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1、医学微生物学实验课件,实验内容,一、显微镜的使用操作及注意事项二、细菌的形态和特殊结构观察:1.自阅片:破伤风杆菌(示芽胞)、变形杆菌(示鞭毛)2.示教片:肺炎链球菌(示荚膜)三、革兰染色法(自做),实验室规则,微生物学实验要求 1、微生物无处不在:故要树立有菌观念,实验过程要无菌操作;2、实验材料为病原微生物,具有感染性 1)穿好白大衣,除必要的书籍、记录本及文具外,其他 个人用品不得带入实验室;2)实验室禁止饮食,未经许可严禁将实验材料带出实验室,3、按照实验要求,认真积极的完成实验,有些实验需第二天观察结果,要求同学们亲自观察,并详细记录结果,完成实验报告;4、爱护实验器材,实验用过的器
2、材放置指定位置,实验室仪器不得乱摸乱碰;实验自阅玻片标本损坏10元/张;5、实验完毕后,整理实验台,值日生负责室内卫生,并负责关门、关窗、关水、关电。,一、显微镜的使用操作及注意事项,二、显微镜的使用,(一)观察前准备,1.显微镜拿取 2.调节通光量 使用油镜时,为使通光量最大,可采用:1)光圈开到最大;2)聚光器上升到最高;3)低倍(10)物镜下,转动凹面反光镜,使视野的光照达到最明亮 均匀。,(二)低倍镜观察,粗旋钮调节:物像出现 细旋钮调节:物像清晰,为什么镜检任何标本都要先用低倍镜观察?,操作要点,(三)高倍镜观察,在低倍镜转换高倍镜(40 x)适当调节细螺旋即可看到物像,忌使用粗螺旋
3、,否则极易压碎标本甚至损坏物镜。,操作要点,注意,(四)油镜观察,1.滴油(不要抹开)2.转换为油镜头,使其浸入香柏油 3.调节细螺旋即可找到物像 油镜头须浸入油中 不使用粗螺旋,细螺旋也不可无限旋转,否则可压 碎玻片及损坏物镜头 光圈需开至最大 聚光器须上升至最高,注意,4.玻片处理5.镜头擦拭:限取3张擦镜纸-如香柏油不慎玷污非油浸镜头应立即直接拭去(勿用二甲苯)-擦拭时沿一个方向,禁止旋转6.还原各部分7.填写显微镜使用登记表,注意,二、细菌的形态和特殊结构观察,(一)细菌的基本形态,1球菌:葡萄球菌(葡萄状排列)链球菌(链状排列)脑膜炎奈瑟菌(成双排列)2杆菌:大肠杆菌、枯草杆菌等3螺
4、形菌:霍乱弧菌等,1.荚 膜,荚膜与微荚膜概念化学成分 变异医学意义,(二)细菌的特殊结构,取材:小鼠腹腔渗出液染色法:Hiss染色放大倍数:10X100,荚膜,菌体,肺炎链球菌(示荚膜),2.鞭 毛(Flagllum),概念数目、位置和排列可不同鞭毛是细菌的运动器官医学意义:,变形杆菌(示鞭毛),鞭毛,菌体,取材:纯培养物染色法:鞭毛染色放大倍数:10X100,3.芽 胞,概念形状、直径、位置随菌种而不同形成条件非细菌的繁殖体抵抗力强医学意义:,破伤风梭菌(示芽胞),芽胞,菌体,取材:纯培养物染色法:革兰染色放大倍数:10X100,4.菌 毛,概念在光镜下看不见,使用电镜才能观察到分类:普通
5、菌毛和性菌毛医学意义,三、革兰氏染色法,常用染色方法 单染法:一种染料使细菌着色,如美蓝和复红染色;复染法:两种或两种以上染料染色,有助于鉴别细菌,如革兰染色法和抗酸染色法。,渗透性学说:两类细菌的细胞壁成分和结构差异,【原理】,【材料】,1.葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。2.革兰染色液。,涂片:注意无菌操作 干 燥 固 定 染 色,【步骤】,初染:结晶紫染液染 lmin 水洗,甩干 媒染:卢戈氏碘液染1min 水洗,甩干 脱色:酒精脱色约30s 水洗,甩干 复染:复红染液染1min 水洗,甩干 印干 油镜观检,染色,关键步骤!,革兰阳性球菌,革兰阴性杆菌,取材:培养混合菌液放大倍数:100X10,革兰染色结果,【结果】,作 业,1、细菌特殊结构绘图2、革兰染色法的完全实验报告(实验名称、目的、材料、步骤、结果、分析、结论),