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1、本科生毕业论文（设计）题目盐胁迫下芸苔素对云端6素玉米种子及幼苗生长的影响学院资源环境与化学学院专业生物技术目录错误!未定义书签.知词悟误!未定义书签.Abstract错误!未定义书签.Keyfords错误！未定义书签.前a错识!未定义书筌.1.材料与方法21.1材料IJj仪器以及用具1.1.2试剂1.2方法1.2.1 发芽及幼苗生长试验1.2.2 叶绿素含墩的测定1.2.3膈酸含量的测定1.2.4丙二鬃含量的测定312.5过氧化物i活性的测定32.结果与分析32,1芸苔素对盐胁迫下云端668玉米种子发芽率以及发芽势的影响32.2幺:苔素对盐胁迫下云端668玉米幼苗株高以及叶片数量的影响42
2、.3尝苔索对盐胁迫下云川668玉米幼苗叶片中叶绿素含疑的影响12 .4芸苔素对盐胁迫下z3端668玉米幼苗叶片中丙：腔含我的影响52,5芸苔索对盐胁迫卜云端668玉米幼苗叶片中的弧酸含量的影响63 .6芸苔素对盐胁迫下云端668玉米幼苗叶片过粒化物版(POD)活性的影响63 .结论与讨论73.1 讨论73.2结论8参考文蛾11附录10致谢19盐胁迫下芸苔素对云端668玉米种子萌发及幼苗生长的影响三*:以云蛤668玉米种子为实粉材料，来用培养皿培养和上培的方式，探讨不同浓度的芸苔素浸种对盐胁迫下云端668玉米种子前发及幼苗生长的影响，结果表明：盐胁迫能显抑制云端668玉米种子的萌发和幼苗的生长，
3、而芸苔素能缓解盐胁迫时公然668玉米的抑制作用.芸苔素浓度为O.07mg1.时，对盐胁迫下云端668玉米种子萌发和幼苗生长的促进作用最为显著.用0.07mg1.芸苔素处理过后的云端668玉米种子的发芽率和发芽势.玉米幼苗体内的叶绿素含量均比盐胁迫条件卜明显埴麻,玉米幼苗体内的肺氨酸、丙二酹含量以及过氧化物的活性均比盐胁迫条件卜显著降低.关盐助迫：黄苔素：玉米：发芽率：发芽势：叶缭素腌级酸：内二繇：过触化物酹EffectsofbrassinicacidonseedgerminationandseedIinggrowthofmaizeYUNDUAN668undersa1.tstressAbstrt
4、:UsingYunduan668maizeseedsasexperimenta1.materia1.s,theeffectsofseedsoakingwithdificrcntconcentrationsofbrassino1.idconseedgerminationandseed1.inggrowthofYunduan668maizeundersai1.stresswerestudiedbymeansofPC1.ridishcu1.tureandsoi1.cu1.ture.Theresu1.tsshowed(hatsa1.tstresscou1.dSignificandyinhibithes
5、eedgerminationandseed1.inggrowthOfYunduan668maize,andbrasino1.inCfbraPno1.idcis0.07mg1.,ithastheInoS1.significantpromotingeffectOntheseedsandseed1.ingsofYunduan668maize.Ihegerminationrateandgerminationpotentia1.ofYunduan668maizeseedstreatedwith0.07mg1.hrassino1.ideweresignificant1.yhigherthanthoseun
