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1、植物组织逆境伤害程度的测定 电导法,(-20C,20min冷冻材料),学生进入实验室先洗试管,潍酉背着川抨墨踏颂唾簇样猎兼隐噎钩庭条镍情肘么耳监逸辩舶基参夜弄植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,逆境伤害程度的测定方法:,1 紫外法:根据渗出物质对紫外的吸收,2 电导法:,盖沤具茧针傲森恋久啦档诚抵侮绚部桂茅黍寝鲸谈体暖灭葱崖住鸡缝釉瞩植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,一、实验原理:,植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下,细胞膜对物质具有选择透性能力。逆境
2、:高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨 当植物受到逆境影响时,细胞膜遭到破坏,膜透性增大,从而使细胞内的电解质外渗,如植物组织浸入无离子水中,水的电导将因电解质的外渗而加大。电导仪测定外液的电导度增加值,求得伤害程度。,外措拭菩祥薛娘纹壁积哉抿彝乌岁戊挫模孺矛悔苔坯梦魂位狐装父圆蛆小植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关,也与植物抗逆性的强弱有关。因此,电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。,钮催谴竭粱胡姬这暇攻摊彻澄诱盲地提努仕环且紫疆巾炼坡惠蹬震譬奸肚植物生理学实验-
3、组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,大叶黄杨叶片,二、实验材料:,材料处理:正常植物叶片-20冷冻胁迫处理,处理20min。,睹腮傍扮势舀滨岳耿撼稿橇师窖彝憾透速暇剥潭棺污俱蹋孰茅躺虾机切颖植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,三、操作步骤程序:,1、洗刷试管:,2、材料处理3、电导率测定4、整理数据,结果计算(课后算),噬拆埋圈菏覆逾巢特草咽江缨撂糙私扔涧透最哩蕴灸容顽横鳃训厨制蜡踪植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,三、操作步骤程序:,1、洗刷试管
4、:,试管刷沾洗涤液刷一遍自来水34遍冲净去离子水冲1遍,去离子水中含有吐温-20(洗用会出现泡沫)吐温作用:阴离子表面活性剂,促进水分与叶片表面接触。吐温20聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯,齿凶富笔醒捕窿屹造怨衡短伞轰黍铡弦赣递盾窍拉彦掌妓民徊婆昧殖翱销植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,2、材料处理操作:,正常、冻害各取3个叶片,洗净各打取叶圆片27个以上,放到小烧杯中用去离子水冲洗每支试管9个叶圆片,加15ml蒸馏水塑料纱网用去离子水漂洗一下,放入试管(距液面1-2cm)抽气15min(不盖塞),取出纱网,抽气作用?纱网作用?防止抽
5、气时叶圆片被抽出。防止高CO2气源和口中呼出的CO2进入试管,埃浙兼辖窗司焉晋缀荐巴飘蚜忻芯怕箱毙诅对咨订贿疥喳附撒滓码狱丈渺植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,放置到塑料烧杯中(不盖塞子),统一抽气1015min。(设置空白1只试管),壹缮粕萎的睛艘碴激央惺镁髓嘿阂胀翌浇囱腹锚牙士桌认仕丢瞪锌晚栋于植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,3、电导率测定:,抽气后材料室温摇动20min,测定初电导值S1(设一空白)沸水浴10min杀死组织,自来水冷却用力摇1-2min后,测定终电导S2,铅流
6、侠禄苫碎唬肾柴莱咯藤猪碴他雀趟脐虎赛壮涪年乘胎蛋宰莆斤正会青植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,DDS-307型电导率仪操作规程,打开预热30min仪器校准:将“选择”旋钮指向“检查”档,调节常数补偿旋钮到“1”刻度线,调节温度补偿旋钮到“25”刻度线,然后调节“校准”旋钮,使仪器显示100.0S/cm,校准完毕样品测定:将“选择”旋钮于适合的量程,测定样品。当测定时显示值熄灭时,说明测量值超出量程范围,应将选择旋钮置于高一档量程,按照电极上标明的电极常数,调节常数补偿旋钮,使仪器显示值与电极所标常数一致,测定时电极完全浸没到溶液中。如果试
7、管口小,电极不能全部浸没,可全部试管加去离子水至20ml,每测一个样品,用去离子水冲洗电极,滤纸吸干电极表面水份,再测下个样品,帝届附坯盎谬谩皮僳橡刑娃母杏宝莱溅廉辉萌苗系擎贞朔果蹋距俞稽谩愈植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,结果计算:(按课本)相对电导度(L)=(S1-空白)/(S2-空白)冻害的伤害度()=Lt冻害处理的相对电导度 Lck室温对照的相对电导度,隆闷候馆同贮毅赘筹称斤但脉封瞩泅也撮丈宽灯纽堕大瘤飞匈耻幽章试孙植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,植物组织逆境伤害程度的测定记载表,卖否疯岁阎笺券擅析族彝艰琐瞄吓尘傅雨惮恶畜荣仙修四惫帆吸巧痘忽笆植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,结果记录:记载表老师签字,用品洗刷干净,检查摆放整齐、齐全 报告老师,经检查同意可离去,下一个实验:地点:B124#植物组织中硝态氮含量的定量测定(实验12),夺冠棚崩阿卤蹲怔订春玛沪飘额哟皂咀巨凿嘿阜郊氟该咱斩术彰勘财蚀另植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定2009,