游离三碘甲状腺原氨酸测定标准操作规程.docx

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1、游离三碘甲状腺原氨酸测定标准操作规程1检验原理:采用两步法免疫检测,运用化学发光微粒子免疫检测(CMIA)技术与灵活的检测模式的结合,测定人血清和血浆中的游离(未结合)T3o第一步,将样本和T3抗体包被的顺磁微粒子混合。样本中的T3(未结合型)与T3抗体包被的微粒子结合。冲洗后进入第二步,加入哇咤酯标记的T3结合物。随后将预激发液和激发液加入反应混合物中;测量化学发光反应结果,以相对发光单位(RLUs)表示。样本中的游离T3含量和ARCHITECTi光学系统检测到的RLUs值之间成反比。2.试剂主要组成部分:2.1试剂盒微粒子:三碘甲状腺原氨酸抗体(绵羊)包被的微粒子,储存于含有绵羊IgG稳定

2、剂的2-(N-吗啡咻)乙磺酸(MES)缓冲液中。最低浓度:0.085%固体物质。防腐剂:抗菌剂。结合物:口丫咤酯标记的三碘甲状腺原氨酸结合物,储存于含有氯化钠(NaCI)和聚乙二醇辛基苯基酸(TritonXT00)稳定剂的柠檬酸盐缓冲液中。最低浓度:0.33ngmL.防腐剂:抗菌剂。2.2需要但未提供的试剂预激发液:预激发液含有1.32%(W/V)过氧化氢激发液:激发液含有0.35N氢氧化钠浓缩清洗缓冲液:浓缩清洗缓冲液含有磷酸盐缓冲液。防腐剂:抗菌剂。3.样本要求:人血清(包括采集于血清分离管中的血清)或采集于肝素、肝素锂或EDTA钾抗凝管中的血浆。血清和血浆样本中应不含纤维蛋白、红细胞或其

3、他颗粒物质。2-8C可保存6天;-10以下可保存6个月。样本应避免反复冻融。4.检验方法:仪器法(详见雅培i1000标准操作规程)5.参考范围样本参考范围(pgml)血清或血浆1.71-3.716.检验结果的解释1. 1游离三碘甲状腺原氨酸项目通过四参数Logistic曲线拟合数据约简法(4PLC,Y加权)生成一条校准曲线6. 2结果单位转换:浓度(pgmL)XL536=浓度(pmolL)7.检验方法的局限性7.1 将检测结果用于诊断时,应与其他数据:如症状、其他甲状腺检查结果、临床表现等结合使用。7. 2游离T3检测结果与临床症状不符时,需要通过附加试验来验证检测结果。7. 3本项目尚未建立

4、新生儿样本的性能指标。8.产品性能指标8.1 精密度:精密度10%8. 2分析灵敏度:游离三碘甲状腺原氨酸项目的分析灵敏度WL0pgmLo8. 3分析特异性:游离三碘甲状腺原氨酸项目的平均分析特异性通过与其他物质的交叉反应率来评估,检测含有1,000,OOOPgmL甲状腺素(T4)的样本时产生的交叉反应率V10%8.5干扰性项目浓度干扰率血红蛋白500mgdL10%胆红素20mgdL10%甘油三酯2000mgdL10%蛋白质12gdL10%8. 6准确度(相关性):ARCHlTECT游离三碘甲状腺原氨酸项目与AXSYM游离三碘甲状腺原氨酸项目比较的斜率为LOo0.20,相关系数(r)20.90

5、.9. 临床意义:3,5,3三碘甲状腺原氨酸(T3)是一种甲状腺激素,分子量为651道尔顿,在血清中的半衰期为1.5天。T3以游离型和蛋白结合型在血液中存在,这两种形式呈动态平衡。T3与甲状腺素结合球蛋白(TBG).前白蛋白和白蛋白结合。对于T3在这些结合蛋白中的实际分布情况存在着争议,估计在TBG中占38%-80%,在前白蛋白中占9%-27%,在白蛋白中占ll%-35%o仅有0.2%-0.4%的总T3作为未结合型或游离T3存在于血液中。这部分游离型代表具有生理活性的甲状腺激素。患有GraVe病时,游离T3通常比游离甲状腺素(T4)升高的幅度大。极少数情况下,大概有5%的甲状腺功能亢进患者会出现游离T3单独升高的情况(T3型甲状腺毒症)。相反,患有毒性多结节性甲状腺肿以及T4治疗过量时,游离T4会比游离T3升高的幅度大。血清游离T3检测可以鉴别诊断这些形式的甲状腺功能亢进。游离T3检测也可用于监测接受抗甲状腺药物治疗的患者,此治疗的目的是减少T3的生成并抑制T4向T3的转化。血清游离T3检测还可用于评估甲状腺功能亢进的程度。参考文献:ARCHITECTFreeT3测定试剂盒说明书

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