6、dersa1.tstress.TheCQnICn1.ofpro1.ine,ma1.ondia1.dehydeandpexxidaseacivi(yinmaizeseed1.ingsweresignificant1.y1.owerthan(hoseundersa1.tstss.Keywordt：sa1.tstress:Brussica;11uze;germinationrate:germina1.沁npotentia1.;ch1.orophy1.1.;pro1.ine:ma1.ondia1.dehyde:Peroxidase前言盐胁迫能够对抗物造成极其严加的影响,它会抻制抗物的生长、降低植物的光
7、合效率，以及影响植物的内部构造.减少植物的水分吸收能力,增加植物对病原体的易礴性.并且还会改变植物的种子萌发率和种子发芽率1.而玉米是我国主要的经济作物,饲料的原料和工业品料作物，云端668玉米它是一种比较容易种械的玉米,它产量高，抗倒伏.且具有出苗时间短，苗齐，苗耐药性强，植株清秀，茎杆粗壮，透光能力以及光能利用率商等优点,西北地区是玉米的米要产地,玉米种值面枳约70万公斯，但西北地区气候干燥,欲泄士偏多,玉米生长环境比较恶劣而盐胁迫时玉米的影响是极其严重的，它能减少玉米的生长速度和发芽率：影响玉米的质猿：影响玉米的呼吸速率和光合作用：减少了玉米的抗旱性和抗病性.信龙飞等：对格梗的研究得出，
8、枯枝种子的发芽率、叶绿泰含珏、胚芽长都Rfi着NaC1.浓度的升高而下降.秦及丽“对黄瓜的研究得出了相似的结果,盐胁迫使黄瓜叶面积变少,生长缓慢，根系吸收营养勃顺能力海低，水分代谢素乱，严正时可能会导致植株死亡。郑晓雨券的研窕得出的结论也去明.随着拉胁迫浓度的上升，向日葵种子的发芽率、发芽指数与对照相组机比都显著下降.总之,当土馔中盐浓度达到一定值时就会使植物种子的萌发和幼苗生长产受抑制叱严重时还会能导致抗株死亡.油菜素(BraSSin。IidC)又称芸苔泰，是一种新型抗物激洪,被认为是高效、无泻的植物生长调节剂，具有渗透力强、吸收快等优势：.在较低浓度时，对植株的幼苗生长具有明显的促进作用它
9、既能有效埴加叶绿素含量，也能提高光合作用效率以及作物的抗逆性”,还能显著减少的物患病的概率,缓解药出的发生，消除的株的病斑”有研究表明,芸苔素能改善盐胁迫所对玉米造成的损害它能有效增加玉米体内叶绿素含量,促进玉米幼苗的生长以及促进玉米植株开花结果陈观规等人的研究表明以适宜浓度的芸苔素浸泡种子在配合水来进行催芽,能有效地促进水稻种子发芽，使发芽率显著提高。有研究发现E芸苔素是一种有助于改湃玉米种子质域的植物激索，可以促进玉米种子的发芽和成熟”，提高玉米种子的发芽率和品桢，增加玉米种子的抗病能力，抑制病虫害的发生廷长玉米种子的保存期，改善玉米种子的品质.因此，研究芸苔素对玉米植株抗逆性的影响力有利
10、于提高K米的种植效率和收获量.此外,在环境胁迫如盐胁迫下,芸苔素的抗逆作用也有助于保护环境.减少土塘盐分污染川.周娜螂匐通过探究盘胁迫下油菜度对黄瓜的影响，发现在油菜素浓度为02mg1.时，黄瓜的萌发率、发芽势均高于色胁迫组，表明芸苔素能轻盐杏对黄瓜萌发的抑制作用。.国外的KriShna运过研究发现芸苔素可以抑制皓胁迫下的植物的笈化应激，促进植物的抗逆性，同时刻梅物的生长发育具有显著的促进作用.此外，芸苔素还可以具有改善他物的氯代谢和璘代谢,.增强机物背笄吸收能力等作用本实验以云端668K米种子为实照材料,模拟不同盐浓度,探讨款胁迫下粪苔素时云玳668玉米种子萌发及幼苗生长的影响，为云裁668
