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1、临床医学检验临床免疫技术：酶免疫技术考点巩固1、单选E1.lSA板包被后，最常用的封闭物质是OA人白蛋白B.人球蛋白C.牛血清白蛋白D.牛血清球蛋白E.鼠白蛋白正确答案：C参考解析：将抗原或抗体固相化的过程（江南博哥）称为包被。由于载体的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯E1.lSA板为载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液）中，加于E1.lSA板孔中在4过夜，经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低，固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖，其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，最后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下，如在
2、包被后再用1%5%牛血清白蛋白包被一次，可以消除这种干扰。这一过程称为封闭。包被好的E1.ISA板在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。考点：免疫吸附剂2、单选关于斑点-E1.ISA说法哪一项不正确OA.以吸附蛋白能力很强的硝酸纤维膜为载体B.底物经酶反应后形成有色沉淀，使固相膜染色C.斑点-E1.lSA灵敏度高，测得效价常高于常规E1.ISAD.操作简便E.斑点-E1.ISA可同时获得对多种疾病的诊断结果正确答案：C参考解析：斑点-E1.lSA的原理与常规E1.lSA相同，不同之处在于斑点-E1.lSA采用的固相载体为对蛋白质具有很强吸附力的硝酸纤维素膜，故检测灵敏度高，是普通E1.ISA
3、的68倍。如果膜上同定多种抗原，可同时检测多种抗体。3、单选酶扩大免疫测定技术是最早取得实际应用的何种酶免疫测定方法OA.均相酶免疫测定B.异相酶免疫测定C.固相酶免疫测定D.液相酶免疫测定E.固相一液相酶免疫测定正确答案：A4、单选下列哪项不是血药浓度免疫学测定的技术OA.化学发光免疫测定B.免疫电泳法C.放射免疫法D.荧光免疫法E.酶免疫法正确答案：B参考解析：药物多数分子量很小，为半抗原。免疫电泳的方法不够灵敏，不适于测定半抗原。5、单选用E1.ISA双抗体夹心法检测抗原A时，固相载体的包被物是OA.酶标记A抗体B.未标记的抗A抗体C.未标记抗原AD.酶标抗球蛋白抗体E.酶标记抗原A正确
4、答案：B参考解析：E1.ISA法中双抗体夹心法的固相载体包被物是未标记的抗待测抗原的抗体。6、单选在双位点E1.lSA实验时，造成抗原测值低于实际含量的常见原因是O.固相抗体过多B.反应时间不够C.标记抗体过多D.待测物过浓E.酶的活性过高正确答案：D参考解析：钩状效应是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象，其中抗体过量叫做前带效应，抗原过量叫做后带效应。抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关。无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体，均可发现只有在两者分子比例合适时才出现最强的抗原一抗体反应。7、单选酶联免疫吸附试验（E1.lSA）中应用最
5、多的底物是OA邻苯二胺（OPD.B.四甲基联苯胺（TMB.C.ABTSD.对硝基苯磷酸酯（p-NPP）E.以上都不是正确答案：B参考解析：邻苯二胺灵敏度高，比色方便，是E1.lSA中应用最早的底物，但稳定性差，反应过程需要避光，还具有致癌性；四甲基联苯胺稳定性好，反应无需避光，没有致突变作用，是目前应用最广泛的底物，但是水溶性差。8、单选E1.lSA试验中将HRP酶结合到抗原或抗体的方法是OA.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.戊二醛交联E.共价结合正确答案：D9、单选ABC法中的桥是指OA.生物素B.亲和素C.生物素化的抗体D.与生物素结合的酶E.三抗正确答案：B10、单选患者HBSA
