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1、第11章 葡萄球菌属（Styphylococcus）,广泛存在于自然界，医务人员带菌率70%，是医院内感染的重要来源,生物学性状致病物质与所致疾病微生物学检查防治原则,金黄色葡萄球菌（S.aureus）表皮葡萄球菌（S.epidermidis）腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）,分类,色素、生化反应,表皮葡萄球菌 血琼脂培养显示白色菌落。（血琼脂，18小时，37）,金黄色葡萄球菌 血琼脂培养，与表皮葡萄球菌和其他凝固酶阴性葡萄球菌的苍白菌落对比，金黄色葡萄球菌为典型的金黄或金色菌落。（血琼脂，18小时，37）,第一节 金黄色葡萄球菌（S.aureus）,1 形态与染色 球形，葡萄串

2、状 无鞭毛，无芽胞 致病性葡萄球菌在体内可形成有微荚膜 革兰染色阳性,（一）生物学性状,2 培养特性,易培养 普通平板 血平板 有色素 金黄色 产生溶血 形成溶血环,3 生化反应,分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气触酶阳性（与链球菌区分标准）致病菌分解甘露醇,4 抗原构造,(1)葡萄球菌A蛋白：细胞壁表面蛋白质，完全抗原。(2)荚膜多糖：有利于细菌粘附(3)多糖抗原：存在于细胞壁，有群特异性。,SPA（staphylococcal protein A）的医学意义1、存在于细胞壁的一种表面蛋白，只存在于金黄色葡萄球菌表面。每个菌体表面可有多个SPA分子2、是完全抗原，具有属特异性3、可以与人及

3、多种动物的IgG的Fc段发生非特异性结合，形成复合物4、意义体外：协同凝集试验 体内：抗吞噬、促细胞分裂、导致变态反应、损伤血小板等。,S.aureus,Ab,5 分类,1)噬菌体 群 26型 意义：追踪传染源以及研究菌型与疾病的关系。如：群引起葡萄球菌肠毒素食物中毒 群71型引起表皮剥脱性皮炎2)遗传学：DNA脉冲电泳分型、PCR分型等方法。依16S rRNA不同，葡萄球菌属分48个种和亚种,6 抵抗力,对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌耐盐、耐热、耐干燥对碱性染料（龙胆紫）敏感过去对青霉素、红霉素和庆大霉素敏感易产生耐药性：青霉素类抗生素；但对万古霉素敏感,Methicillin-resi

4、stant S.aureus,MRSA,金黄色葡萄球菌的毒力因子包括：酶；毒素；细菌的一些表面结构蛋白。,（二）致病性与免疫性,1.致病物质,酶 凝固酶 耐热核酸酶 葡萄球菌激酶 透明质酸酶 脂酶-内酰胺酶,凝固酶（coagulase）,概念使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质游离凝固酶 free coagulase结合凝固酶 bound coagulase意义鉴别有无致病性的重要指标致病机理保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏抵抗吞噬细胞的吞噬和消化使感染局限化和形成血栓.,金黄色葡萄球菌产生凝固血浆的凝固酶。将几滴肉汤培养基培养的被测细菌加入用生理盐水稀释的1:4血浆，37孵育2小时。,

5、试管凝固酶试验,凝 固 酶 试 验,对照侧,试验侧,玻片法,其他酶类,耐热核酸酶：水解DNA葡萄球菌激酶：水解纤维蛋白透明质酸酶（扩散因子）：降解透明质酸脂酶：分解脂肪-内酰胺酶：降解-内酰胺类抗生素触酶：分解H2O2,毒素 葡萄球菌溶素 杀白细胞素 肠毒素 表皮剥脱毒素 毒性休克综合征毒素-1,葡萄球菌溶血素（staphylolysin）,损伤细胞膜的毒素（细胞毒素）溶血素意义:（1）有溶血作用；（2）破坏多种组织细胞；（3）引起小血管收缩，导致局部缺血、坏死；（4）使循环系统功能发生紊乱，肌肉组织和肾皮质发生病变。属外毒素，抗原性强，经甲醛处理可制成类毒素。,细胞死亡,运动能力丧失，胞内颗

