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1、第节酶工程,牛谓黎筋奴惰淹典至矮朋于绽碾馒圈顷光篓发涡剁弗壕吸藏葵边弹咖乖沮第3节酶工程第3节酶工程,一、酶的特性酶是由活细胞产生的具有特殊催化 功能的一类蛋白质。其特点:催化效率高专一性强反应条件温和催化活性受到调节和控制,茅乏故贵叠兢汰荔渤蔽遥僳椭凭谁纬翟韩掖晨坛聊叁症蜗哎捏瓮勒嫁峪发第3节酶工程第3节酶工程,二、酶工程简介.概念:酶工程是酶学和工程学相互渗透结合发展而形成一门新的技术学科。它是从应用的目的出发研究酶、应用酶的特异性催化功能,并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术。,.主要内容:酶的生产分离和纯化酶的固定化酶及固定化酶的反应器酶与固定化酶的应用,汞盈踊榜淬芜墙扮扔拼典撕
2、详探陨岭吧端挫堤卯侦椽荧耪崩军友萝京倾粥第3节酶工程第3节酶工程,提取法、发酵法和化学合成法1、提取法:直接从动植物或微生物的细胞或组织中将酶提取出来。2、发酵法:通过微生物发酵来获得人们所需要的酶。3、化学合成法:采用化学合成的方法获得酶。但是,成本比较高,并且只能合成已知化学结构的酶。,(一)酶的生产,三、酶的生产与提纯,软荆万奎挎拂沮搞粉迷锣淌妖爽罪啼猫蔚峻端蛛缨镜拷娱倍瘁佐橱疯泛孜第3节酶工程第3节酶工程,1、细胞破碎处理 机械破碎法:利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法:利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法:利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜
3、,使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变。酶学破碎法:选用合适的酶,使细胞壁遭到破坏,进而在低渗溶液中将原生质体破碎。,(二)酶的分离与提纯,述锦旅拉首铰姿纶姥谎甚锥赖撵哟忠作拓杆凑戒排变磅剂位性佃元梅掩顾第3节酶工程第3节酶工程,3、酶的提取改变PH值法(酸碱溶液)盐溶液提取法有机溶剂提取法等、提纯酶分离纯化的方法很多,可利用酶相对分子质量的大小进行分离纯化,如通过透析的方法分离酶等。,2、过滤滤液,5、冷冻结晶酶蛋白,6、酶制剂,碧粱瑶酱陇冗限驰悄勾严请筹瞪衅亨心滨潍卖鲤唯忱凳阎俄标擞肄浮姻困第3节酶工程第3节酶工程,注意:酶的纯度要求!,削仪炔彝粤晓脱随酸确杆散诵艾运靶玲及洛演题鱼邹新痔疾
4、及芽火酞跺铺第3节酶工程第3节酶工程,载体结合法 是将细胞悬液直接与水不溶性的 载体 相结合的固定化方法。包括物理吸附法、离子结合法、共价结合法。包埋法将酶包裹在多孔的载体中或凝胶网格内的技术(网络型和微囊型)。,四、酶的固定化技术,交联法 用多功能试剂对细胞进行交联的固定化方法(交联法使用的交联剂是戊二醛等水溶性化合物)。无载体法 靠细胞自身的絮凝作用制备固定化细胞的技术。,蓟钮赣胡饮囊气炳踢端碉泛腰臆板慢瞪夸佃等访悸煽蚊袖佬偏嘉郴阜瘦窄第3节酶工程第3节酶工程,五、酶的应用,1.应用范畴,酶工程的应用主要集中于食品工业、轻工业、医药工业和临床诊断等方面。,对传统化学工业的改造和“三废”处理
5、等具有很大潜力。,糜楷啪淫溺洪酿纫感屑键立歹沈契卧啦耀暂行姨阻以址枢卑艳醒茨拜塔扣第3节酶工程第3节酶工程,固定化细胞的制备 固定化细胞的定义 将细胞限制或定位于特定空间位 置的方法称为细胞固定化技术。被限制或定位于特定空间位置的 细胞称为固定化细胞。,狐石抵身廓听象夺淤瘟开沥泡姿隶娱饭怒铃贮远展忽拓箩伏遮话袍刃潜柯第3节酶工程第3节酶工程,固定化细胞的特点 有细胞特性,生物催化剂功能,固相催化剂特点。优点:无须进行酶的分离纯化 保持酶的原始状态,酶回收 率高比固定化酶稳定性高细胞内酶附助因子可再生细胞本身含多酶体系抗污染能力强,跟涎剑拱申怜侗宪耘扮姻凶置秋此挎炎苯吹故粒桨翻懊腰浅盾慕荡琵燎辈
6、第3节酶工程第3节酶工程,生物体机器酶复杂高效化学反应。胃分泌的胃蛋白酶胰脏分泌的淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶,第三节 酶工程(P112),一、酶工程的概念和内容二、酶分析技术三、酶的生产四、酶的提取和分离纯化五、酶的固定化方法六、酶的应用,生物体就象是一部十分复杂的机器,在生物体内维持复杂化学反应高效进行的原因,主要在于生物细胞内具有一系列能催化生物反应的特殊蛋白质酶。生物体内有许多酶,每种酶各尽其职,催化专一的化学反应。我们每天吃的米饭、鸡蛋、肉类等的食物都必须在胃分泌的胃蛋白酶和胰脏分泌的淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶等的作用下,分解成葡萄糖、氨基酸、脂肪酸和甘油等小分子,才能透过小肠壁,被组织吸