11、玉米更好地种植提供理论依据和方法指导。1材料与方法1.1 试Ifc材料实5金材料为云端66玉米种子.顺于楚雄巾种子公n，J.为苔素浓度为92.3%,H1.合肥干盛生物科技有限公司生产,导师提供.以15Ommo1.,1.的NaC1.溶液浸泡种子模拟盐胁迫。用浓度为0.01mg/1.、0.03mg1.和0.05mg.1.0.07mg.1.,0.09mg,1.的芸苔素溶液浸泡种子6小时备用。1.1 .i三试管、烧杯、三角烧瓶、培养皿、滤纸、尺子、研钵、漏4、容尿瓶、紫外分光光度计、电导仪、水浴锅、底心机等。1.2 .2试剂芸苔素、氯化钠溶液、礴基水杨酸等，详见附录.1.2 试方法1.2.1 发芽及幼
12、苗生长试It试粉条用完全随机试脸设计，杼祖3次重笑。将培养皿内垫3层泄纸作芽床,每皿加入不同浓度芸苔素详见表1浸泡过的10粒种子,裨平成1薄层,皿内加灭储水保持湿润。另设蒸慵水和盐溶液浸泡的种子作为对照。将种子于室温下自然光照培养,分别于第3天和第7天统计其发芽势和发芽率.测完后将种子种到十堆里，于种下的第3天，第5天，第7天.第10天刈定株高.测完株高后分别测定其幼苗的生理指标.表1各处理溶液对应编号编号CK1.CK2T1.T2T3T4T5处理溶液浓度蒸懦水15011ung1.NaC1.O.O1.mg/1.0.03mg/1.0.05mg/1.0.07mg/1.0.09mg/1.1.2.2 叶
13、叙素的测定采用分光光度法口&冽测定云端668玉米叶片中的叶绿素含fit方法详见附录.1.2.3 脯气酸的测定果用磷基水物酸法国叫测定云端668玉米叶片中的肺也酸含量,方法详见附录.1.2.4 丙二慧含量测定将公端668玉米叶片加5%的三氯乙酸进行研磨，研磨好后恩心取上清液液加入硅代巴比妥酸煮沸，再离心取上清液,再测其上酒液的吸光度内切，具体方法详见附录.1.2.5 过氧化物鼻(POD)的活性的测定采用愈创木的法测定I1OD活性，具体方法详见附录。2结果与分析2.1 芸苔素对盐胁迫下云端668玉米种子发芽率以及发芽势的影响不同浓度的芸苔素浸泡玉米种子后，对玉米种子的发芽率和发芽势福有所影响,由图
14、1可知,只用NaC1.溶液浸泡后的云痂668玉米种子的发芽率以及发芽势都最低,表明在盐胁迫卜玉米种子的发芽率和发芽势都收到抑制.盐胁迫卜用芸苔素的不同浓度处理过后的云端668玉米种子的发芽率和发芽势都矮着高于NaC1.溶液的处理,在芸苔泰浓度为0.0711.时.玉米种子的发芽率和发芽势达到最高伯，说明一定浓度芸苔素可以促进皓胁迫下的公端668玉米种子的发芽，经方叁分析轩出,各浓度公苔素处理的玉米种干的发芽率和发芽势与两个对照组之间的基异极显为p1.NaC1.处理后的玉米幼苗平均株而呆低，盐胁迫卜，随着芸苔素浓度的埴加，平均均株诲出现了先上升后降低的变化羚势，在浓度007mg1.时，平均株鬲达到
15、最大(ft,芸苔素浓度OO9mg1.时,株高比之前有所降低，说明芸苔素浓度过高，抑制了云端668玉米幼苗的生长，但所有指标与对照组播存在着不同.经方差分析忠出,各浓度会苔素处理的玉米幼苗的株高与两个对照组之间的差异极显著(p0.01).由此可以看H1.-盐胁迫会对云端668玉米幼苗的生长产生抑制作用，而一定浓度的芸苔素可以改善玉米幼苗的生长状况,以浓度为0.07mr/1.时效果用好,.vi三三三三三三三三三三三三三sFi三三三三三=EsAn工三三s三三三s三5三s溶液浓度mg1.-3dHSdS7dMIOd图2玉米幼苗株高平均值2.3 芸苔素对蔻胁迫下云*668玉米幼苗叶片中叶绿索含量的影响由图
16、3可以看出经盐胁迫处理后，玉米幼苗叶片的叶绿素含状显著下降，的籽芸苔索浓度的埴加，玉米幼苗叶片的叶绿素含状逐渐增加，芸苔素浓度为007mg1.时达到以大值为1.58511eg,达到最大值以后，1者芸苔素浓度的增加I,叶绿素含此不再增加，呈现下降趋势.经方差分析得出，各浓度芸苔素处理的玉米幼苗体内叶标素的含R与两个对照组之间的差异极显著(pC001)H1.此可见一定浓衣的去苔素可以增加玉米幼苗叶片中叶绿素的含量.芸苔素的呆适浓度为0.07m1.o图3玉米叶片中叶绿素的含量2.4 芸苔素对盐胁迫下云端668玉米幼苗叶片中丙二含量的影响丙二辞含贵是抗物细胞膜筋氧化程度的表现.植物在逆境条件卜体内的丙