6、粒排出,攻击中性粒细胞和巨噬细胞,（2）意义：破坏吞噬细胞，增强细菌侵袭力,（1）作用,杀白细胞素（leukocidin）,肠毒素（enterotoxin）,引起急性胃肠炎，即食物中毒特点:耐热，抗胃肠液中蛋白酶超抗原，激活细胞释放大量细胞因子作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒,特点：是一种外毒素，有两个血清型作用：,裂解表皮组织的细胞间桥,表 皮与真皮脱离,烫伤样皮肤综合征,表皮剥脱毒素（exfoliatin）,烫伤样皮肤综合征(staphylococcal scalded skin syndrome,SSSS),毒性休克综合征毒素-1（toxic shock syndro

7、me toxin 1,TSST-1）,引起机体发热，增加对内毒素的敏感性可引起多个器官系统的功能紊乱或毒性休克综合征（TSS）,表面结构或蛋白 如粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖和SPA等,2.所致疾病,侵袭性疾病局部感染 疖、痈、毛囊炎、伤口化脓等各种器官的感染 气管炎、肺炎、中耳炎等全身感染 败血症、脓毒血症毒素性疾病食物中毒烫伤样皮肤综合征毒性休克综合征,麦粒肿（睑腺炎）,痈,脓疱性脓疱病,葡萄球菌引起的典型脓疱,败血症,烫伤样皮肤综合症（TSS）,TSS,人类有一定的天然免疫力感染后能获得一定的免疫力，但不强，难以防止再次感染,（三）免疫性,小猫试验,标本,脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等,分离

8、培养,血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶,直接涂片镜检,革兰阳性葡萄球菌,生长现象,色素，溶血,生化反应,毒素检查,药敏实验,动物实验：对食物中毒患者,（四）微生物学检查法,防,注意消毒隔离,注意个人卫生,防止医源性感染,防止耐药性产生,治,抗菌素药敏试验,自身菌苗疗法,（五）防治原则,第二节 凝固酶阴性葡萄球菌,Coagulase negative staphylococcus,CNS,包括表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、溶血葡萄球菌、木糖葡萄球菌、头状葡萄球菌、沃氏葡萄球菌等30余种。凝固酶阴性葡萄球菌是人体正常菌群成员，在人群、尤其是在医院内人群带菌率高和耐药株比例高，是院内感染的重要成员。,菌

9、血症或败血症尿路感染手术或介入疗法后合并感染心瓣膜修复术、脑脊液分流术、持续性腹膜透析、关节置换术等创伤感染,凝固酶阴性葡萄球菌主要侵犯免疫功能低下者及儿童：,第12章 链球菌属（Streptococcus）,A族链球菌（S.pyogenes）肺炎链球菌（S.pneumoniae）其他链球菌,分类,1 根据溶血现象分类,甲链,丙链,乙链,分类,2 根据抗原分类,分20个族，A族 致病菌(溶血性链球菌或化脓性链球菌）,根据蛋白抗原进一步分类M抗原,荚膜,细胞壁,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,医学常见链球菌,分类 3 根据对氧的需求,需氧性兼性厌氧性厌氧性链球菌,第一节 A族链球菌,1.形

10、态与染色 球形或椭圆形，链状排列，革兰染色阳性（G），无芽胞，无鞭毛，透明质酸的荚膜。,(一)生物学性状,营养要求较高 需加入血液、血清、葡萄糖、氨基酸等；需氧或兼性厌氧 液体培养为沉淀生长 血平板呈灰白色表面光滑小菌落不同菌株溶血不一,2.培养特性,3.生化反应,分解葡萄糖，产酸不产气。不分解菊糖，不被胆汁溶解（鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）。链球菌不产生触酶，与葡萄球菌不同。,分20个群，A群 致病菌(溶血性链球菌或化脓性链球菌）,根据蛋白抗原进一步分类M抗原,荚膜,细胞壁,蛋白质,多糖,肽聚糖,细胞膜,细胞质,核蛋白抗原 或称P抗原多糖抗原 或称C抗原蛋白质抗原 或称表面抗原,4.抗

11、原结构,菌毛样结构,5.抵抗力(不强)对热敏感对一般消毒剂、抗生素均敏感,致病物质,(1)细胞壁成分脂磷壁酸(LTA）M蛋白(2)外毒素致热外毒素链球菌溶血素(SLO,SLS),(3)侵袭性酶透明质酸酶链激酶链道酶,（二）致病性与免疫性,有抗吞噬和抗吞噬细胞内杀菌作用与人类心肌、肾小球基底膜有共同抗原，引起超敏反应性疾病,M蛋白,致热外毒素（pyrogenic exotoxin，SPE）,引起猩红热（scarletfever）红疹毒素，猩红热毒素A群链球菌溶原菌菌株产生,分A、B、C三型作用于下丘脑发热,链球菌溶血素（streptolysin）,SLO：对O2敏感；细胞毒性作用；测定SLO抗体