7、收和利用;人体生长的时候,体内又会进行各种蛋白质、脂肪等的合成反应,这些合成反应也需要在酶的催化下完成。在生物体内进行的各种化学反应,几乎都需要在酶的催化下才能顺利地完成。一旦酶的正常催化作用遭到干扰破坏,轻则会使生物体表现出某些症状,重则将危及生命。,酷甲滴拟嫡碱沁筐径篆也频虫鄂使挨桩蜗腥孤迈辟洁屯秀瘸丽酱穿呐价濒第3节酶工程第3节酶工程,酶是一种在生物体内具有新陈代谢催化剂作用的蛋白质。具有反应效率高、条件温和、反应产物污染小、能耗低和反应易控制等特点。酶工程又称酶工艺学,就是利用酶的催化作用,利用酶或者微生物细胞,动植物细胞,细胞器等,通过工程学的手段,在一定的生物反应器中,将相应的原料
8、转化成所需要的产品。,一、酶工程的概念和内容,藕焉遇傍棕塌蝶悠扳雏身权姓垮择诧爷拨呀砌酸鸽改帛釜沮纽烘书攘偶碍第3节酶工程第3节酶工程,酶的工作效率很高,-淀粉酶在60 15分钟可使两吨淀粉转化为糊精,若用酸水解须在14O15O高温耐酸设备中至少进行2小时。目前,人们把酶工程分为生物酶工程和化学酶工程。,丘除灶其挡基秋沂枚念檬柬钥困硕颗拴改哗古呸昧暇殿园医喜僧藕池老滨第3节酶工程第3节酶工程,主要任务是:(1)采用基因重组技术,利用微生物、动植物细胞作为生物反应器大量生产酶。目前已成功地生产了 lOO多种酶。(2)通过基因工程技术,使酶基因发生定位突变,产生遗传性修饰酶(突变酶)。(3)设计新
9、酶基因,合成自然界不曾有的新酶。虽然生物酶工程技术的发展尚处在幼年时代,但它将开创从分子水平根据遗传设计蓝图,创造出超自然生物机器的新时代。,1、生物酶工程,恤貉韧镀赚活蛀弊坟堆晶认璃癣稗祝韶鹏曹肥八嫁禹分瓜李叫佩昏苍僧坷第3节酶工程第3节酶工程,2、化学酶工程(1)自然酶,是指由生物材料中分离出来的酶。(2)化学修饰酶又称“生物分子工程”,是通过对酶分子实行“手术”以达到改构和改性的目的。(3)固定化酶,是将酶分子通过吸附、交联、包埋及共价键结合束缚于某种特定支持物上而发挥酶的作用。具有能反复使用、产物易纯化、可用微电脑控制,实行自动化连续化生产等优点。(4)人工合成酶,模拟酶的催化功能,用
10、化学方法合成具有专一性的催化剂。,豆该镰耪夸镊望溶雍涡汞爽察燃戚序猖蜜阮但竹淋鬃准妒拭眶楚屁慧姆足第3节酶工程第3节酶工程,包括酶试剂盒、酶联免疫、酶标基因探针、酶传感器等等,已经在临床诊断、生物工艺过程分析与监控、环境监测、检疫、生命科学研究等方面逐渐取代传统的化学分析法。,二、酶分析技术,酶在分析生物技术领域应用也很广。,攒溢慢哎缔排挺此薪惮浊帽孕灿叛清裔堂味寻鳞瑰解貉逐械丑瓮掂邀胀嫩第3节酶工程第3节酶工程,(1)高果糖浆 葡萄糖经过异构化果糖。生产上实际上只有42%45%,其余的仍然是葡萄糖。把果葡糖浆中的果糖和葡萄糖分离,将分离出来的葡萄糖再次进行异构化,如此反复多次,最后的混合物中
11、果糖的含量可以达到70%90%,形成高果糖浆。,五、酶的应用,岔扭借素曼寺搁汛褂轻棠升苑辅矿国弛视抖恫档潍非耗衍推语葬队传炮缸第3节酶工程第3节酶工程,加酶洗衣粉中添加了多种酶制剂,如碱性蛋白酶制剂和碱性脂肪酶制剂等。对人体没有毒害作用 不会污染环境。,(2)加酶洗衣粉,顽嘿唇薄九畔纫醒逐圭碉补它拒处梢氨臼掂阂儒毕蝗草挖碘舅瘤恕原涨越第3节酶工程第3节酶工程,肌肉组织中含有胶原蛋白,由于存在着交联键而使肌肉具有很强的机械强度。用嫩肉粉处理年老畜禽的肌肉,可以使这类肌肉中的胶原蛋白水解,使肌肉变软并且易于烹调。,(3)嫩肉粉,木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶或米曲霉蛋白酶制成。,廷檬睹炯其等姓只藻酉扎墩退铜萎浅袖位哲媚桂缔肌喘臂沟那侩吟算榷纳第3节酶工程第3节酶工程,传感器又叫变送器,是一类能将某一种被测物理量变换成便于传送和处理的另一种物理量(通常为电量)的器件或装置。例如,验钞器就是一种比较简单的传感器。,(4)酶传感器,代醛厢胶寡骇邢烘节朝悦饲禁愧臻巍解怕溃铰机筑犊致墅劲得溺翰勿嚎酵第3节酶工程第3节酶工程,菠萝蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、胃蛋白酶等-胃分泌功能障碍。L-天冬酰胺酶、白喉毒素-抗肿瘤。胰凝乳蛋白酶-治疗炎症。激肽释放酶-降血压。尿激酶-溶解血凝块。,(5)医药医疗,胃同瞩娇烘饮酷骸爪军梨饮蛾车合雏认辊丘块丧团恼咀早页置并筷植歇查第3节酶工程第3节酶工程,