6、g(+)、HBeAg(+)、抗一Hbe(一)、抗一HBCIgM(+)、抗一HBs(一),正确的判断是OA.急性乙型肝炎B.慢性乙型肝炎C.慢性迁延性肝炎D.乙肝恢复期E.慢性活动性肝炎正确答案：A11、单选均相酶免疫测定的优点不包括()A.多用于小分子激素和半抗原的测定B.勿需分离游离的酶标抗原C.易于自动化分析D.不易受样品中非特异的内源酶的干扰E.灵敏度可达10-9mol1.正确答案：D12、单选酶标板用抗原包被后要进行封闭的主要原因是OA.使抗原固化到聚苯乙烯板上B.增加酶标板的稳定性C.保护包被抗原的免疫活性D.防止非特异反应E.使酶的工作浓度最佳正确答案：D13、单选关于E1.ISA
7、的固相载体论述有误的是OA.最常用的是聚苯乙烯微量反应板B.每一批号的聚苯乙烯在使用前需检查其性能C.聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯低D.阳性和阴性标本测定结果差别最大者是最适用载体E.微孔滤膜也可作固相载体正确答案：C14、单选酶增强免疫测定技术是最早取得实际应用的OA.均相酶免疫测定B.异相酶免疫测定C.固相酶免疫测定D.液相酶免疫测定E.固相一液相酶免疫测定正确答案：A参考解析：均相酶免疫测定方法有酶增强免疫测定技术(EMIT)和克隆酶供体免疫分析方法。其中，酶增强免疫测定技术是最早取得实际应用的酶免疫测定方法。考点：均相酶免疫测定15、单选酶免疫技术中的酶结合物指的是OA.酶标记
8、抗体B.酶标记抗原C.酶标记抗原或抗体D.结合在固相载体上的酶E.酶与底物的结合正确答案：C16、单选利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体的方法，通常称为()A.双抗体夹心法B.双位点一步法C.间接法D.竞争法E.捕获法正确答案：C参考解析：间接法是检测抗体最常用的方法，其原理是利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，只要更换不同的固相抗原，就可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。17、单选患者，男，36岁。HBSAg阳性5年，A1.T反复增高2年，经治疗可恢复。近2个月来乏力、食欲减退。体检：巩膜无黄染，未见肝掌及蜘蛛痣。肝于肋缘下1cm,脾侧位可及。实验室检查:1
9、.T420U1.,HBsAg(+)。诊断：慢性乙型肝炎。患者接受干扰素治疗。选择以下观察疗效的最佳指标()A.HBeAg(一)、HBV-DNA(+)B. HBeAg(一)、HBV-DNA(一)C. HBeAg(+)、HBV-DNA(一)D. HBsAg(+)、抗-HBe(+)E. HBsAg(+)、抗-HBc(+)正确答案：B参考解析：乙型肝炎病程超过半年，体征及肝功能异常符合慢性乙型肝炎诊断。HBeAg及HBV-DNA转阴或明显减少为治疗有效。18、单选E1.lSA试验中最常用的标记酶是()A. ASTB. HRPC. ACPD. 1.DHE. A1.T正确答案：B参考解析：在E1.ISA中
10、，常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP)o应用AP系统，其敏感性一般高于应用。HRP系统，空白值也较低。但由于AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率较HRP低等原因，国内在E1.lSA中一般均采用HRP。考点：酶和酶作用的底物19、单选关于E1.lSA竞争法正确的是()A.用于检测抗原B.被检测物与酶标记物的免疫活性各不相同C.被测物多则标记物被结合的机会少D.测定管的颜色比对照管的淡表示被测物量少E.只用于检测抗体正确答案：C20、单选一个亲和素分子可以结合几个生物素分子()A. 1个B.2个C.3个D.4个E5个正确答案：D21、单选酶
11、免疫技术用于样品中物质的定量测定(ElA)是基于OA.酶标记物参与免疫反应B.酶催化免疫反应，复合物中酶活性与样品测值呈正比C.含酶标记物的免疫复合物中的酶可催化底物成色，其色泽与待测物量相关D.固相化技术的应用，使结合和游离的酶标记物能有效的分离E.酶与抗原或抗体的特异结合正确答案：C参考解析：酶免疫技术是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析22、单选E1.ISA试验时易造成空白值增高的原因主要来自于OA.保温时间短B.加样不准C.洗涤不彻底D.比色误差E.包被不好正确
