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1、检验技术职称考试浓缩笔记RBC计数液中硫酸钠用于提高相对比密防止粘连，氯化高汞是防腐剂。HiCN法的缺点：KCN有毒，HbCo转化慢，高白血球和高球蛋白易混浊。试验后处理应加入（先用水稀释，再用次氯酸钠混匀敞开放置15小时使CN氧化为N2和C02或C03和NH4o遗传性球形红细胞增多症的小细胞中生理性中心淡染区消失。碱性点彩红细胞多见于铅锄汞中毒，是铅中毒的筛选指标。卡波氏环是胞质中脂蛋白变性所致，常与染色体小体同在，见于巨幼红和铅中毒。1.FR,MFR,HMR分别是低，中，高荧光率。良性肿瘤ESR多正常，恶性肿瘤ESR多增加，低色素性贫血，遗传性球形红细胞增多症，镰状贫血时ESR减低。杆状核
2、过5%或有幼稚细胞为核左移，中性粒分叶5叶以上超3%为核右移。钩虫病E细胞可达90%以上。E细胞白血病时亦可，但以幼稚为主。E计中乙醇或丙酮是保护E细胞而破坏其它，伊红或石楠红是使E着色,一小时内计数。中性粒细胞毒性变化有：中毒颗粒，空泡，DoIeS小体，退行性变。异形淋巴细胞多为T淋，分空泡，不规则，幼稚三型。淋巴细胞有卫星核，即微核，是射线损伤后较为特殊的形态。白血病时血小板（MPV）增高是骨髓恢复的第一征兆。ABO遗传基因位于第9号染色体长臂三区四带，脑脊液中无血型物质，抗A与抗B主要是IgM,0型血中以IgG为主。新生儿不宜做反向定型。新生儿溶血的直接实验依据：红细胞直接抗人球蛋白阳性
3、。HLA分型的方法主要有：1淋巴细胞毒试验，一类抗原用T或外周淋，二类抗原用Bo2混合淋巴细胞培养试验3HLA基因分析。强直性脊椎炎有91%带有B27抗原而正常人只有6%o血液保存液有：1,ACD（A枸椽酸C枸椽酸三钠D葡萄糖）2,CPD（C枸椽酸三钠P磷酸盐D葡萄糖腺喋吟枸椽酸）。枸椽酸是防止葡萄糖在消毒中焦化，腺喋吟促进ATP合成延长红细胞寿命，磷酸盐提高PH。输粒细胞时用ABO和Rh血型相同的血液,一般BPC小于二万时可输血。糖尿病酮症：烂苹果味，泌尿系感染和膀胱癌：腐败臭味，苯丙酮尿症:老鼠屎味。尿液渗透浓度（OSM）是检查尿中可渗透溶质各质点实际浓度的一种指标，与粒子大小及电荷无关，
4、主要取决于小分子物质的浓度，是评价肾浓缩功能的良好指标。晨尿比密不过1.018,或差值在0.001-0.002间，或恒定在LolO时说明肾浓缩功能已完。低血钾碱中毒尿酸性高，高血钾酸中毒呈碱性尿，变形杆菌感染呈碱性,肾小管性酸中毒时尿PH值不低于6o本周氏蛋白多见于多发性骨髓瘤，尿肌红蛋白多见于骨骼肌严重创伤大面积心梗。选择性蛋白尿指数（SPI）即测定尿及血中IgG或白蛋白的比值来求得，大于0.2为选择性差，小于0.1为选择性好,尿中白蛋白/球蛋白大于5时为选择性蛋白尿。80%饱和硫酸铁可沉淀其它蛋白而不能沉淀肌红蛋白可用来签别。管型的基质蛋白为Tamm-HorSaII蛋白。肾静脉血栓形成时红
5、细胞管型可能是唯一的表现。尿PH（甲基红或溟麝香草酚），尿比密（多聚电解质：甲乙烯酸马来酎），尿蛋白（澳酚蓝），尿糖（色原：碘化钾，邻甲联苯胺），尿酮体（亚硝基铁氟化钠），尿胆红素（2,4二氯苯胺重氮盐），尿胆原（二甲氨基甲醛）尿亚硝酸盐（对氨基苯碎酸和1234四羟基对苯喋咻3酚）尿白细胞（口引口朵酚酯）尿血红蛋白（过氧化氢茴香素或过氧化氢烯钻和色原）尿维C（中性红,缓冲剂，二氯酚靛酚钠）。产后九天或人流25天后HCG恢复正常，产后四天人流十三天后HCG应小于1000,男性尿中HCG增高要考虑睾丸肿瘤。镜检粪便中脂肪小滴大于6个/HP视为脂肪排泄过多。正常粪便中G+球菌与G-杆菌比值约1：IO
6、0隐把子虫是AIDS和儿童腹泄重要病原诊断要查到卵囊。正常空腹十二小时后胃液残余量为50MLo脑脊液抽取时：第一管：作细菌学检查，第二管：作生化免疫学检查，第三管：作细胞计数。单纯疱疹脑炎时脑脊液中淋巴样细胞中可发现胞质内包涵体。粒细胞淋巴细胞浆细胞同时存在是结核性脑膜炎的特点。蛋白一细胞分离现象（FrOin综合症）是蛛网膜下腔梗阻所致梗阻脑脊液的特征。髓鞘碱性蛋白（MBP）增高见于多发性硬化症。神经性梅毒检查首选试验是密螺旋体荧光抗体吸收试验（FTAABC）O浆膜积液常规及细胞学用EDTA抗凝，生化用肝素，一管不加抗凝用于观察有无凝固。漏出液以淋，间皮细胞为主，渗出液以中粒，淋，嗜酸性为多。
