《人血白蛋白测定标准操作规程.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《人血白蛋白测定标准操作规程.docx(3页珍藏版)》请在课桌文档上搜索。
1、人血白蛋白测定标准操作规程1.实验原理:(漠甲酚绿法)人血白蛋白在PH4.1的缓冲液中带正电荷,在有非离子型表面活性剂存在时,可与带负电荷的燃料溟甲酚绿结合形成蓝绿色的复合物,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比,与同样处理的白蛋白标准比较,即可求的血清中白蛋白的含量白蛋白+溟甲酚绿白蛋白溟甲酚绿复合物2.试剂主要组成成分组成成分浓度R琥珀酸缓冲液50mmolL溟甲酚绿0.3mmolL聚氯乙烯月桂酸Immo1/L叠氮钠lgLSTD牛人血白蛋白40gL3.样本要求:新鲜无溶血血清,勿使用肝素抗凝血浆。2225保存8小时,28保48小时,-20C保存7天,样本不可反复冻融!4.检验方法:仪器法(详见DF-
2、603/DI-600标准操作规程)5.参考范围;样本参考范围(gl)血清4-14岁儿童38-54成人34-486.检验结果的解释6.1 线性范围:在给定的样本/试剂比例和条件下测定时,本试剂线性范围可达60gL0样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本。最大稀释5倍。6. 2单位换算:gdL=gLO.17检验结果的局限性6.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊或以水空白在630nm处吸光度大于0.300时不能使用。8.产品性能指标8.1 试剂外观:无色透明或淡黄色液体,无悬浮物及沉淀物。8. 2装量:不低于标识值8. 3空白吸光
3、度:在63Onm处,光径ICm时,空白吸光度AWO.300。8 .4分析灵敏度:在630r三处,光径ICm时,测量40gL的总蛋白,吸光度差4A20.0029 .5线性区间:试剂的线性区间为10.0-60.0gL,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900;b)10-20gL区间内,线性绝对偏差不超过4.0gL;(20.1-60)g/L区间内,线性相对偏差不超过10%。8. 6精密度8. 6.1重复性:重复测试(40.05.O)gL的样本,所得结果的变异系数(CV)应2.0%8. 6.2批间差:重复测试(40.05.0)g/L的样本,所得结果批间相对极差(R)应W5.0%8. 7准
4、确性:相对偏差应不大于6.0%。8.8稳定性:(2-8)C下,原包装存放的试剂有效期为18个月.取到期后一个月的试剂进行测试,应满足1-6.1、7的要求。8. 9PH值:PH值范围是4.10.208.10校准品8.10.1外观:无色或淡灰色透明液体。8.10.2准确度:标准生化分析仪和试剂后,测定校准品,相对偏差应不大于10%。8.10.3均一性:瓶间均一性:CV5%8 .10.4稳定性:(2-8)下,原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试,应满足8.10.1-8.10.3的要求。9 .临床意义:白蛋白是一种不含碳水化合物的蛋白质,占总血浆蛋白的55%-65%。它的主要
5、功能:维持血浆胶体渗透压;参与运输和贮存各种配体,并是内源性氨基酸的来源。白蛋白能结合和增容各种化合物:如胆红素、钙和长链脂肪酸。此外,白蛋白能结合有毒的重金属离子及许多药物,这就是血液中低白蛋白浓度出现药物动力学显著影响的原因。除脱水病例外,高白蛋白血症无甚诊断意义。低白蛋白血症可在多种疾病和各种因素时出现:肝脏疾病和蛋白摄食降低致使合成损坏;组织损伤(严重烧伤)和炎症;氨基酸吸收障碍;肾病综合征引起的蛋白尿;通过粪便的蛋白丢失(肿瘤)。低蛋白血症的严重病例,血浆白蛋白的最大浓度为25gL0由于血浆渗透压降低,水分通过毛细血管渗透进入组织(水肿)。白蛋白测定可作为控制病人饮食补给的监测,亦是一个良好的肝功能试验。