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1、致畸胎试验测定1目的检测消毒剂对妊娠实验动物有无致畸胎性，确定其未观察到发育毒性的剂量。2试剂（1）1/1000茜素红溶液:茜素红0.1g,氢氧化钾10g,加蒸储水IoOOm1。（2）透明液A:甘油200ml,氢氧化钾10g,蒸储水790ml。（3）透明液B:甘油与蒸福水等量混合。（4）固定液（BoUinS液）:苦味酸饱和液75份，甲醛20份，冰醋酸5份。3实验动物试验用大鼠或小鼠（必要时可用家兔）。用大鼠和小鼠试验时,取健康、性成熟、未交配过的体重为20Og250g的大鼠，或体重为25g30g的小鼠。4试验分组至少设4组,其中3个为试验组，1个为阴性对照组。每组至少有15只孕鼠。高剂量组可用
2、雌鼠的11OLD5o作为试验剂量；低剂量组，可用雌性动物的1/100LDso作为试验剂量。其间设中剂量组。阴性对照组以受试物的溶剂代替受试物进行试验。阳性对照组常用阿司匹林（300mgkg体重）、敌枯双（Imgkg体重）或维生素A（40000IU）o对于实验室首次进行的种或品系必需设阳性对照组。为了保证试验方法的可靠性，每隔半年需用阳性对照物检查一次。5操作程序（1）将雌鼠和雄鼠按1:1或2:1的比例同笼饲养。每日晨观察阴栓（或阴道涂片）。查出阴栓或精子的当天定为孕期零天。如5d内未交配，调换雌鼠。查出的孕鼠按上述随机分组，并进行称重和编号。（2）在大、小鼠孕期6d15d期间，每天用灌胃法给予
3、受试物。分别于孕期Od、6d、10d、15d和20d称重孕鼠，并根据体重调整受试物给予量。注意观察并记录孕鼠的毒性反应。（3）大鼠于孕期第20d,小鼠于孕期第18d,用颈椎脱臼法处死。剖腹，取出子宫称重，检查活胎、吸收胎、早期死胎和晚期死胎数。（4）逐个记录活胎鼠的性别、体重、身长和尾长。外观检查头面部、躯干部、四肢等有无畸形，诸如皮下出血、露脑、脑膨出、眼部畸形（无眼或开眼等）、鼻孔扩大、单鼻孔、唇裂、脊柱裂、四肢和尾畸形、肛门闭锁等。（5）每窝取约1/22/3活胎鼠，用眼科镶剥皮。取出内脏（注意勿拉断肋骨），去掉后颈和两肩胛骨之间的脂肪块。将胎鼠放入茜素红溶液染色。当天摇动玻璃瓶2次3次。
4、待骨骼染成红色时为止。将胎鼠换入透明液A中Id2d,换入透明液B中2d3d。待胎鼠骨骼己染红，而软组织的紫红色基本褪去，可换置甘油中。（6）将染好的标本连同甘油一并倒入含水平皿内，在解剖显微镜下，用透射光源，先观察胎鼠全身，然后逐步检查:头骨、胸骨、脊椎骨、肋骨和四肢等有无骨化不全、骨化迟缓和其他缺陷。观察脊椎骨有无缺失、融合、纵裂等畸形；观察胸骨的发育和数目，有无胸骨缺失等；检查肋骨有无融合肋、分叉肋、肋骨中断、缺肋、短肋、波状肋、多肋畸形等；最后检查四肢骨畸形。（7）每窝取约1/31/2活胎鼠浸入固定液2周，作内脏检查。将已固定的胎鼠用水冲净，仰放于石蜡板上。剪去四肢和尾，用刀片在头颈部常
5、规共切4刀，再用剪刀剖开胸、腹腔。着重检查:有无裂舌、双叉舌、裂腭及眼、鼻和脑部的畸形；是否出现右位心、心脏过大、肺过大或过小等畸形；消化系统和泌尿生殖系统各器官的大小、形状以及位置；有无肾盂积水，双侧有无睾丸，以及子宫发育不全等畸形。6评价规定主要观察动物畸胎出现率，同时观察其他指标，如着床数、活胎数、晚期死胎数、早期死亡数，以及活胎体重、身长、尾长等。观察全部结果的剂量-反应关系，确定受试物的母体毒性、发育毒性及致畸性。求出受试物的最小致畸剂量和最大无致畸作用剂量。对致畸强度应以致畸指数表示。致畸指数二（雌鼠LD50）（最小致畸剂量）致畸指数小于或等于10为基本不致畸；大于10至100为致畸；大于100为强致畸。
