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1、-前 言附录A、附录B、附录C、附录D、附录E、附录F为规性目录。本标准由省农业厅提出并归口。本标准起草单位：农业大学生物平安科学技学院、省植保植检站。本标准主要起草人：二明、肖启明、王金辉、和斌。本标准为首次发布。水稻品种稻曲病抗性鉴定及评价技术规1 范围 本标准规定了水稻品种抗稻曲病的鉴定和评价方法的术语和定义、鉴定方法、抗性评价分级及鉴定结果有效性判断。 本标准适用在田间病圃对一季稻中稻、一季晚稻和晚稻品种抗稻曲病鉴定和水稻种质抗稻曲病筛选。2 引用标准 以下文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。但凡注日期的引用文件，其随后所有的修改条款不包括订正的容或修改版均不适用于本标准，
2、然而 鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。但凡不注日期的引用文件，其最新版本均适用于本标准。国家种子质量标准GB/T 4401.11996.3 术语和定义3.1自然诱发natural induce 在适宜病害发生的环境和病原物存在的条件下，病原物借自然因素直接或间接传播到寄主植株或器官上,使其发病。3.2人工接种artificial inoculation采取人工方法将病原物直接或间接接种到寄主植株或器官上,使其发病,如喷雾法、涂抹法、注射法、针刺法等。3.3抗病性鉴定identification of disease resistance通过自然诱发或人工接种等方法
3、，将病原物直接或间接接种到寄主植株或器官上，使其发病,并依据相关的抗性评价标准，来区分品种的抗病性。4 鉴定方法4.1 鉴定病圃选择与气象条件鉴定病圃应在水稻栽培的山区，稻田土壤肥沃，肥力均匀、排灌方便；被选点所在县级气象部门近10年连续5年主要气象因子到达表1条件中的至少3项。表1 鉴定点的县级气象因子指标(8月10日9月10日)降雨日数1)d日平均温度()相对湿度(%)平均日照h1228755注1：日降水量0.1mm为1个降雨日4.2 病圃育苗 供试品种含感稻曲病对照品种，作一季稻种植，播种时间在每年5月中旬，依照品种生育期分批播种，每品种用种量60g，播前经2%福尔马林液或85%强 氯精
4、三氯异氰尿酸300500倍液浸种12h消毒，再换清水浸种2d,每天换清水1次，接着按常规催芽，当芽长达约0.5cm后，播于试验秧田，每 品种播种行长50cm，播种宽5cm，行距10cm，3次重复每重复播种量20g，各区组供试品种随机排列。播种后盖膜防鼠。移栽苗龄30d(从播种 至移栽)。播种方式如图1。图1 秧田播种方式示意各区组供试品种随机排列4.3 病圃栽培供试品种于6月下旬移栽，按区组随机排列，每品种3次重复，插单株，每小区80丛，即10行，每行8丛，株行距为16cm21cm，在参鉴品种四周插种保护行，按高产栽培方式进展田间管理。田间栽培方式如图2。图2 田间鉴定方式示意各区组供试品种随
5、机排列4.4病圃管理病圃施肥按高产栽培要求，施用纯氮150180kg/hm2，氮钾肥比1: 23。秧田期占总纯氮1/4，以50作基肥，其余50分两次于二叶期和移栽前7d追施；移栽田占总纯氮3/4，以60作基肥，其余40分两次于 秧苗返青和孕穗期追施。秧田和大田害虫防治正常进展，孕穗前期可施用杀菌剂防治纹枯病和稻瘟病，此后不再施用杀菌剂。4.5接种在自然诱发的根底，为确保菌源量充足，用PS培养液培养病菌分生孢子和菌丝 附件A，当鉴定品种中*个品种率先进入孕穗末期幼穗分化78期进展第1次喷雾接种，第2次在50品种的10稻株抽穗时进展，接种于 16:00进展。接种菌液为菌丝片段与薄壁分生孢子含4马铃