7、如见到纤毛柱状上皮和尘细胞可确认为痰液标本。夏科一雷登结晶常与EC,库施曼螺旋体共存，见于支哮喘和肺吸虫。原粒胞质少，透明天兰色，无颗粒，早幼胞质多含紫红色非特异性的天青胺兰颗粒。原红边际有钝状或瘤状突起，有核周淡染区，网织红内含嗜碱性物质,单核进入组织内形成巨噬细胞。正常骨髓片中原巨核为0,一张血片中可见巨核细胞为7-35个。正常过氧化物酶染色原粒阴性，嗜碱阴性，嗜酸阳性最强，单核只有幼单和单核呈弱阳性反应，其它除吞噬细胞有阳性外都是阴性反应，异常时急粒原粒阳性。过碘酸雪夫氏反应：巨核和血小板+为红色斑块，霍奇金+/，戈谢+,尼曼一皮克：+/且空泡中心为阴性反应，腺癌+。碱性磷酸酶染色除成熟
8、中性粒和巨噬外其它都是阴性，积分值（NAP）指100个中性粒中阳性比例，参考以一个加号为基准，参考值是751。慢粒的NAP积分值常为零，类白血病时NAP显著升高。酸性磷酸酶染色：戈谢氏+,尼克一皮克一，多毛细胞白血病+。铁染色可作为诊断缺铁贫和指导铁剂的临床，铁粒幼贫血时多有环铁粒红细胞，其中难治性贫血占15%以上。2P35表示2号染色体短臂3区5带，人类染色体在有丝分裂中期基本特征最典型清晰。核型：指用显微摄影的方法得到的单个细胞中所有染色体的形态特点和数目，它代表该个体的一切细胞的染色体组成。其核型中符号代表的意义：t：易位，inv：倒位，iso：等臂染色体，ins：插入，-：丢失，+：增
9、加，P：短臂，q：长臂，接下第一括号内是累及染色体的号数，第二括号内是累及染色体的区带。畸变分数目和结构，原发和继发。培养的羊水细胞有三种形态：上皮，成纤维，羊水。特异性染色体有:慢粒时的Ph染色体：，急早幼粒：t(15;17)(q22;q21),BUrkitt淋巴瘤：t(8;14)(q24;q32)。贫血时：极重度：30G/L,重度：3060,中度：6090,轻度：90120o血浆游离蛋白40MG/L,管内溶血时上升。血清结合珠蛋白(HP)：0.82o7G/L增高见于妊娠，慢感，恶性肿瘤，减低见于溶血，肝病，巨幼贫等。AGLT50:指酸化甘油溶血试验中溶血率按光密度减至50%所需的时间来计算
10、.蔗糖溶血试验为PHN简易重要试验(+),酸化血清溶血试验是PHN的确正试验.抗碱血红蛋白测定又称碱变性试验,胎儿血红蛋白(HBF)具有抗碱和抗酸作用.总铁结合力与血清铁的临床意义基本相反:缺铁则总铁结合力增高,肝脏肾脏疾病时血清铁有可能升高.血清铁/总铁结合力*100%=转铁蛋白包和度(2055%),临床缺铁分三期:缺铁期,缺铁性红细胞生成期,缺铁性贫血期.红细胞既有低色素又有正色素为“双形性”,是缺铁粒幼细胞贫血的特征,且环形铁粒幼占15%以上.急性白血病:某一原始细胞大于30%预后小于六个月.慢性白血病:某一系白细胞增多接近成熟为主,原始细胞不过10%.中国急性白血病分型:Ml,原始粒细
11、胞白血病未分化型,原粒大于或等于90%,早幼粒少,中幼以下阶段不见或少见,POX,SBC(+)的原粒大于3%.M2,原始粒细胞白血病部分分化型,有M2a,M2b两型,M2a中原粒大于30%小于90%,单核小于20%,早幼粒以下阶段大于10%,M2b以异常的中性中幼粒增生为主大于30%,有Phi小体存在.M3急性早幼粒细胞白血病,心颗粒增多的异常早幼粒细胞增生为主,大于30%可见束状Aner小体,依颗粒可分M3a,M3b,M4,粒一单核细胞白血病,按粒单比例可分M4a,M4b,M4c,M4e(嗜酸性细胞5-3%),M5,单核细胞白血病,以分化程度分M5A,未分化型,原单大于或等于80%M5B,部
12、分分化型,M6红白血病,红系大于或等于50%,红系PAS阳性,原粒大于30%异常幼红细胞大于10%时也可诊断.M7,巨核细胞白血病原巨核大于30%.CD:即细胞表面分化抗原.CD7,CyCD3同属检测T一急淋的最敏感指标,但只表达CD7+不能诊断,CD25是激活T,B细胞的标记,Smlg（细胞膜表面免疫球蛋白）和EM（小鼠红细胞受体）是B细胞成熟的特征性标志,CD19反应谱广,是鉴别全B系的敏感而又特异的标记CDlO,为诊断Common-ALL的必需标记,CyCD22用于检测早期B细胞来源的急性白血病是相当特异和敏感的,CD14,为单核细胞特有,抗髓过氧化物酶（MPo）为髓系特有,CD34为造
