管中，或第四至第六微管中，每管50ul。c）即刻使用TD-3A型血型血清学用离心机离心5min,2分钟900rpm,3分钟150OrPnb取出肉眼判定结果。3、结果判定a）试管法正定型（细胞定型）反定型（血清定型）受检者血抗-A抗
5、-BA细胞B细胞。细胞型+-A- -B- -+-O+-ABb）微柱凝胶法阳性结果：红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中，为阳性反应。反应强度：特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面为强阳性反应；复合物在胶中为弱阳性反应；愈靠近胶底部颗粒愈小，反应愈弱。阴性结果：被检红细胞抗原无相应的抗体结合，不出现特异性抗原抗体复合物，红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。血型抗A抗B抗D抗A抗B抗DD阳性A+B+O+AB+D阴性A+B+OAB+【注意事项】1、新生儿的血样中抗体含量较低，抗原发育不完全。同时可能含有母亲血液中的抗A或抗B抗体，可能导致试验中假阳性和假阴性结果的出现。2、正反定型不一致的标本重复试验。【支持文件】血站技术操作规程【相关记录】ABO/Rh(D)、抗体筛选实验记录本