12、答案：C23、单选与双抗体夹心法相比，E1.ISA间接法的主要优点是OA.有较大的放大作用B.减少了操作步骤C.减少了冲洗次数D.可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体E.缩短反应时间正确答案：D24、单选可用免疫渗滤试验和免疫层析试验检测的项目没有（）A.抗HCVB. HIVC. HCGD. HBsAgE. HAV正确答案：E参考解析：免疫渗滤试验和免疫层析试验具有简便、快速、单份测定、可立等结果等优点，无需任何仪器设备，试剂稳定，因此多用于急诊检验。这类试验不能准确定量，所以主要限于检测正常体液中不存在的物质以及正常含量极低而在特殊情况下异常升高的物质。目前临床检验中已开展的项目有HC
13、G、抗HCV和抗HIV、HBSAg等，新项目正在不断发展中。考点：酶免疫测定的应用25、单选均相酶免疫测定不具有的特点是OA.常用于半抗原和小分子的检测B.操作简便，易于自动化C.不易受样品中的内源性酶的干扰D.酶与抗原结合后仍保留酶和抗原的活性E.灵敏度不及异相酶免测定正确答案：C参考解析：均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与晦结合制成酶标记物，酶与抗原（半抗原）结合后仍保留酶和抗原（半抗原）的活性。均相酶免疫测定操作简便、快速、适合于自动化，应用广泛，不仅可检测药物、激素、毒品、兴奋剂等半抗原或小分子抗原，也可测定大分子蛋白质、病毒及细胞性抗原成分。最大缺点是
14、易受样品中非特异的内源性酶、酶抑制药及交叉反应物的干扰，而且由于采用竞争性结合分析原理，灵敏度不及异相酶免测定。考点：均相酶免疫测定26、单选下列对血清中酶活力的测定的描述哪一项是错误的OA.可测定产物生成量B.可测定底物消耗量C.需最适pHD.需最适温度E.与底物浓度无关正确答案：E参考解析：酶促反应中需要最适pH、温度及过量的底物，反应速度可用一定时间内产物生成量或底物消耗量来反映。27、单选以下哪一种复合物的形成属于间接法E1.lSA免疫反应结果OA.固相抗原-抗体-酶标二抗B.固相抗体-抗原-酶标抗体C.固相二抗TgM抗原-酶标抗体D.固相抗体-酶标抗原E.固相抗体-抗原-抗体-酶标抗
15、体正确答案：A参考解析：间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体（抗人免疫球蛋白抗体）以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。28、单选最常用于IgM测定的E1.lSA方法是OA.双抗体夹心法B.间接法C.竞争法D.捕获法E.dotE1.ISA法正确答案：D29、单选选择E1.ISA的标记用酶，下面哪一项特性是不需要的OA.具有可与抗原、抗体结合的基团B.标记抗原后，酶活性保持稳定C.当酶标抗原与抗体结合后酶活性可出现激活或抑制D.酶催化底物反应后生成的信号易于测定、重复性好E.酶的稳定性、可溶性好正确答案：C参考解析：选择E1.lSA的标记用酶，保证标记抗原后，酶活性保持
16、稳定。30、单选E1.lSA法检测抗-HBc,其操作原理为（）A.双抗体夹心法B.双位点一步法C.间接法D.竞争法E.捕获法正确答案：D31、单选E1.lSA中最常用的酶是OA.葡萄糖氧化酶和辣根过氧化物酶B.半乳糖甘酶和辣根过氧化物酶C.葡萄糖氧化酶和碱性磷酸酶D.脉酶和碱性磷酸酶E.辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶正确答案：E32、单选制备酶标记物的交联剂的反应基团至少应有OA5个B.4个C.3个D.2个E.1个正确答案：D33、单加检测IgM抗体最常用的酶联免疫吸附试验类型是（）A.间接法B.捕获法C.竞争法D.双抗原夹心法E.间接法正确答案：B参考解析：血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特
17、异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法，先将所有血清IgM（包括特异性IgM和非特异性IgM）同定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgMo34、单选下列不属于E1.ISA测定方法中所必需的试剂（）A.固相的抗原或抗体B.酶标记的抗原或抗体C.酶作用的底物D.戊二醛交联剂E.稀释的血清正确答案：D参考解析：E1.ISA是在固相载体上包被抗原或抗体后，通过抗原抗体反应使酶标抗体（或酶标抗原）结合到载体上，经洗涤使结合的酶标抗体和游离的酶标抗体分离，洗去游离的酶标抗体（或酶标抗原）。在这种测定方法中有3种必要的试剂：固相的抗原或抗体。酶标记的抗原或抗体。酶作