13、血干细胞标记,CD38为造血祖细胞标志,CD41a,CD41b,CD61,血小板过氧化物酶（PPO）为巨核系特有,CyIg+,PC1+,PCA+是浆细胞的胞质特点.急淋可分为:L1,L2,L3三型,AMLl基因重排可作为本病基因诊断的标志.浆细胞白血病：WBC高BPC少血片中浆细胞多至20%以上骨髓增生活跃，糖原与核糖核酸染色均阳性。多毛细胞白血病：全血细胞少，多毛细胞的特征：胞体大小不一直径为10-20微米（似大淋）毛发突出的特点是边缘不整齐有许多不规则纤绒突起,活体染色时优。约有4860%病例呈干抽，POX,NAP,SB染色阴性ACP阳性。骨髓增生异常（MDS）：贫血BPC,WBC少。有异
14、形粒细胞（PelgerbUet样变），可有大而畸形的火焰血小板。非霍奇金淋巴瘤的组织病理：淋巴细胞型，组织细胞型（网状细胞肉瘤），混合细胞型，未分化型。玫瑰花结试验：绵羊阳为T淋，小鼠和EAC阳为B淋。多发性骨髓瘤：单一浆细胞增生，红细胞常呈“缗前状”，早期骨髓呈灶性分布，异常浆细胞一般510%。尿中可有浆细胞和B-J蛋白（除不分沁型），CA高P和ALP正常或高，可伴尿毒症，免疫电泳有“M”成份：70%IgG,2327%IGA,IgD少，IgE罕见。血小板上有钠泵和钙泵。细胞器主要有：A颗粒，致密颗粒，溶酶体颗粒。TXA2是腺昔酸环化酶的重要抑制剂促进血管收缩。血小板功能：黏附，聚集，释放，促
15、凝，收缩，维护内皮完整性。血小板糖蛋白测定：GPIB缺乏见于巨大血小板综合征，GPIIB/I1IA缺乏见于血小板无力症。依赖维生素K凝血因子：FII,FVII,FIX,FXo接触凝血因子：FXII,FXI,PK（激肽释放酶原）。对凝血酶敏感的凝血因子：FI,FV,FVIII,FXIIlo内源途径指FXII被激活到FIXA-VIIIA-CA-PF3o夕卜源途径指从TF到Tf-FVIIA-CAoPTll秒到14秒，过3秒异常。PTR（凝血酶原比值，受检值/正常对照），INR（国际标准化比值）：要先求ISI（国际敏感指数）：所用组织凝血活酶与ISl已知的国际参比品相比较的值。ISl=已知ISI*斜率
16、。ISl值低，试剂敏感度高。INR=PTRlSIo血友病是VllLIX,XI因子异变。DIC时，优球蛋白溶解时间（ELT）常缩短小于70分，血浆鱼精蛋白副凝固试验（3P）在DlC失代偿时为阳性，血清FDP高大于40mgl,是DlC诊断中最敏感指标之一。ATTP是监测普通肝素的首选指标。PT是监测口服抗凝剂的首选指标。生化学：糖酵解：葡萄糖至乳糖。葡萄糖一葡萄糖6磷酸（已糖激酶，不可逆，1ATP）-果糖6磷酸（磷酸已糖异构酶）一1,6果糖二磷酸（6磷酸果糖激酶，最重要点，不可逆，IATP）-磷酸丙糖（醛缩酶，可逆）一3磷酸甘油醛一磷酸烯醇式丙酮酸一（经丙酮酸激酶）-烯醇式丙酮酸和ATP（不可逆）
17、。可生成2分子ATPo糖有氧氧化：糖酵解产物NADH进入线粒体一丙酮酸经其脱氢酶复合体氧化脱竣一乙酰CoA（关键不可逆）是进入三竣酸循环的开端（特点：柠檬酸合成A-酮成二酸为不可逆，故三竣亦不可逆，无净分解也无净合成，氧化乙酰COA的效率取决于草酰乙酸的浓度，限速步骤是异柠檬酸脱氢酶，是变构酶ADP是激活剂，ATP和NADH是其抑制剂。可生成36或38ATP。糖异生：非糖物质转为葡萄糖。肝脏，是体内单糖生物合成唯一途径，有四个关键酶：葡萄糖6磷酸酶,果糖1,6二磷酸酶，丙酮酸竣化酶，磷酸烯醇式丙酮酸激酶。血糖受神经，激素，器官调节。升高血糖：胰高血糖素，糖皮质激素，生长激素,肾上腺素。降低血糖
18、：胰岛素（B细胞分泌，其靶细胞受体是酪氨酸特异蛋白激酶,糖尿病分型：1型：内生胰岛素或C肽缺，易出酮症酸中毒，高钾血症，多发于青年人。2型：多肥胖，具有较大遗传性，病因有生物活性低，基因突变，分泌功能障碍。3特异型4妊娠期糖尿病。1.PL（脂蛋白脂肪酶）活性依赖胰/胰高比值。慢性糖尿病人可有：A晶体蛋白糖基化而白内障，并发血管病变以心脑肾最重。糖尿病急性代谢合并症有：酮症酸中毒（DKA,高血糖，高酮血症，代谢性酸中毒），高血粮高渗性糖尿病昏迷（NHHDC肾功能损害，脑血组织供血不足），乳酸酸中毒（LA）o血浆渗透压=2(NA+K)+血糖浓度。静脉血糖毛细血管血糖动脉血糖。不能立即检查应加含氟化
