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1、第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,KEY POINTS,The morphology of normal exfoliated cells.The morphology of inflammatory exfoliated cells.The morphology of neoplastic exfoliated cells.The sample collection of exfoliated cells.The smear preparation of exfoliated cells.Commonly used basic stain
2、ing methods of exfoliative cytology.,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,Major Objectives,掌握 各种正常、炎症增生及恶性肿瘤脱落细胞的形态特征。熟悉 脱落细胞的标本采集、涂片制作及常用染色。重点 各种正常、炎症增生及恶性肿瘤脱落细胞的形态特征。难点 各种脱落细胞形态的鉴别。,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,概 述,脱落细胞学（exfoliative cytology）和细针吸取细胞学（fine needle aspiration cytology）属于细胞病理学（cytopathology）的一个分支，是采集人体各部位的
3、细胞，经染色后用显微镜观察其形态，协助临床诊断疾病的一门学科。,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,脱落细胞及细针吸取细胞学最突出的特点是简单易行、安全性强；对设备要求不高、费用低；对患者造成的痛苦少，可反复取材检查；诊断迅速，特别适用于大规模防癌普查和高危人群的随访观察。不足之处是有一定的误诊率，这是由于细胞病理学检查的局限性，只能看到少数细胞，不能全面观察病变组织结构；往往不能确定肿瘤的具体部位；不易对癌细胞做出明确的分型。,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,Brief Contents,第三节 脱落细胞学检验常用染色方法,第一节 脱落细胞学检验基本知识,第二节 标本采集
4、和涂片制作,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,第一节 脱落细胞学检验基本知识,三、肿瘤脱落细胞形态,一、正常脱落细胞形态,二、炎症增生脱落细胞形态,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,一、正常脱落细胞形态,（一）正常脱落的上皮细胞,（二）脱落上皮细胞的退化变性,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,(一)正常脱落的上皮细胞,1复层鳞状上皮细胞,2柱状上皮细胞,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,1.复层鳞状上皮细胞（stratified squamous epithelium）,鳞状上皮:又称复层扁平上皮，主要分布于体表及与外界直接相通的腔肠等部位，如皮肤、口腔
5、、咽、食管、阴道及子宫颈外口。复层鳞状上皮从底部至表面可分为3层，即基底层、中层、表层（见图19-1-1）,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,基底层细胞 分为内底层和外底层内底层细胞 紧贴基底膜，为一层低柱状或立方形细胞。核与胞质比（即核的直径与细胞质幅缘之比，简称核胞质比）为1：0.51；外底层细胞 在内层细胞之上，底层细胞在正常涂片中不易见到，在粘膜炎症、溃疡或糜烂时可见。中层细胞,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,表层细胞角化前细胞不完全角化细胞 细胞核明显缩小，直径为4m，固缩、深染完全角化细胞 细胞核消失，胞质极薄复层鳞状上皮从底层到表层细胞形态的变化规律为：细胞
6、体积由小到大；胞核由小到大，最后消失；核染色质由细致、疏松、均匀到粗糙、紧密、固缩；核胞质比由大到小；胞质量由少到多，胞质染色由暗红色到浅红色。,Figure 19-1 Sketch map of the normal squamous cells 1.internal basal layer 2exernal basal layer 3middle-level cells 4prekeratinocyte 5parakeratosis cell 6Keratinocyte,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,2柱状上皮细胞(columnar epithelium)柱状上皮在组织学上分
7、为复层柱状上皮、假复层纤毛柱状上皮和单层柱状上皮3种常见类型。主要覆盖在胃肠、鼻腔、鼻咽、支气管树、子宫颈管、子宫内膜及输卵管等部位。柱状上皮脱落细胞在涂片中有下列几种：,（1）纤毛柱状上皮细胞（见图19-1-2）(ciliated columnar epithelium cell),（2）粘液柱状上皮细胞（见图19-1-3）(mucus columnar epithelium cell),（3）储备细胞(reseue cells),Figure 19-1-2 The sketch map of the normal ciliated columnar epithelial cells,Fig
8、ure 19-1-3 The sketch map of the normal mucous columnar epithelial cells,分为肿胀性退变和固缩性退变,（二）脱落上皮细胞的退化变性,肿胀性退变（swelling degeneration）,Figure 19-1-4 The sketch map of the swelling degenerative process of cellsUp:Changes of stratified squamous epithelial cellsDown:Changes of columnar epithelial cellsThe
9、arrow means the change of the light swelling degeneration to severe from the normal condition,二、炎症增生脱落细胞形态,炎症脱落上皮细胞一般形态:急性炎症时主要表现为退变和坏死；慢性炎症时主要表现为增生、再生、化生，还有不同程度的退变。,2上皮细胞一般形态鳞状上皮细胞,1上皮细胞增生、再生、化生时脱落细胞形态,上皮细胞的增生、再生和化生,增生（hyperplasia）指细胞分裂增殖能力加强，数目增多，常伴有细胞体积增大。增生的细胞形态特点是：胞核增大，可见核仁；胞质量相对较少，嗜碱性，核胞质比略大；核