18、用的底物。间接法和捕获法还使用稀释的血清标本做试剂。戊二醛是一种双功能团试剂，可以使酶与蛋白质或其他抗原的氨基通过它而耦联。与E1.ISA的方法相反。考点：酶联免疫吸附试验方法类型及反应原理；酶标记抗体或抗原35、单选如果标本中存在NaN可能会导致（）A.假阴性B.假阳性C.灵敏度增加D.特异性增加E.临界值下降正确答案：A36、单选E1.lSA试验以HRP为标记酶时，常用的供氢底物为OA. OPDB. OTC. YMBD. ABTSE. PNP正确答案：A参考解析：许多化合物可作为HRP的供氧体，在E1.lSA中常用的供氢体底物为邻苯二胺（OPD）、四甲基联苯胺（FMB）和ABTS。OPD为
19、在E1.ISA中应用最多的底物，灵敏度高，比色方便。考点：酶和酶作用的底物37、单选E1.ISA间接法通常用来检测OA.抗体B.抗原C.免疫复合物D.抗抗体E.半抗原正确答案：A38、单选反应结束时，对照管的成色最强，此情况常见于哪种E1.lSAOA.双抗体夹心法E1.ISAB.竞争法E1.ISAC.间接法E1.ISAD.捕获法E1.ISAE.ABS-E1.ISA法正确答案：B参考解析：竞争法E1.ISA的原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与同相抗原结合。标本中抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体愈少，因此阳性反应呈色浅于阴性反应。39、单选钩状效应是指用E1.ISA一步法测定标本中待测抗
20、原时，抗原浓度过O,三测值偏（）的现象，极易造成假阴性（）A.低，rJB.高，高C.高，低D.低，低E高,不变正确答案：C参考解析：在E1.ISA一步法测定中，应注意钩状效应，类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。考点：酶联免疫吸附试验方法类型及反应原理40、单选艾滋病病毒检测的确证试验通常采用何种检测方法（）A.化学发光法B.免疫印迹法C.E1.ISAD.斑点免疫渗滤试验E.斑点-E1.lSA法正确答案：B41、单选制作E1.lSA载体材料最常用
21、的物质是OA.聚氯乙烯B.聚苯乙烯C.硝酸纤维素膜D.尼龙膜E.磁性微粒正确答案：B参考解析：酶免疫技术的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。最常用的固相载体物质是聚苯乙烯。因其具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。而且聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式，在测定过程中，它作为载体和容器，不参与化学反应，加之它的价格低廉，所以被普遍采用。考点：固相载体42、单选酶免疫技术中最佳工作浓度的选定常采用OA.抗原稀释法B.抗体稀释法C.酶标记物稀释法D.棋盘滴定法E.A+B正确答案：D参考解析：最佳工作浓度的选择通常通过将抗体、
22、抗原作一系列的稀释，即棋盘滴定。43、单选以下各种E1.ISA技术中，待测孔（管）最后显色的颜色深浅与标本中待测物质呈负相关的是（）A.双抗体夹心法B.双位点一步法C.间接法D.竞争法E.捕获法正确答案：D参考解析：竞争法参考管中由于结合的酶标抗原最多，故颜色最深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差，代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。其他都是正相关。44、单选下列有关血清中酶活力测定的说法有误的是OA.可测定底物消耗量B.可测定产物生成量C.需最适PHD.需最适温度E.与底物浓度无关正确答案：E45、单选酶免疫技术中的酶结合物是指OA.酶标记抗原B.酶标记抗体C.酶
23、标记抗原或抗体D.结合在固相载体上的酶E.酶与底物的结合正确答案：C参考解析：酶结合物是指用酶标记后的抗原或抗体。46、单选E1.lSA技术中，最常用来检测抗原的方法是OA.双抗体夹心法B.竞争法C.捕获法D.间接法E.应用生物素和亲和素的E1.ISA正确答案：A47、单选下列说法不正确的是OA.邻苯二胺为在E1.ISA中应用最多的底物B. 一般采用四甲基联苯胺作为AP的底物C. AP系统的敏感性一般高于应用HRP系统D. B一半乳糖甘酸的底物常用4一甲基伞基一B-d半乳糖昔E. AP较难得到高纯度制剂，稳定性较HRP低，价格较HRP高，制备酶结合物时得率也较HRP低等原因正确答案：B48、单
