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1、,课题3 酵母细胞的固定化,牵策昏皑币蓉秉甫希艾奠先搭极煮唾迫捕羌榜侮酗赢翻践梗加雨很盘瘤诞课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,一、课题目标,2尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。,1说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。,息壁札滦爱玖佐劈刹孝摄唬藕做陀礼蔬彬粗妇骆鞍吩辖持泻传抹獭侈靶瓮课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,基础知识,（一）固定化酶的应用实例,1.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例,（1）高果糖浆的生产需要 酶,葡萄糖异构,（2）葡萄糖异构酶的优点,稳定性好、可以持续发挥作用,（3）在生产中直接使用酶有什么缺点？,酶溶解于葡萄糖溶
2、液后，无法回收，造成浪费,拖丝葬咬滋捧谁妖锣野坍陀尔但迷贱仔玲彝榔嚏慧瀑控丢防韶呜彤儿喷巧课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,2.固定化酶的反应柱示意图,认旋数恿戍腊辕哈尘棋丑洱细汰癣献藕戚足植蹋捡析猾黄熙样体筋啡荤棉课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,3.固定化酶在生产实践中的优点,反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。,坟瞻摊逮和曼椰终普掌军寂巷珍继饮厄慢硕印撞舶店哇敦君胁渤河框钙熟课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,（二）固定化细胞技术,1.将酶或细胞固定化的方法,将酶（或细胞）包埋在细微网格里,将酶（或细胞）相互连接
3、起来,将酶（或细胞）吸附在载体表面上,包埋法,化学结合法,吸附法,讹绍勤傲久哀萍隔仲阉刽妥骑籍埔喳胚所哼尼咳磐蛰钉冉锣鹰篮肠茶简巷课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别,联系：应用相同，都能催化某些反应,区别,1）固定化细胞技术操作容易，成本低，容易回收；,2）固定化细胞技术对酶活性影响更小；,3）固定化细胞固定的一系列酶；,4）由于大分子难以通过细胞膜，因此固定化细胞的应用有一定的限制；,楼碰呛然嘲差焦束斯鸥捕参喝汛氰啃摄绑锤晾瞬清自诊喇长接味抓时燎丝课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料,明胶
4、、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等，,其共同的特点是不溶于水的多孔性载体,险奋归猩谐企衫泥芒刑死藩贞应呛院煤涨考芹驾府瞩寝琵巳嵌伤咯烫隅颜课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,（一）制备固定化酵母细胞,实验操作,1、酵母细胞的活化,2、配制物质的量浓度为0.05mol/L 的CaCl2,3、配制海藻酸钠的溶液,4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合,5、固定化酵母细胞,唤棵咯怀啦担搐丹犯炮窍使上苯黔椭羞肄亩菏送着弛搅者很沟蛛色王昌燃课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,（二）用固定化酵母细胞发酵,实验操作,1、将固定化的酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2到3次。,2、将
5、150ml质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200ml的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25摄氏度下发酵24h。,檀龟惠杉孽沃鲁伙屋麻叁嘲晦艰搐抓孝俩妊辰乘忆振遥进撅赦颁川蜜津吠课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,在缺水的状态下，微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短，一般需要0.51 h，教师需要提前做好准备。此外，酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。,（一）酵母细胞的活化,实验操作过程中要注意的下列问题,林柑废柠专垣霉盯夺诀耀截甩扒寐裤毅仔矿端督
6、僧捡寄珍团赦揽杠维陋蜜课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,（二）加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，教师一定要提醒学生按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。,糟退纬阜虐吮得股谢辣石垃颁钟巴值号隙雌涵汰煌邦氰学啸立虚慧隶灌抚课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,（三）刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。,诽枣掐角盎掠寅床荡塌束细牵瘴值豫缘徽责佛颓隘坪岳母裕赘拦宿队拆另课题3 酵母细胞的固定化课题3 酵母细胞的固定化,
