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1、动物细胞培养【教学目标】1,简述动物细胞培养的过程2 .了解动物细胞培养的条件3 .知道动物细胞培养的的应用【重点、难点】动物细胞培养的过程【自主学习】阅读教材P4446内容动物细胞的培养1 .动物细胞培养的概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成,然后放在适宜的培养基中，让这些细胞和2 .动物细胞培养的过程：P45图2163 .动物细胞培养的条件：(1)无菌无毒的环境：对和进行无菌处理，还可以在培养液中添加一定量的。此外，应定期。(2)营养：合成培养基中有、等，通常需加入等天然成分。(3)温度和PH：哺乳动物适宜温度为,多数细胞生存的适宜PH为。(4)气体环境：主要是和o是细胞代谢所必需
2、的，CO2的主要作用是o4 .举例说出动物细胞培养技术的应用：大规模生产有重要价值的生物制品。如：、.、等。动物细胞是基因工程技术中常用的细胞，因此，也离不开动物细胞的培养。培养的动物细胞还可以用于,判断某种物质的毒性。科学家培养正常或各种病变的细胞，用于、等方面的研究。如：O【合作探究】【探究一】动物细胞培养的过程1.动物细胞培养的选材有什么要求？取出动物组织后，怎样制备细胞悬液?5 .动物细胞培养用到什么酶？它的作用什么？6 .什么是“原代培养”和“传代培养”？为什么要进行“传代培养”7 .什么是“细胞贴壁”和“接触抑制”8 .动物细胞能无限制的传代下去吗？9 .目前使用的或冷冻保存的正常
3、细胞通常为几代以内的细胞？为什么？10 通过动物细胞培养能获得动物个体吗？为什么？归纳总结：根据以上的探究并结合教材4445页动物细胞培养过程，构建动物细胞培养流程图。【探究二】动物细胞培养的条件1.怎样保证被培养的细胞处于无菌无毒的环境中？2 .为什么培养动物细胞时通常要加入动物血清？3 .动物细胞培养所需的气体主要有哪些？主要作用分别是什么？【探究三】动物细胞培养技术的应用如何用动物细胞培养技术来检测有毒物质的毒性?【小结】：植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的【当堂检测】1、（2013浙江）实验小鼠皮肤细胞培养（非克
4、隆培养）的基本过程如图所示。下列叙述错误的是（）A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化C.丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型N0D.丁过程得到的细胞具有异质性2、（2010年浙江）下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是（）A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B.克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D.恶性细胞系的细胞可进行传代培养3、（2013大纲卷）关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是（）A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.烟草
5、叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒4、（2009年浙江理综）用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是（）A.都需要用CO2培养箱B.都需要用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D.都可体现细胞的全能性5.右图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：（1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自.原因是.。A（2）容器A的动物器官或组织首先要进行的处理是,然后用VS产*/醒处理，这是为了使细胞分散开。这样做的目的i是。Mb（3）培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有/等。在此瓶中培养一段时间，这时
6、的培养称为（4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用处理，然后配置成,再分装，继续培养，称为。【课后巩固】1 .下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是（）A.动物细胞培养的目的就是为获得细胞分泌蛋白B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开C动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象D.可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体2 .一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）无毒的环境无菌的环境合成培养基需加血浆卜温度与动物体温相近需要。2,不需要CChCO2能调培养液PHB.D.3 .下列关于动物细胞培养的说法错误的是（）A.正常细胞体外条件下不能无限传代B.细胞在培养瓶中进行有丝分裂，一般不分
7、化C.细胞遗传物质稳定，不会发生变异现象D.细胞培养常用于分泌性蛋白的生产4.（2008年宁夏理综）回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时，细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成细胞层数是O要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是。（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现现象，但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该细胞黏着性,细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量O（3）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。（5）在细
8、胞培养过程中，通常在冷冻（如液氮）条件下保存细胞，因为在这种条件下，细胞中的活性降低，细胞的速率降低。（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。5.某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：（D将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量O（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是。细胞培养应在含5%CO2的恒
9、温培养箱中进行，CO2的作用是（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用消化处理。（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物丫对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的或合成水平的差异，确定Y的药效。答案：（1）动物胚胎或幼年动物的器官组织因为这些组织或器官上的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛（2）剪碎胰蛋白使每个细胞能与培养液接触（3）葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清原代培养（4）胰蛋白酶细胞悬浮液传代培养答案：（1）相互接触接触抑制单层（或一层）胰蛋白酶（2）衰老甚至死亡不死性降低减少（3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）（4）中（5）冷冻（或超低温、液氮）酶新陈代谢（6）抗原答案：（D多（2）血清可以补充合成培养基中缺乏的物质维持培养液的PH停止多胰蛋白酶（4）抗生素（5）YmRNA蛋白质