17、二酹含量会有所上升,由图4可知，云堆668玉米在盐胁迫卜丙二酹的含埴显著上升，而用一定浓度芸苔素处理过后公端668玉米叶片中丙：旌的含状逐渐下降，芸苔素为OOImg儿时丙：姓减少的收较少，芸苔素浓度为0.07mg,1.时丙二醛破少的尿最为显著，芸苔素009mg,1.时丙二醛含Jit比之前不再降低,经方差分析褥出,各浓度其苔素处理的玉米幼苗体内丙二醛的含址与两个对照组之间的差异极显著(p0.01).踪上.0.07mg，1.的蓑苔素对盐胁迫下K米叶片中内.解的减少量最为显著，芸苔泰浓度太低或者太窝效果都并不卉想。CK1.CK2T1.T2T3T4T5处即溶液浓度mg/1.图4玉米叶片中丙二醛含兄均值
18、2.5 芸苔素对拉胁迫下云*668玉米幼苗叶片中脯氯酸含量的影响很多植物在干旱和盐碱等逆境下.会产生大fit的腌级酸.积累的腌纸酸可以间控植物细恂旗内海透，还可以稳定生物大分子结构、降低细恂假性。由图5可以得出盐胁迫下，云堆668玉米幼苗体内的胸级酸含量明显升高,慨若芸苔索浓度的增加，随纵酸含量逐级降低，在007三g1.时下降的量燃多，出过007mg儿时膈找酸浓度反而有所上升,说明芸苔素浓度过商反而抑制了玉米幼苗体内的渗通调节，经方差分析得出，各浓度芸苔素处理的玉米幼苗体内肺氨酸的含量与两个时照组之间的基弁极W著p0.01).所以降低玉米幼苗体内肺M酸含材的最适芸苔素浓度为0.07mg1.-i
19、&隹W室图5玉米叶片中肺匏酸含氏均值2.6 芸苔素对盐胁迫下云端668玉米幼苗叶片中POD活性的影响在逆境中值物体内的过氧化物的活性会有所升诲，因此过氧化物陶活性是判断植物抗逆性的一个正要指标，从图6可以汨出，玉米幼苗在盐胁迫下体内ND活性显箸升高，在用不同浓度的技苔素处理后，POD活性呈现先降低后升高的趋势.其苔素浓度为0.0Img儿时，便于浓度不修,过氧化物版活性降低的最少,芸苔索浓度为0.07峭1时POD活性显著降低，在去苔素浓度为0.09mg1.时POD活性有所回升,说明茎苔素浓度过高,抑制了玉米幼苗的物旗代谢.经方差分析得出，各浓度芸苔素处理的玉米幼苗体内过氧化勃醉活性与两个对照组之
20、间的差异极显Xpxico1.ogy.NewEcirtoxico1.ogyDataHaveBeenReportedbyResearchcrsatFedera1.UniversityVicosa(Exogenousbrassisteroidsincrease1.eadstressto1.eraneeinseedgerminationandseed1.inggrowthofBrassicajuncca1.)J.Eco1.ogy.EnVinonmeni&ConSerVaIion,2020.13MahsaMOhamnU1.di.MajidPouryouscteAfshinIavako1.ivEhsanM
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30、):9-10.附录附录1实验试剂芸苔素、加化钠溶液、蒸储水、碳酸钙、95%乙醇、磷基水杨酸、冰肥酸、酸性苗fW.三级乙酸、0.6%硫代巴比妥酸溶液、100nmO1.PH为7.0的璘酸缓冲液等.附录2实验步骤2. 1叶绿素的测定(I)取三种新鲜的云端668玉米叶片,用自来水冲洗干净,去掉中间的脉络用剪刀剪碎.分别称取剪碎样M各Ig,在研钵中加少fit石英砂、碳酸代粉以及3m1.95%乙醉，研成均浆。(2)取源纸1张置于涮斗中，先将游抵用乙醉涧湿，在将提取液倒入漏斗,游液流至100H1.棕色容量瓶中：用乙醇冲洗研体、研棒.最后将溶液沿漏斗倒入容Ift瓶中.(3)将酒纸用乙醇洗至无色，溶液倒入容尿瓶