19、钠的抗凝剂。肾糖阈：8.829.920了解肾糖阈的方法：六点空腹取血，尿，餐后七点，八点再取血，尿分别测血糖，尿糖。如果三次血糖都小于8.82而测出血糖，说明肾糖阈低，如果都大于11.02而无尿糖，则高。糖耐量试验：禁食10-16,5分钟内250毫升75克葡萄糖水每30分钟取血一次。糖化蛋白与糖尿病血管合并症有正相关。糖化Hb:可分为HbAIA,HbAIB,HbAIC(能与葡萄糖结合)，测定时主要测HbAl组份或HbAlC(4%-6%),反映前8周水平，主要用于评定控制程度和判断预后。糖化血清蛋白：类似果糖胺，23周，用硝基四氮哇篮法或酮胺氧化酶法，C肽的测定可以更好地反映B细胞生成和分泌胰岛
20、素的能力。乳酸测定时加入L.谷氨酸使之与丙酮酸反应随时除去反应产物使反应向右。血糖恒定主要是保证中枢神经供能(脑细胞用能完全来自糖)。血糖降低反应的阈值是：4.6o低血糖症状是指脑缺糖和交感神经兴奋。胰岛B细胞瘤临床特点：空腹或餐后45发作，脑缺糖比交感神经兴奋明显，有嗜睡或昏迷，30%自身进食可缓解故多肥胖。糖分解代谢异常：丙酮酸激酶(PK)缺乏病，丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症，磷酸果糖代谢异常。血脂由中性脂肪和类脂。电泳图：乳糜微粒，B.脂蛋白，前B脂蛋白，A.脂蛋白。超速离心法：乳糜微粒(APOB48),VLDL,IDL,LDL,LP（八）,HDL(密度从小到大，分子从大到小)。CM90%含
21、TG,VLDL中TG占一半以上，IDL(胆固醇含量最高)中载脂蛋白以APOBlOo为主，LP（八）由一分子的APOBlOO和APo（八）以单个双硫键相连，与纤溶酶原有同源性，可作为动脉硬化性心血管疾病独立危险因素指标，直接在肝中产生。HDL(apoal和叩oa4)中脂质和蛋白质各占一半。肝脏是载脂蛋白合成部位。脂蛋白受体是位于细胞膜上能与脂蛋白结合的蛋白质。1.DL受体：APOB/E受体，VLDL受体：肝中未发现，APOE受体：仅存于肝细胞表面。肝素引起LPL酶释放入血称为肝素后现象,APOC11是激活剂,APOCW是抑制剂。1.CAT（卵磷脂胆固醇酰基转移酶）最优底物是新生的HDL。HDL的
22、代谢是胆固醇逆转运途径。1.DL是血液中主要携带胆固醇的脂蛋白。胆固醇是胆汁酸唯一前体和所有类固醇激素包括性激素和肾上腺素的前体。1.DL是冠心病的危险因素，是血脂异常防治的首要靶标。高TG血症中，小而密的LDL（B型）增高，则APOB（是动脉粥样硬化标志物）多CHoL少，出现LDL-C不高而血清APOB高的“高APOB脂蛋白血症”。前白蛋白：5.4（分子量）/4.7（等电点），运载维生素A。白蛋白：6.64/4-5.8内源性氨基酸营养源，酸碱缓冲能力，载体，维持血浆胶体渗透压。AL酸性糖蛋白：4.0/2.7-4包括等分子的已糖，已糖胺，唾液酸。Al-抗胰蛋白酶5.5/4.8。血红素结合蛋白：
23、5.7/两对肽链（A和B）A2B2四聚体。A2.巨球蛋白：80/5.4分子量最大。铜兰蛋白：16/4.4糖蛋白，单链，有氧化酶活性，协助诊断“肝豆状核变性”。B2微球蛋白：1.18存在于有核细胞表面，特别是淋和肿。CPR：12/6.2o醋酸纤维素薄膜及聚丙稀酰胺凝胶电泳最常用。蛋白电泳后正极起：白蛋白，Al,A2,B,R.球蛋白。肝硬化时出现B和R难以分开而连在一起叫：BR桥，是由于肝纤维化导致IGA增高所致。疾病急性相时，前白蛋白，白蛋白，转铁蛋白相应低下。CK和GGT都是男性高于女性，且酒后GGT升高明显。酶释放的速度与其分子量成反比（可分析各种酶在病理时进入血液的先后）。酶活性监测方法有
24、：分光，旋光，荧光，电化学，化学法，核素测定，量热法。用免疫法测酶的优点是灵敏度和特异性高。酶反应动力学中所指速度就是反应的初速度。KM值只与酶性质有关，与浓度无关，最小KM值的底物叫最适底物或天然底物。1.D,ALP在融冻时被破坏，LD在低温反不如室温稳定的现象为“冷变性”。在实验规定的条件下（温度，最适PH,最适底物物浓度时），在一分钟内催化IUMoL底物发生反应的所需的酶量作为1个酶活力国际单位。同工酶的差异是由其结构不同造成的。CK-MM的亚型有：MMl,MM2,MM3。CK-MB的亚型：MBl,MB20CK含量和肌肉运动相关，其量与肌肉总量有关。甲亢，久卧床病人总CK（主要CKMM）
