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1、急危重症患者血培养标本采集技术规范【名词定义】血培养(bloodculture),将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上，在一定温度、湿度等条件下，使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别，从而确定病原菌的一种人工培养法。用于菌血症、败血症及脓毒败血症的病因学诊断。一套血培养(asetofbloodculture)指从一个穿刺部位抽取血液，分别注入需氧和厌氧血培养瓶分别进行需氧和厌氧培养。【适应证及采集套数】1 .急性脓毒症：抗微生物药物使用之前，10分钟内从不同部位采集23套血培养。2 .急性细菌性心内膜炎：抗微生物药物治疗前12小时内，从3个不同部位采集3套血培养。如24h培养阴性,则
2、再采集两套。3 .疑似菌血症：起始抗微生物药物治疗前，24小时内不同部位采集24套，间隔不小于3h。4 .不明原因发热：从不同部位采集24套。5 .疑似菌血症(儿科患者)：立即采集血液标本，接种儿童血培养瓶，建议采集2套。6 .导管相关血流感染：方法1：未拔除导管的情况下,同时从留置管和外周静脉采集血液，各采集一套送检血液培养；方法2：拔除导管的情况下，剪下5cm导管尖端送检培养，同时送检一套外周血液培养。【禁忌证】1 .血培养瓶破裂、渗漏。2 .血培养瓶内注入非无菌标本。【目的】临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血流感染的患者,需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，
3、才能进行有效的抗菌治疗，提高治愈率和降低医疗费用。【制度与依据】1.本规范理论部分主要依据：中华预防医学会医院感染控制分会发表于2018年第28卷第20期中华医院感染学杂志的临床微生物标本采集和送检指南。感染性疾病的正确诊治需要以正确的病原学检测作为指导，而正确的病原学检测其前提是采集和送检合格标本。因此，必须规范微生物标本的采集和运送，避免因标本的不合格，产生错误的病原学检测结果而误导临床治疗。3 .本规范操作部分主要依据：中华人民共和国国家卫生健康委员会2018年12月11日发布，2019年6月1日实施的临床微生物学检验标本的采集和转运，是中华人民共和国卫生行业标准，WS/T6402018
4、o本标准是按照GB/TL12009给出的规则起草；起草单位：北京大学人民医院、中日友好医院、安徽省立医院、首都医科大学附属北京友谊医院、北京医院、北京市垂杨柳医院。【准备】1 .用物准备：医嘱单、血培养化验单或标本条形码、无菌治疗盘、血培养瓶1套（需氧瓶、厌氧瓶各1个）、采血针或IOml注射器2个、检查手套、安尔碘消毒液、棉签、利器盒、洗手液，检查用物的有效期，物品处于备用状态。2 .环境准备：病室安静整洁，光线充足，适宜操作，关闭门窗（或窗帘），请无关人员回避，保护患者隐私。3 .护士准备：衣帽整洁，洗手戴口罩4 .患者准备：患者处于安静状态，配合操作。【操作流程】1 .素质准备服装整洁2
5、.解释评估1.核对医嘱和执行单2.评估患者病情、意识状态、合作能力3.了解患者心率、血压、SPO2等4.向清醒患者做好解释3 .洗手戴口罩七步洗手法正确洗手4 .物品准备1.血培养瓶1套2.IOml注射器或一次性采血针3.消毒用品（安尔碘、棉签、酒精棉签）5 .解释核对采用两种身份识别的方法进行患者身份确认（腕带、反问式）6 .采血部位评估根据医生要求选取采血部位，评估患者皮肤情况，选取采血点，做标记7 .消毒L以穿刺点为中心消毒穿刺部位2遍，待干,消毒面积大于5cm5cm2.采用“非接触式”技术，即在皮肤消毒后，不能碰触穿刺部位3.酒精棉签消毒血培养瓶瓶口8 .采血从标记点穿刺采血，采血量为