10、形态和染色质状态正常，有时形成染色质小结，但仍呈细颗粒状；核分裂活跃，可出现双核或多核。,再生（regeneration）当组织损伤后，由邻近组织的同类细胞增殖补充的过程叫再生。化生（metaplasia）一种成熟的组织在某些因素的作用下，被另一类型的成熟组织所替代的过程称为化生。如子宫颈柱状上皮细胞在慢性炎症时转变为鳞状上皮细胞，这种过程叫鳞状上皮化生，简称鳞化。若鳞化的细胞核增大，形态、大小异常，染色质增粗、深染，表明在化生的同时发生了核异质，称为异型化生或不典型化生。,Figure 19-1-5 Squamous cells with inflammatory degeneration
11、1.outer basal cell 2.superficial cell 3.nucleus hypertrophy（outer basal cells）4.nucleus hypertrophy 5.karyopycnosis(karyopyknosis)6.karyorrhexis 7.nucleus heterogeneity 8.amoebocyte,Figure 19-1-6 Columnar epithelial cells with inflammatory degeneration1.the normal columnar epithelial cell 2.nucleus
12、hypertrophy 3.karyopycnosis(karyopyknosis)4.karyopycnosis(karyopyknosis)and multi-nucleus,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,Figure 19-1-7 The sketch map of metaplasia of false stratified ciliated columnar epithelium1.False ciliated columnar epithelium,a part of superficial columnar cells is necrotic and exfolia
13、ted,but the squamous metaplasia does not occur.2.The proliferation of spare cells,the polyhedral tendency of superficial cells,The formation of the juvenile squamous epithelium(metaplasia of early squamous epithelium).3.Spare cells is going on hyperplasia,superficial cells become polyhedral and comp
14、arative mature squamous epithelium.4.Superficial cells are large polyhedral and of features of mature squamous epithelium(mature squamous metaplasia).,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,核异质和角化不良的脱落细胞,核异质(dyskaryosis)是指细胞的核异常。主要表现为核增大、形态异常、染色质增多、分布不均匀、核膜增厚、核染色较深，胞质尚正常，相当于组织病理学的不典型增生或间变。根据核异质细胞形态改变程度，可分为轻度核异质和重度核异
15、质。轻度核异质 多由慢性炎症细胞刺激而引起，又称炎症核异质。重度核异质 因部分可发展为癌，故又称癌前核异质。应结合临床进行动态观察。异常角化（dyskeratiosis）,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,三、肿瘤脱落细胞形态,（一）恶性肿瘤细胞的一般形态特征,（二）常见癌细胞的形态特征,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,（一）恶性肿瘤细胞的一般形态特征,1恶性肿瘤细胞核异型性表现,2恶性肿瘤细胞与核异质细胞的鉴别（见表 19-1）,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,1恶性肿瘤细胞核异型性表现,核增大 核深染 核畸形 核胞质比失调 染色质分布失调 核仁增大、增多
16、异常核分裂 多核、巨核（瘤巨细胞）裸核以上是恶性肿瘤核的改变，其中以核增大、核深染、核畸形、核胞质比失调及染色质分布不均匀主要特征。,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,2.细胞质的改变,胞质量异常 胞质相对减少，分化程度越低，胞质量越少。染色加深 由于胞质内含蛋白质较多，且着色不均。细胞形态畸形 空泡变性吞噬现象3.细胞群的改变 癌细胞有成团脱落的倾向。成团脱落的癌细胞形态各异、大小不等、排列紊乱、失去极性。鳞癌细胞常分层排列；腺癌细胞常呈巢状，有腺样倾向。,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,Table 19-1-1,癌细胞与核异质细胞的鉴别,第十九章 脱落细胞学检验基本知
17、识和基本技术,（二）常见癌细胞的形态特征,Figure19-1-9 The sketch map of squamous carcinoma cells,adenocarcinoma cells and undifferentiated carcinoma cells 1.Well-differentiated squamous carcinoma cells 2.Poorly-differentiated squamous carcinoma cells 3.Better-differentiated adenocarcinoma cells 4.Poorly-differentiated
18、adenocarcinoma cells 5.small cell undifferentiated carcinoma cells,（二）常见癌细胞的形态特征,1鳞状细胞癌,2腺癌,3未分化癌,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,1鳞状细胞癌,（1）分化较好的鳞癌细胞,1)纤维形分化较好的鳞癌细胞,（2）分化差的鳞癌细胞,2)蝌蚪形分化较好的鳞癌细胞,3)癌珠：即癌性角化珠,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,Figure19-1-10 Well-differentiated fibrous squamous carcinoma cells(Sputum smear)stai