25、可下降。1.D含量：LD2（H3M）LDl（H4主要在心，RBC）LD3（H2M2,肺脾）LD4（H3M）LD5（M4横纹肌，肝）。AST的同工酶：细胞质内：C-AST线粒体内：M-AST0NADH被氧化为NAD,可在340nM处连续监测吸光度下降速度。重症肝炎由于大量肝细胞死亡，血中ALT可仅轻度升高，临终时明显下降，但胆红素却进行性升高叫：酶胆分离。405NM处吸光度增高（可测ALP,GGT等）。双甘肽是谷氨氨酰基的受体。GGT含量以肾脏最高其次是前列腺，胰，肝，脑。代谢内生水约300ML,水的出入量调节在下丘脑,NA=HCO3+CL+12（10）mmolL,渗透压（756760KPA）中
26、摩尔渗量：294-296mOSML,根据钾钠糖尿素的浓度可计算血浆晶体渗透压，阴离子隙（AG）即钾钠与HCO3,CL的差值，总阳减总阴。升高多见于：肾功不全的氮质血症或尿毒症引起的磷酸盐硫酸盐储留，乳酸堆积，酮体堆积。调控钠排出：球一管平衡，肾素-血管紧张素-醛固酮系统，抗利尿，糖皮质，甲状腺（旁腺），心钠素。调节钾：醛固酮（潴钠排钾），糖皮质。水过多：高渗性（盐中毒）等渗性（水肿）低渗性（水中毒）。钠浓度是血浆渗透浓度的决定因素。低钠有肾性和非肾性，高钠见于：水摄入少，排水多，钠潴留。不论血钾水平如何，钾的浓度与细胞外液中HC03直接有关而与PH的变化关系不大。火焰光度法是一种发射光谱分析法
27、。内标法是标本及标准液采用加进相同浓度的内部元素进行测定。冠触指复环王冠化合物。离子选择电极法（ISE）敏感膜将离子活度换成电信号。血气分析有：PH,P02,PC02,HCO3oHCO3与H2CO3的比值维持酸碱平衡。PH=PK+log（A-/HA）简称H-H方程。血中HbO2量与Hb总量之比为血氧饱和度。其达50%时PO50（3.54KA）。集合管不包含在肾单位中。肾小球滤过膜分：内皮细胞，基底膜，上皮细胞三层。近曲小管是重吸收的重要部位。自身调节是指肾血流量及肾小球滤过率基本保持不变。肾神经调节主要是对肾入球小动脉作用致肾小球滤过率下降。球管反馈(TGF)是对更远端的肾小管作更精细调节。其
28、中最主要的是抗利尿激素和醛固酮。与日增加的血尿素氮和血肌酎升高是急性肾功能衰竭的可靠依据，分少尿期，多尿期，恢复期。慢性肾衰多不可逆，分肾贮备能力丧失期，氮质血症期，肾功能衰竭期,尿毒症期。单位时间内两肾生成的滤过液量为肾小球滤过率。肾小球清除率：GFR=VP*U,内生肌酎清除率：CCr=U*PV(mlmin),小于30为重度，20为肾衰，10为终末肾衰，8050为肾功能不全代偿期，5020为失代偿期。血清B2微球蛋白(小于2.5mgL):与血清肌酎有正相关，测定对氨基马尿酸(PAH)清除率和碘锐特清除率均可反映肾血流量，放射性核素肾图能比较敏感地反映肾血浆流量。远端肾单位功能试验有：浓缩一稀
29、释试验，尿渗量测定，渗透溶质清除率，自由水清除率等。渗量测定常采用冰点下降法，尿渗量：600100OmoSmZkg血浆渗量：275305mosmkg它们的比值反映重吸收后形成的尿液中溶质的浓缩倍数，急性肾小管坏死20mmoll肾衰时1.2,Na20mmoll。早期肾损伤的检测项目可大致分：肾小球标记，肾小管标记，肾组织蛋白/相关抗原。微量白蛋白（mAlb）：尿中排出量为30300mg24h内，：是糖尿病诱发肾小球微血管病变最早期的客观指标之一，是高血压性肾损伤的早期标志。尿转铁蛋白（UTf）是679个氨基酸构成的糖蛋白，是反映肾小球滤膜损伤的灵敏指标。选择性指数（SIP）：即测定IGG清除率与
30、转铁蛋白清除率的比值，低分子量蛋白（LMWP）中A1一微球蛋白和尿B2一微球蛋白（99个氨基的多肽,不含糖）是肾小管一间质性肾病的早期标志。尿酶：分溶酶体酶和刷状缘酶二类，常测NAG和AAP。胰液中的碳酸氢盐主要是中和胃酸和激活消化酶。胰淀粉酶属A淀粉酶，PH6.9是唯一在正常时尿中的血浆酶，与胰腺提纯物区带相同为P一同工酶，与唾液腺提纯物相同为S一同工酶。新生儿主要是S一同工酶，一岁以内测不出P一同工酶。发病后212H升高，1272H达峰，34天后正常。测定时限定性底物一般有47葡萄糖（庚糖等），很多阴离子有激活淀粉酶的作用（CL,Br最强）。淀粉酶清除率与肌酎清除率比值在25%（Cam/C
