KJWI-QA-25 菌落总数测定方法作业指导书 .docx

上传人:夺命阿水 文档编号:630119 上传时间:2023-09-18 格式:DOCX 页数:7 大小:39.70KB
返回 下载 相关 举报
KJWI-QA-25 菌落总数测定方法作业指导书 .docx_第1页
第1页 / 共7页
KJWI-QA-25 菌落总数测定方法作业指导书 .docx_第2页
第2页 / 共7页
KJWI-QA-25 菌落总数测定方法作业指导书 .docx_第3页
第3页 / 共7页
KJWI-QA-25 菌落总数测定方法作业指导书 .docx_第4页
第4页 / 共7页
KJWI-QA-25 菌落总数测定方法作业指导书 .docx_第5页
第5页 / 共7页
点击查看更多>>
资源描述

《KJWI-QA-25 菌落总数测定方法作业指导书 .docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《KJWI-QA-25 菌落总数测定方法作业指导书 .docx(7页珍藏版)》请在课桌文档上搜索。

1、文件修改记录版本修订次数修订日期修订内容002011-02-01A12012-05-25修订分发号:(仅适用于控制文件)(仅盖有红色印章的文件才有效)1.0目的规定菌落总数的测定方法。2.0范围适用于加多宝凉茶、浓缩汁、原辅材料、流程卫生中菌落总数的检测。3.0术语3.1菌落总数食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。4.1 职责质检部:负责按此方法对加多宝凉茶、浓缩汁、原辅材料、流程卫生中菌落总数进行检测。4.2 工作流程图见附录A6.O内容及要求6.1 设备和材料除微生物实验室常规无菌及培养设备外,其他设备和材料如

2、下:6.1.1 恒温培养箱:361、551(必要时可选用)6.1.2冰箱:2一5C6.1.3恒温水浴锅:4616.1.4天平:感量O.Ig6.1.5pH计6.1.6无菌吸管:Iml(具0.01刻度)、5ml(具0.05刻度)、IOml(具0.1刻度)。6.1.7无菌锥形瓶:容量250ml、500ml6.1.8无菌试管:18200mm6.1.9无菌培养皿:直径90mm6.1.10放大镜6.2培养基和试剂6.2.1平板计数琼脂培养基。6.2.275%乙醇溶液。6.3操作步骤6.3.1样品的稀释6.3.1.1固体和半固体样晶:称取25g样晶置盛有225mL生理盐水的无菌均质杯内,8000r/minI

3、oOoOr/min均质1min2min,或放入盛有225mL稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1min2min,制成1:10的样品匀液。6.3.1.2液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10的样品匀液。6.3.L3用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9mL稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。6.3.1.4按6.3.L3操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一

4、次,换用1次1mL无菌吸管或吸头。6.3.1.5根据对样品污染状况的估计,选择2个3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10倍递增稀释时,吸取1mL样晶匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1mL空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。6.3.1.6及时将15mL20mL冷却至46的平板计数琼脂培养基(可放置于46ClC恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。6.3.2培养6.3.2.1待琼脂凝固后将平板翻转,36C1培养48h+2或55C1培养48h2。6.3.2.2如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层

5、琼脂培养基(约4mL),凝固后翻转平板,按6.3.2.1条件进行培养。6.3.3菌落计数可用肉眼观察,必要时用放大镜,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-formingunits,CFU)表示。6.3.3.1选取菌落数在30CFU300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数,大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。6.3.3.2其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算

6、半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。6.3.3.3当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌落计数。6.3.4结果与报告6.3.4.1菌落总数的计算方法6.3.4.1.1若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每g(mL)样品中菌落总数结果。6.3.4.1.2若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按公式(1)计算:N=C(n1+0.ln2)d(1)式中:N样品中菌落数;EG-平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和;nl第一稀释度(低稀释倍数)平板个数;n2-第二稀释度(高稀释倍数)平板个数

7、;d稀释因子(第一稀释度)。示例:稀释度1:100(第一稀释度)1:1000(第二稀释度)菌落数232,24433,35N=C/(n1+0.ln2)d=(232+244+33+35)/(2+0.12)XlO2=544/0.022=24727上述数据按6.3.4.2.2数字修约后,表示为25000或2.5X10。6.3.4.1.3若所有稀释度的平板上菌落数均大于300CFU,则对稀释度最高的平板进行计数,其他平板可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。6.3.4.1.4若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。6.3.4.1.5若所有

8、稀释度(包括液体样品原液)平板均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数计算。6.3.4.1.6若所有稀释度的平板菌落数均不在30CFU-300CFU之间,其中一部分小于30CFU或大于300CFU时,则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。6.3.4.2菌落总数的报告6.3.4.2.1菌落数小于100CFU时,按“四舍五入”原则修约,以整数报告。6.3.4.2.2菌落数大于或等于100CFU时,第3位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前2位数字,后面用0代替位数;也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。6.3.4.2.3若所有平板上为蔓延菌落而无法计数,则报告菌落蔓延。6.3.4.2.4若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。6. 3.4.2.5称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。7. 0相关文件无8. 0质量记录8.1KJWIF-QA-34成品检测记录8.2KJWTF-QA-33成品微生物检验报告附录A:菌落总数检验程序

展开阅读全文
相关资源
猜你喜欢
相关搜索

当前位置:首页 > 在线阅读 > 生活休闲


备案号:宁ICP备20000045号-1

经营许可证:宁B2-20210002

宁公网安备 64010402000986号