24、选患者，男，40岁。乏力、食欲缺乏半个月。查体：肝于肋缘下1cm,脾侧位可及。HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBe(一)、抗-HBCigM(+)、抗TBs(一)o疑似诊断为OA.急性乙型肝炎B.慢性乙型肝炎C.慢性迁延性肝炎D.乙肝恢复期E.慢性活动性肝炎正确答案：A参考解析：HBSAg(+)表示体内感染了HBV的特异性标志；HBeAg(+)表示患者血液有感染性；抗-HBcIgM(+)提示新近HBV感染并有病毒增殖，有助于诊断急性乙型肝炎。49、单选比色分析中符号C表示OA.吸光度B.电流C.透光系数D.透光度E.溶液浓度正确答案：E参考解析：C表示浓度。50、单选免疫渗滤试验衍生于
25、OA.免疫扩散试验B.免疫层析试验C.免疫印迹试验D. dot-E1.ISAE. RIA正确答案：D51、单选用E1.lSA双抗体夹心法检测血清中甲胎蛋白(AFP)应选择的固相包被物是OA.已知AFPB.酶标记AFPC.抗AFP抗体D.酶标记抗AFP抗体E.待检血清正确答案：C52、单选关于E1.ISA的底物OPD的特点哪一条不正确OA.具有致癌性B.灵敏度高C.比色方便D.配成应用液后稳定性好E.与酶反应后显橙黄色正确答案：D53、单选下述哪一种酶联免疫吸附实验方法最常用于抗原测定OA.间接法E1.ISAB.反向间接法E1.lSAC.竞争法E1.ISAD.双抗体夹心法E1.ISAE.捕获法正
26、确答案：D54、单选为消除非特异性显色导致的本底偏高，酶免疫技术中将抗原抗体包被后需再进行封闭的是OA. 15%25%牛血清白蛋白B. 10%15%牛血清白蛋白C. 10%牛血清白蛋白D. 1%10%牛血清白蛋白E. 1%5%牛血清白蛋白正确答案：E55、单选酶增强免疫测定技术(EMIT)是一种OA.非均相酶免疫测定技术B.均相酶免疫测定技术C.酶免疫组织化学技术D.酶免疫测定与电泳相结合的技术E.电泳技术正确答案：B参考解析：酶增强免疫测定技术(EMIT)是均相酶免疫测定技术。EMIT的基本原理：半抗原与酶结合成酶标半抗原，保留半抗原和酶的活性，当酶标半抗原与抗体结合后，所标的酶与抗体密切接
27、触，使酶的活性中心受到影响而活性被抑制，反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例，从酶活力的测定结果可推算出标本中半抗原的量。考点：均相酶免疫测定56、单选检测HBV血清学标志物最常用的方法为OA.免疫荧光法B.E1.ISAC.中和试验D.免疫印迹试验E.放射免疫法正确答案：B参考解析：目前在国内的临床实验室中最常用的是酶联免疫吸附试验(E1.ISA)oE1.ISA灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低。57、单选E1.ISA双抗体夹心法OA.将酶标记特异抗体用于检测抗原B.先将待测抗原包被于固相载体C.标记一种抗体可检测多种抗原D.能用于半抗原的测定E.将酶标记抗抗体用于抗原检测正确答案
28、：A58、单选酶免疫技术中选定最佳工作浓度常采用OA.抗体稀释法B.抗原稀释法C.酶标记物稀释法D.棋盘滴定法E.A+B正确答案：D59、单选HRP的供氢体是()A. TMBB. H202C.小分子醇过氧化物D.尿素过氧化物E.以上都不是正确答案：A60、单选斑点免疫层析试验最常用的栽体材料是OA.乙酸纤维素膜B.尼龙膜C.滤纸D.硝酸纤维素膜E.玻璃纤维膜正确答案：D参考解析：斑点免疫层析试验以硝酸纤维素为载体，利用微孔滤膜的毛细管作用，滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移，犹如层析一般。考点：斑点免疫渗滤试验61、单选在E1.lSA中，不是E1.lSA的反应过程，但却是决定试验成败的关键的
29、是()A.温育B.洗涤C.加样D.结果判断E.做阴阳性对照正确答案：B62、单选E1.lSA不可应用于下列哪一方面检测OA.病原体的检测B.抗体的检测C.肿瘤标志物的检测D.基因的检测E.抗原的检测正确答案：D参考解析：E1.lSA技术应用广泛，几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可以检测,但不用于基因检测63、单选间接免疫荧光和E1.ISA检测用已知抗原检测未知抗体，有关抗体正确的是OA.第1抗体为羊抗人免疫球蛋白B.第2抗体为人免疫球蛋白C.第1抗体为兔抗人免疫球蛋白D.第1抗体为人免疫球蛋白，第2抗体为羊抗人免疫球蛋白E.第1抗体为人免疫球蛋白，第2抗体为荧光或酶标记的羊/兔抗人免疫球蛋白正确答案：E64、单选下列有关酶增强免疫测定技术(EMIT)的叙述中，错误的是OA.半抗原与酶结合后同时保留半抗原与酶的活性B.属于竞争性抗原抗体反应C. EMIT是一种均相酶免疫技术D.若标本中的待测半抗原少，则游离的酶标半抗原就多E.标本中待测抗原的量与酶的量呈正比正确答案：D