31、cr）,降低见于巨淀粉酶血症者。血清脂肪酶在急性胰腺炎时4-8H内升24H达峰，持续8-14天，但腮腺炎和巨淀粉酶血症时不升高。现用的尿胰蛋白酶原一2的试纸定性方法是基于免疫层析的原理。激素（已知150多）可分：含氮类（多溶于水），类固醇类（要特殊蛋白结合）。主要受：下丘脑一垂体一内分泌腺一激素系统调节。一般用EDTA抗凝。GraVeS病：甲状腺性甲亢，TT3是它早期疗效观察及停药后复发的敏感指标，TRH试验中TSH不升高，TSAB阳性达80%-100%。甲减时严重可出现黏液水肿。目前认为联合进行FT3,FT4,和超TSH测定是甲状腺功能评估的首选方案和第一指标。TT4是判定甲状腺功能最基本的
32、筛选试验。TSH不受TBG浓度影响，是反应下丘脑一垂体一甲状腺轴功能的敏感试验，尤其是对亚临床型甲亢和亚临床型甲减的诊断。肾上腺髓质（嗜铭细胞瘤最好发部位）是节后神经元转化为内分泌细胞（嗜倍细胞），能合成，释放肾上腺素（E）,去甲肾上腺素（NE）,多巴胺（DA）,结构上均为儿茶酚胺类，血液及尿中的肾上腺素几全为肾上腺髓质分泌，尿香草扁桃酸（VMA）是儿茶酚胺的代谢产物测定时芬氟拉明可致假阴性。胰升糖素激发试验禁用于糖尿病人。肾上腺皮质分（由外向内）：球状带（盐皮质激素一醛固酮），束状带（糖皮质激素一皮质醇及少量皮质酮，是机体应激反应时的主要激素），网状带（雄激素和少量雌激素）。皮质醇增多最多见
33、是垂体促肾上腺皮质激素（ACTH,呈脉冲式分泌，上午8时至10时最高，夜为上午的二分之一）分泌亢进引起的库欣病。库欣综合症的病理特点：脂肪代谢障碍（面部和躯干部脂肪堆积，向心性肥胖），蛋白质代谢障碍（处氮负平衡，蛋白消耗过多），糖异生加强，电解质紊乱。原发性肾上腺皮质功能减退（AddiSOn病）：醛固醇（人体主要的储盐激素）缺乏，糖异生减弱，肾排水减弱，出现皮肤色素沉着。尿17羟皮质类固醇（17OHCS）：多用传统的POrter-Silber法测，男1133,女825,用浓盐酸防腐。尿17酮类固醇（17KS）：男3469,女1752,采用Zimmerman法测。当肾上腺癌或不伴库欣综合症时KS
34、比OHCS增高更高，而肾上腺瘤却倾向于降低或正常。血游离皮质醇和尿游离皮质醇呈正相关，是检查肾上腺皮质功能紊乱的首选项目。肾素由肾小球旁器分泌，是人体最强的升压物质也是让肾上腺释放醛固醇的主要刺激物。垂体激素均为多肽或糖蛋白，TSH,LH,FSH均由A,B两个多肽亚基组成。生长激素（缺乏得垂体性侏儒症，GH）的促生长作用必须通过生长调节素（SM）的介导作用。SM-C及SM结合蛋白测定因其不跟GH的分泌而波动，故单次即可了解GH功能状况。催乳素瘤是功能性垂体腺瘤中最常见的，好发于女性。所有性激素都是类固醇。睾酮代谢物为雄酮是17-KS的主要来源，雌二醇（生物活性最强的天然雌激素，女性早熟指标）和
35、雌酮代谢物是雌三醇，孕酮（确证排卵）代谢物是孕烷二醇（黄体功能指标）。测定早晨的睾酮（男青春期10-20,成年期：300-1000）水平可以对男性睾酮水平下降作出最好评价。GNRH兴奋试验主要检测腺垂体促性腺的贮备功能状况。可以引起性功能紊乱的性激素合成酶有：C-17,20裂链酶，17B羟类固醇脱氢酶，5A还原酶。尿游离皮质醇无昼夜变化故可靠反映游离皮质醇水平。内标法只适用于双通道型原子吸收分光光度计。聚丙烯酰胺电泳普遍用于分离蛋白质及较小分子核酸。琼脂糖电泳适用于分离同工酶及其亚型，大分子核酸。等电聚焦电泳适合分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组份，分辨率最好。离心力（FC）=M（质量）（角