6、8IOml9 .拔针采血量足够后分离采血针和血培养瓶，拔出针头，快速用干棉签按压穿刺点；注射器采血时，拔针时干棉签不得触碰针头10 .按压L静脉采血按压时间不得少于3分钟2.动脉采血，按压时间不得少于5分钟，至不出血为止11 .注血注射器采血原则上不更换针头，但针头污染需更换，将注射器针头三分之一插入血培养瓶内缓慢注入,防止发生溶血反应12 .废物处理整理用物，并分类处理13 .标注送检再次核对标本标签，标注患者基本信息、标本采集部位、采集时间，即刻送达实验室14 .观察宣教穿刺结束后观察穿刺部位有无渗血、肿胀及局部血液循环情况，并交代注意事项15整理床单位取舒适体位，妥善放置呼叫铃16 .医
7、嘱处理打铅笔勾，签名签时间17 .记录在护理记录单上记录血培养采集时间、采集部位、送检时间及签名【注意事项】1,菌血症时血培养(1)尽可能在患者寒战开始时，发热高峰前3060分钟内采血。(2)尽可能在使用抗菌药物治疗前采集血培养标本；如患者已经使用抗菌药物治疗，应在下一次用药之前采血培养。(3)采血部位：通常为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血，除非怀疑有导管相关的血流感染，否则不应从留置静脉或动脉导管取血，因为导管常伴有定植菌存在。(4)采血工具：建议采用商业化的真空血培养瓶，室温保存。同一部位采集两瓶血培养时不建议更换针头。(5)采血次数、血培养瓶选择：对于成人患者，应同时分别在两个部
8、位采集血标本；每个部位应需氧和厌氧培养各一瓶。对于儿童患者，应同时分别在两个部位采集血标本,分别注入儿童瓶，厌氧瓶一般不需要，除非怀疑患儿存在厌氧菌血流感染。(6)采血量：采血量是影响血培养检出阳性率的重要因素，采血量过少会明显降低血培养阳性率。成人以8-10ml为宜，最低5mlo对于儿童血培养的血量要求，欧洲和美国指南建议按照每千克体重进行采样。如美国要求新生儿V4kg,单侧抽取0.5L5ml血液进行单瓶培养；体重36kg以上的儿童，按成人规则进行血培养。(7)皮肤、血培养瓶消毒：为减少皮肤、培养瓶口等对血培养造成的污染，在穿刺前，应对皮肤和培养瓶口进行消毒并充分干燥，以减少假阳性的发生概率
9、。(8)避免将采血管内空气注入厌氧血培养瓶。(9)避免在静脉留置导管连接处(如肝素帽处)采血标本，避免标本污染。2 ,感染性心内膜炎血培养(1)建议在经验用药前30分钟内在不同部位采集23套外周静脉血培养标本，如果24小时内3套血培养标本均为阴性，建议再采集3套血培养标本送检。(2)怀疑左心内膜炎时，采集动脉血提高血培养阳性率。3 .导管相关血流感染的血培养：分为保留导管和不保留导管两种情况。(1)保留导管：分别从外周静脉和导管内各采取1套血培养标本，在培养瓶上标注采集部位，送往微生物实验室,同时进行上机培养。2套血培养检出同种细菌，且来自导管的血培养标本报阳时间比来自外周的血培养标本报阳时间
10、早2小时以上，可诊断导管相关血流感染。(2)不保留导管：在外周静脉采集2套血培养标本。同时，通过无菌操作剪取已拔出的导管尖端5cm,在血平板上交叉滚动4次进行送检。或采用超声震荡法留取菌液接种。从导管尖端和外周血培养出同种同源细菌，且导管尖端血平皿的菌落计数15CFU有意义。【前沿进展】1 .皮肤消毒：采血前的皮肤消毒结合2016版美国静脉输液治疗实践标准推荐：在进行外周静脉穿刺时，护士应使用一双新的一次性非无菌手套以及“非接触式”技术，即在皮肤消毒后，不能碰触穿刺部位。2 .采血用具的选择：推荐使用一次性静脉采血针，可减轻患者疼痛程度，提高一次穿刺成功率，操作简便，适合临床广泛应用。3 .标本运送与接收：血液标本采集后应立即送检，最好在2小时内送达实验室。不能及时送检者，应置室温暂存。血培养瓶接种前后都禁止放冰箱，运送的装置要足够安全,避免血培养瓶的运送过程中因碰撞发生破裂。