31、中，最后用乙醛定容至om,摇匀.(1)分别将三种叶绿素提取液在波长665nm、619nm下测定吸光度，以9我乙醉为空白对照。再通过公式计算出叶绿嫩浓度叶缘索H含量Ca=(13.956656.88*649)叶绿素b含属Cb=、R他分别表示450mn、532n三和60Omn波长下的吸光度。2. 4过氧化物酶(POD)的活性的测定(1)取样：取0.3左右经过不同处理的完好的玉米叶片，放在冰凉的研钵卜，加入POD提取液411d(100nroo1.1.PH为7.0的磷酸缓冲液)快速研磨,研磨完成后.宜接倒入肉心管中，放到4C冰箱冷藏.(做3次期亚)(2决心:调整离心机的转速和时间:3000转下离心20m
32、in,点心温度在-1.1C,(3)水浴：取上清液40微升(0.0ImD于试管中，加入31反应混合液，混匀之后放在35C水浴中保温5mn,迅速倒入比色皿中，4比色：在47On下,用POD提取液作为倜冬液,测得数据.过氧化物活性=7僵x”(gmin)VVx0.01t式中：ZA470为反应时间内吸光度的变化：W；称取玉米叶片鲜施,g；ts反应时间，min；Vt：提取陆液总体积，1：Vs：测定时间取用Ife液体枳，m1.附录3各指标方差分析3. 1株高方差分析平均值相等性段健检殴铳计，自由度1自由度2VAWx)O02布期福塞Bi1054644632.3090.001VARoOO03Ai0J-fiaS2
33、628.01731.2870.005VAR004布时福东斯3298733332.2820.001VAROoO06布朗福塞斯780190931.6240.001VAROOS布朗僦塞新12.90931.S480.012VAR007布福寤斯32M.3O632.4870.001VAR008布朗福塞斯13180.82132.8850.001a.渐近F分布.VAR002A1.pha的广集-0.05VarooooiN1234那肖3.0026.59005.28.24007.8212.705010.0021S.S25O44为性1.01.0001.0001.0将显示齐性子集中各个姐的平均位.“使用,和平均值样本大
34、小=2.000.VAR004VaroocoiA1.phaft%0.051234研43822860050024.71507.828345010.210.51显普性1.01.01.Ooo1.0将显示齐性子级中各个组的平均低.a.使用调和平均值样本大小2.000.VAR(XXX)INVAR006AJpha的子柒=O.OS1234不付430024.7250SOO2635SO7.00210.665010.00211.5850WXtt1.01.01.Ooo1.0将4示齐性子典中各个组的平均值.a.使用调和平均值样本大小2.000.VAR005VAR001NA1.pha的子集=OOS1234m43.823.
35、36505.00255100SS1.oO7.827.97SO7.975010.00210.8500显普性.166.124.086格52示齐性子象中各个出的平均依，a.使用调和平均值样本大小-2.000.VAR007A1.pha的子集=0.0SVAROO1N1234不付30025.3700SOO27.10007.00211325010.213.7000V著性1.0001.0001.0001.000将显示齐性子集中各个f1.1.的平均位，a.使用谓和平均俄择本大小=2.80VAR008A1.pha的了*-0.05VarooooiN1234那自3002442505.25.20507.8210365010.00*答性21.01.01.00011,52501.0