36、度）2X（离轴心距离），相对离心力（RCF）=L118*105*N（转数）*X。密度梯度离心法：1速率区带离心法：离心后近轴处密度小，一般用于分离大小相异而密度相同的物质。2等密度区带离心法：当管底介质的密度大于粒子的密度时，粒子上浮,用于分离大小相似而密度差异大。凝胶层析常用的是SephadexG系列主要用于脱盐分离提纯高分子物质。离子交换层析主要用于分离氨基酸多肽蛋白质也可是核酸等。亲和层析可用于纯化生物大分子，稀释液的浓缩不稳定蛋白的贮藏分离核酸。聚焦层析常用凝胶是Monop多元缓冲交换剂是PBEoK值过高线性宽但重复性差，过低精密度好但线性差。酶偶联法已是是广泛最频繁的酶测定法，主要用
37、30和37,它有明显的延滞期，最好条件是酶反应为限速度，动力学上为零级反应而指示酶是一级反应。Qlo值即温度增加10度化学速度的变化率，约在1.52.5。免疫学：免疫防御（对外）免疫自稳（防自身免疫病）免疫监视（防肿瘤）。标记免疫技术应用最多，自动化是免疫学检验发展趋势。抗原的表位至少有二种方式：顺序或线性表位，三维结构的构象表位。天然抗原绝大多数是胸腺依赖性抗原（TD-AG）o超抗原被T细胞识别时虽然要与MCHIl类分子结合,但不受II类分子的限制，可以直接活化T细胞而且效率高。抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL是抗原结合部位，CL,CHl是遗传标记所在，CH2有补体结合点，CH5能固定
38、组织细胞，CH3和CH4还参加I型变态反应。免疫学中常用木瓜和胃蛋白酶。免疫球蛋白的血清型有：同种型（正常个体都有）同种异型（只存在同种的某些个体中）独特型（某一个体独有的。独特性网络在免疫应答的调控中起重要作用）。天然IgG分子无活性。IgM（五聚体，天然凝集素和冷凝集素，是B细胞膜上主要表面膜Ig）激活补体能力最强，IgG（单体，电泳最慢，再次免疫应答的主要抗体）至少要两分子。0.1m,2筑基乙醇能破坏IgM但不破坏IgG,可以区分它们。母乳中的分泌型IGA提高了婴儿出生后4-6个月内的局部免疫屏障，常称为局部抗体。人类重链基因位于14号染色体上，K基因位于第二号染色体上。参与补体激活经典
39、途径的固有成份按先后为Cl,C2oOOOOC9,Cl由Clq,Clr,Cls,三种组成。灭活的补体在片在符号前加i,有酶活性的上加一横。补体大多是糖蛋白多属B球蛋白，Clq,C8是r蛋白。Cls,C9是a球蛋白。C3含量最多，C2含量最少。替代途经的激活物主要是细胞壁成分。补体清除免疫复合物的方式：吞噬调理，免疫粘附，免疫复合物抑制。编码人C4,C2,B因子的基因在第六染色体短臂上与MHC的基因相邻,命名为HI类组织相容性基因。产生补体主要是肝脏主要是巨噬细胞。已发现的归巢受体有：CD44,LFA-1,VLA-4,MEL-14/LAM-1等。CD2表达于全部T细胞和NK细胞。CD3表达在全部T
40、细胞，CD4（辅助性T细胞）/CD8（细胞毒性T细胞）相互关联但意义不同是T细胞亚群的表面标志。SIG的功能是作为B细胞表面的抗原受体可与相应抗原特异性结合并将抗原内摄处理。MHCII是辅佐细胞（AC）递呈抗原的必须物质是辅佐细胞（有单核吞噬,树突状，B细胞）的标志。明确的白介素有15个，IL2主要由T细胞（CD+4）受抗原或丝裂原刺激后产生，15KD,113糖蛋白。11型干扰素又称免疫干扰素或IFNR,主要由T细胞产生。肿瘤坏死因子：TNEa:由细菌脂多糖活化的单核细胞产生引起出血坏死也称恶病质素，TNFb:由抗原或丝裂原刺激的淋巴细胞产生有肿瘤杀伤和免疫调节功能又称淋巴毒素。红细胞生成素（
41、EPO）是糖蛋白，3039KD,主要由肾小管内皮细胞合成也可由肝和巨噬细胞产生。人类MHC称为HLA复合体，位于第六对染色体的短臂上。其多态性为复等位基因所致，当群体中位于同一位点的等位基因多于两种时为复等位基因，HLA的遗传特点：单倍型，共显性，连锁不平衡。I和II类MHC分子是引起同种异体移植排斥反应的主要抗原。当抗原递呈细胞向免疫活性细胞递呈抗原时，免疫活性细胞在识别特异性抗原时，必须识别递呈细胞的MHC抗原称为MHC限定性。HLA是体内最复杂的多态性基因系统。抗原一MHCn类分子复合物与T细胞受体的结合是使TH细胞活化的首要信号。细胞免疫的效应方式有：细胞毒，迟发超敏。体液免疫以血清中