19、ning 400,1)纤维形分化较好的鳞癌细胞,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,Figure19-1-11 Well-differentiated tadpole-shaped squamous carcinoma Cells(Uterine neck)staining 400,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,即癌性角化珠,Figure19-1-12 Cancer pearl cell(Vagina)staining 400,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,Figure19-1-13 Poorly-differentiated squamous carcin
20、oma cells(Lung)staining 400,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,2腺癌,（1）分化较好的腺癌细胞,（2）分化差的腺癌细胞,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,Figure19-1-14 Better-differentiated adenocarcinoma cellsSeveral cells connect to each other,there are some vacuoles in them;and nucleoli and nuclear membranes are clear.(Lung)staining400,第十九章 脱落细胞学检验
21、基本知识和基本技术,Figure19-1-15 Poorly-differentiated adenocarcinoma cells（Uterine neck）staining400,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,3未分化癌,小细胞未分化癌,Figure19-1-16 Small cell undifferentiated carcinoma cells(Lung)staining400,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,鳞癌、腺癌、未分化癌的鉴别要点,鳞癌 腺癌 未分化癌细胞形态 畸形明显，具有多形性 圆形、卵圆形 圆形或卵圆形细胞质 较多、厚实、有角化倾向 较薄、透
22、明、常含空泡，极少 呈淡蓝色核形态 畸形明显 圆形或卵圆形 圆形、卵圆形、带 角的不规则形核染色质 明显增多,深染,呈煤块状 增多不明显，呈粗粒状 分布不均 分布不均核仁 少见，低分化可见 增大而明显 有时可见细胞排列 多单个散在，也可成群 多成群，呈不规则腺腔状 多成群，排列紧 但不紧密，可有癌珠 密紊乱呈镶嵌样 结构,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,小细胞未分化癌细胞与淋巴细胞鉴别,小细胞未分化癌 淋巴细胞核大小 比淋巴细胞大0.51倍 核小，大淋巴细胞略大核大小不一 明显大小不一 大小较不一致核畸形 显著 一般为圆形，退变时可见轻 度畸形核染色 很深，且深浅不一 深染，但深浅
23、一致核排列 有镶嵌现象 核可重叠，无镶嵌状 胞质 量极少，呈裸核状 可有少量淡蓝或淡红色胞质 少数呈裸核状,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,第二节 标本采集和涂片制作,一、标本采集（一）标本来源：自然排出物，体腔抽出液，细针穿刺吸取（二）标本采集方法,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,几种常用的标本采集方法,1.直接采集法 即在肉眼观察下直接采集，如阴道、宫颈、口腔、鼻咽部等部位，采取刮取、吸取或刷取等方式采集标本，对食管、胃、肠道、气管、支气管可借助于内镜在病灶处直接刷取标本。2.液体标本的采集 如尿液、痰液、乳头溢液等可直接留取。3.穿刺吸取法 浆膜腔积液可用穿刺吸取
24、标本；浅表及深部组织器官，如淋巴结、乳腺、甲状腺、肝等则用细针穿刺吸取。4.摩擦法 用特制的器具与病变部位接触摩擦来采集标本。如食管、胃部、鼻咽部等。5.灌洗法 向空腔器官或腹腔、盆腔（剖腹探查时）灌注一定量生理盐水冲洗，使其细胞成分脱落于液体中，收集灌洗液离心制片，作细胞学检查。,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,二、涂片制作,常用的涂片制片方法要求：标本新鲜，操作轻柔，玻片清洁，尽快固定（1）传统制片方法 1.推片法 适用于较稀薄的液体标本，如尿液、浆膜腔积液。2.涂抹法 适用于较粘稠的标本，如食管和宫颈粘液及痰液。3.喷射法 用配有细针头的注射器将标本均匀地喷射在玻片上。此法适
25、用于各种细针吸取的液体标本。4.印片法 将小块病变组织轻轻在玻片上印按一下后拿开。此法为活体组织检查的辅助方法。5.压拉涂片法 6.吸管推片法,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,（2）液基细胞学制片方法 液基薄层细胞检测Liquid-based thin-layer cytology（ThinPrep cytology Test，TCT),第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,涂片的固定,固定（fixation）的目的主要是保持细胞的自然形态，防止细胞自溶和细菌所致腐败；固定能沉淀和凝固细胞内的蛋白质，并能破坏细胞内的溶酶体，从而细胞结构清晰并易于着色，所以固定愈快，标本愈新鲜，细胞结构越清晰，染色效果愈好。1.常用固定液 乙醚乙醇固定法 95%乙醇固定液 2.固定方法 带湿固定 即涂片尚未干燥即行固定。干燥固定 即涂片自然干燥后，再行固定 3.固定时间 一般1530min。,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,第三节 脱落细胞学常用染色方法,染色是利用细胞中各种结构的生化组成不同，对染料的亲和力不同，而显示不同的颜色，使细胞的形态和结构易于辨认。常用染色方法 1.HE染色 此法是是病理学检查常用的方法 2.巴氏染色 3.瑞-吉氏染色,第十九章 脱落细胞学检验基本知识和基本技术,THE END,