12、含量，可作为链球菌新近感染指标之一或风湿热及其活动性的辅助诊断。SLS：对O2稳定，溶血环,透明质酸酶,扩散因子分解细胞间质的透明质酸组织中扩散,链激酶（streptokinase；SK）（链球菌溶纤维蛋白酶）链道酶（streptodornase；SD）（链球菌DNA酶）,感染特点：感染病灶与周围界限不清，易于扩散，脓汁稀薄,所致疾病,A群链球菌,淋巴管炎，,猩红热,超敏反应性疾病,化脓性感染,中毒性疾病,蜂窝组织炎,扁桃体炎等,风湿热,急性肾小球肾炎,链球菌毒素休克综合征,颈部淋巴结炎,脓疱病,草莓舌,杨梅舌,猩 红 热 皮 疹,（三）免疫性,可刺激机体产生各种抗体抗M蛋白抗体有保护作用型别

13、间无交叉免疫猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫,（四）微生物学检查法,标本,直接涂片镜检,革兰阳性链球菌,分离培养,脓汁，血液，咽喉拭子,与金葡菌的鉴别,与肺炎链球菌的鉴别,抗原检测：A族链球菌,血清学检查,抗“O”试验（ASO test）：链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，再加入SLO 乳胶试剂，因 病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。原理：中和试验方法：间接凝集结果：效价大于400单位意义：风湿热及其活动性的辅助诊断,Dick试验（Dick test）注射1个皮肤试验量的链球菌红疹毒素于一侧前臂皮

14、内6-24h观察皮肤。1cm 阳性（无免疫力）1cm 阴性（有免疫力）早期结果阳性猩红热的诊断依据,（五）防治原则 积极治疗儿童链球菌感染 选用青霉素G,二 肺炎链球菌S.pneumoniae,形态与染色 革兰染色阳性球菌直径约1m。常呈双排列。菌体成矛头状，宽端相对，尖端向外。形成荚膜无鞭毛，无芽胞,（一）生物学性状,培养及生化反应 需氧或兼性厌氧营养要求较高，在血平板上产生草绿色溶血环（溶血）在固体培养基上形成“脐状”菌落可被胆汁溶解可发酵菊糖,肺炎链球菌在血琼脂平板上的培养特性,抗原结构和与分型,荚膜多糖抗原 84个血清型菌体抗原 C多糖 各菌株共有 M蛋白 型特异抗原抵抗力 较弱，对一

15、般消毒剂敏感 对青霉素、红霉素敏感,致病物质荚膜肺炎球菌溶血素IgA蛋白酶所致疾病大叶性肺炎、支气管炎突然发病，表现为高热、寒战、胸膜剧烈疼痛、咳铁锈色痰,（二）致病性,肺炎链球菌感染后，机体可建立较牢固的型特异性免疫，同型病菌的再次感染少见。,（三）免疫性,（四）微生物学检查法,标本 如痰液、脓液、血液、脑脊液等。直接涂片镜检 分离培养 鉴别试验菊糖发酵试验胆汁溶菌试验Optochin敏感试验动物试验型别鉴定荚膜肿胀试验凝集试验,（五）防治原则,由于肺炎球菌对多种抗生素敏感，早期治疗通常患者可很快恢复。青霉素G为首选治疗药物。注射疫苗（多价肺炎球菌荚膜多糖疫苗）,第三节 其他链球菌（一）甲型

16、溶血性链球菌：也称草绿色链球菌（streptococcus viridians）。因无多糖抗原，故不属于Lancefield血清学分类的任何族。包括5个种，条件致病，可引起下列两种疾病：1.龋齿（dental caries）：常由变异链球菌引起。2.亚急性细菌性心内膜炎（subacute bacterial endocarditis,SBE）由此菌引起的SBE占全部病例50%。,草绿色链球菌在血琼脂平板上的溶血现象（18-24h）,概述,革兰阴性双球菌。无鞭毛。无芽胞。有菌毛。需氧，具有氧化酶和触酶种类脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）干燥奈瑟