42、有循环抗体为特征。炎症细胞有：中性，肥大，嗜酸，嗜碱，血小板，内皮。炎症介质：血管和平滑肌收缩介质，趋化因子，酶类，蛋白多糖。免疫炎症类型：IGE介导，免疫复合物，细胞，皮肤嗜碱细胞型。抗原抗体结合基于结构互补与亲和性。由一级结构决定。结合力有：电荷吸引，范德华力，氢键，疏水性作用力。常用佐剂有：氢氧化铝，明矶（弗氏）是目前动物免疫中最常用的，抗血清保存：4度，低温，冰冻干燥。抗体特异性纯化有：亲和层析，吸附法。特异性鉴定有：效价，特异性，纯度，亲和力。脾淋巴细胞特征是抗体分泌功能和能在选择培养基中生长，骨髓瘤细胞则可无限分裂既永生性。细胞融合的选择培养基有三成份：次黄喋吟（三）氨甲蝶吟（八）
43、胸腺喀咤核昔（T）称为HAT培养基。液体沉淀试验有：抗原稀释法和抗体稀释法及方阵滴定法。免疫固定电流常用于M蛋白的鉴定。补体结合试验中5种成份分三个系统（反应，补体，指示）不溶血为阳性。常用的标记酶有辣根过氧化物酶（底物为邻苯二胺，四甲基联苯胺）碱性磷酸酶（底物为磷酸酯）。抗体制备常用二醛法及过碘酸盐法。RIA（放免）核素标记抗原，竞争抑制，23个数量级，标记物限量。IRMA（免疫放射）核素标记抗体，非竞争结合，3个数量级以上，标记物过量。常用的荧光素有：异硫鼠酸（FrrC）四乙基罗丹明（RB200）四甲基异硫氟酸罗丹明（TRrrC）。常用标记蛋白的方法有：搅拌法和透析法。荧光抗体鉴定包括效价
44、及荧光素与蛋白的结合率，大于1：16为理想，一般固定标本的荧光抗体以FP=lo5为宜用于活细胞染色的以2。4为宜。时间分辨荧光免疫测定以锢系元素错合物为荧光标记物，偏振免疫测定的偏振波长是485（蓝光）。发光免疫技术：生物发光有荧火虫荧光素，化学发光底物有：氨基苯二酰肿类主要为鲁米诺及异鲁米诺衍生物，哑咤酯类，电化学发光底物为三联毗钉另一类为三丙胺。胶体金颗粒由一个基础金核及包围在外的双离子层构成，其性质有对电解质敏感性，呈色性，光吸收性（510550）o双抗体夹心法的质控点最好是相应抗原。外周单个核细胞的分离的分层液常用：FiCOIl（由上到下为血浆，单个核细胞，粒，红）和PerCoII（由
45、上至下：死细胞，单个核细胞，淋，红，粒）。纯淋巴细胞群的采集有：黏附贴壁法，吸附柱过滤法，磁铁吸引法。亚型的分离法有：E花环沉降法，尼龙分离法，亲和板结合法，荧光激活细胞分离仪法。淋巴细胞活力测定常用台盼蓝染色法，死为蓝色。保存时二甲亚砚为保护剂。植物血凝素（PHA）刀豆素（CONA）刺激T细胞增殖。增殖试验有：形态法（分别计数淋母，过渡性淋母，核有丝分裂相及成熟小淋，前三者为转化细胞，计200个，算转化率）核素法。SMfg是鉴定B细胞可靠的指标。B细胞功能检测方法：溶血空斑形成试验（直接法只能检测IgM生成细胞，其它用间接法，即在脾细胞和SRBC混合时加入抗Ig抗体。B细胞增殖能力试验。测定
46、人NK细胞活性多用以K562细胞株为靶细胞，测鼠NK细胞活性则用YAG细胞株。嗜酸粒细胞活化产物的测定：产物有：阳离子蛋白（ECP）,主要碱基蛋白（MBP）,X,EPD,EDN等，其中ECP毒性最强因而认为是嗜酸的特异性标志。特异性鼻粘膜激发试验用变应原非特异性采用乙酰甲胆碱或组胺。新月体性肾小球肾炎的免疫病理类型有：免疫复合物，抗肾小球基底膜（GBM）抗体，抗中性白细胞质抗体。含有新月体的肾小球数目和比例是该病的关键。膜性增生性肾小球肾炎（MPGN）是原发性肾小球病中唯一具有独特的血清补体异常的疾病测C3NeF0自身免疫病（AID）的特征：高滴度自身抗体，病理特点为免疫炎症损伤与抗原分布一致
47、，能建动物模型。不溶性DNP（抗核蛋白抗体）通常完全被DNA和组蛋白吸收，是形成狼疮细胞的因子。抗dsDNA抗体对SLE有较高的特异性。抗Sm抗体是SLE的特异性标志之一。ANA阳性的荧光现象分：周边型表示抗DNA抗体存在（SLE）,均质型表示有抗核蛋白抗原（DNP）抗体，斑点型多为抗ENA抗体（结缔组织病），核仁型多为抗核小体抗体（硬皮病）。抗乙酰胆碱受体抗体的检测对重症肌无力（MG）具有诊断意义。HeP2细胞（人喉癌上皮细胞株），Hela细胞（宫颈癌细胞株），Farr法测定dsDNA抗体的特异性高为公认标准法，当抗dsDNA抗体结合率大于20%时对SLE有意义。口干症和干燥性角膜炎是干燥综合症（SS）的主要临床表现。多发性骨髓瘤（最常见免疫增殖病）以IGG居多，重链病类别常见R,A,U三