6、薯汁的混合液附件B，用喷雾器作喷雾接种。喷雾时要求整个穗部能见到菌悬液。4.6调查于品种腊熟期至黄熟期，即大约于第2次接种后2530d进展调查。每个小区全部调查，记载病丛数、病穗数、每穗病粒数，计算病丛率、病穗率和平均每穗病粒数。并记录接种期间的天气情况附件C、品种生育期附件D及品种抗性鉴定结果附件E。病丛率=病丛数/调查总丛数100病穗率=(病穗数/调查总穗数) 100平均每穗病粒数=总病粒数/调查总穗数5 水稻抗稻曲病评价分级水稻品种抗稻曲病依据平均每穗病粒数和产量损失率，将抗性分成6级，具体抗性分级如表2。表2 水稻抗稻曲病评价分级抗性病级平均每穗病粒数产量损失率抗性表型0级00高抗HR
7、1级0.0010.1000.5460.829抗R3级0.10104100.8301.716中抗MR5级0.4111.0101.7173.434中感MS7级1.0111.7603.4355.581感S9级1.7615.581高感HS6 鉴定结果有效性判断每次品种抗稻曲病鉴定均设感病对照品种，感病对照品种为红莲优6号或两优培九。对照感病品种要求发病级别7级。调查时要去除杂株结果。鉴定品种两年结果 相当于参照中抗品种T优259或威优46鉴定单位可以根据生产和田间屡次鉴定更换新的中抗品种，但新的品种必须是通过审定的，且平均每穗病粒数 1.00方可作新品种审定承受值。7对提供鉴定品种的要求 供试单位提供
8、的品种纯度要求到达GB/T 4401.11996标准二级，并提供该品种编号的生育期。品种的数量，每品种不少于100g。附录APS培养基的制作与稻曲病菌培养A.1培养基成分马铃薯200g，蔗糖20g，水1000mLA.2 制法方法先将新鲜无病的马铃薯洗净，去皮后，称200g，切成小薄片，加水1000mL，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁。然后参加蔗糖20g，摇匀，后补足水至1000mL，分装，在121下灭菌30min，备用。A.稻曲病菌分生孢子培养条件将稻曲病菌菌丝，接种于装有灭菌的PS培养基的三角瓶中，在水平摇床上26黑暗条件下130r/min恒温振荡培养7d，即可产生大量的分生孢子。附
9、录B稻曲病菌菌悬浮液的制备B.1过滤菌丝在PS培养基培养7d含有大量稻曲病菌分生孢子和菌丝，用双层灭菌纱布过滤，将菌丝用高速组织捣碎机10000r/min120000 r/min；35 min捣碎成小片段备用。B.2 离心过滤后的菌液，离心3500转/分，5min，弃上清液。B.3分生孢子量检测与菌悬浮液的制备分生孢子菌液用3%4%的马铃薯煮汁稀释，用血球计算板计数，使分生孢子悬浮液接种浓度调至含4105个孢子/ml，将捣碎的菌丝片段参加混匀即为接种菌悬浮液。附录C 第1次接种当天后25日的主要气象因子记载表 年日 期月/日降雨日数1)d日平均温度()相对湿度(%)平均日照h注1：日降水量0.
10、1mm为1个降雨日附录D 水稻品种生育期记载表 年品种编号播种期1移栽期2秧 龄3孕穗期4始穗期5齐穗期6成熟期7全生育期8)注：1播种期：实际播种日期，以月/日表示。2移栽期：实际移栽日期，以月/日表示。3) 秧 龄：播种次日至移栽日的天数。4)孕穗期：50植株的剑叶全部露出下一叶叶枕的日期，以月/日表示。5始穗期：10%茎秆稻穗露出剑叶鞘的日期，以月 /日表示。6齐穗期：80%茎秆稻穗露出剑叶鞘的日期，以月/日表示。7成熟期：籼稻85%以上、粳稻95%以上实粒黄熟的日期，以月/日表示。8 全生育期：自播种次日至成熟之日的天数。附录E品种抗稻曲病鉴定调查记载表 调查地点：时间：记载人：品种编号重复调查总丛数病丛数病丛率病穗数病穗率病穗中含不同病球数的穗数平均每穗病粒数123456789101112. z.