17、菌（N.sicca）、浅黄奈瑟菌（N.subflava）、金黄奈瑟菌（N.flavescens）、粘膜奈瑟菌（N.mucosa）等,第13章 奈瑟菌属(Neisseria),第一节 淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）,革兰阴性双球菌 似一对咖啡豆，有菌毛，有荚膜,专性需氧，巧克力（色）血琼脂平板,形态与染色,生化反应,培养特性,分解葡萄糖产酸产生氧化酶和过氧化氢酶,淋病奈瑟菌的培养（巧克力培养基）,奈瑟菌属糖利用试验（葡萄糖，麦芽糖，乳糖，蔗糖，酚红做指示剂）,抗原结构和分类,菌毛蛋白抗原脂寡糖抗原外膜蛋白抗原P：主要外膜蛋白P：与淋球菌吸附易感细胞有关P：阻抑杀菌抗体的活性,抵抗力和耐

18、药性抵抗力弱，在自然界迅速死亡对青霉素等多种抗生素敏感易产生耐药性,菌毛 脂寡糖IgA1蛋白酶,淋病,人类是淋病奈瑟菌的唯一宿主。,主要通过性接触引起泌尿道和生殖系统炎症,新生儿淋菌性结膜炎,新生儿由产道感染,致病物质,所致疾病,（二）致病性,淋菌性结膜炎,人类对淋病奈瑟菌的感染无天然抵抗力免疫力不持久,(三)免疫性,（四）微生物学检查法,标本,用无菌棉拭沾取,直接涂片镜检,在中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌时，有诊断价值,分离培养与鉴定,标本采集后应注意保暖保湿，立即送检接种,子宫颈口表面分泌物,泌尿生殖道脓性分泌物,巧克力色平板，510%二氧化碳,（五）防治原则,防,开展防治性病的知识教育

19、,防止不正当的两性关系,治,抗生素,0.1%利福平或杆菌肽滴眼。,第二节 脑膜炎奈瑟菌 N.meningitidis,G-，0.60.8m肾形或豆形，成双排列，凹面相对；CSF中典型，多位于中性粒细胞内；无鞭毛和芽胞；新分离株具有荚膜和菌毛。,1.形态与染色,（一）生物学性状,脑膜炎奈瑟菌（革兰染色）,2.培养特性与生化反应专性需氧巧克力色培养基37。初分离时需5-10CO2产生自溶酶生化反应不活泼3.抗原构造及分类荚膜多糖抗原：分群依据，13个血清群，A、C重要外膜蛋白：分型依据，20个血清型脂寡糖抗原：主要致病物质4.抵抗力抵抗力弱 对干燥、热力、消毒剂均敏感。室温放置3h即死亡,致病物质

20、菌毛：粘附、定植荚膜：抗吞噬内毒素:主要致病物质。发热，WBC，皮肤粘膜瘀斑，中毒性休克，DIC所致疾病流行性脑脊髓膜炎,（二）致病性,脑膜炎奈瑟菌,鼻咽腔繁殖,繁殖入血,菌/败血症,中枢神经系统,主要侵犯蛛网膜,2 暴发型脑膜炎,微循环衰竭、内毒素休克、DIC,1 普通型 高热、出血性皮疹、脑膜刺激症状,3 慢性败血症型 少数成人病程迁延数日,2 暴发型脑膜炎 内毒素休克、DIC，24h之内死亡,儿童和成人的脑膜炎症状,症状不是同时发生,发热,头痛,关节痛,呕吐,颈项强直,痉挛,嗜睡,畏光,脑 膜 炎 淤 斑,（三）免疫性,体液免疫为主获得抗体患流脑、免疫接种、带菌状态、交叉抗原6个月以内婴儿，母体IgG通过胎盘,（四）微生物学检查法,标本脑脊液、出血淤斑渗出物、血液、鼻咽拭子保湿保温，床边接种，预温培养基涂片镜检分离培养与鉴定选可疑菌落作镜检及生化反应、血清学鉴定快速诊断法对流免疫电泳，SPA协同凝集试验、ELISA等,（五）防治原则,综合性预防措施隔离病人、检查带菌者、预防性投药，室内通风流脑疫苗：6个月-2岁接种两次，间隔1月A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗青霉素、红霉素、磺胺大剂量治疗,脑膜炎预防接种,