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1、中药学与分子生物学,中药学与分子生物学,本文探讨了近年来分子生物学技术在中药研究领域中的应用,阐明把分子生物学的新技术引入到中药研究中。不仅为探讨中药的作用机理和研制新药提供了一种新的研究工具和方法,而且还将启迪新的思想和发展新的诊疗技术,必将对中药学的变革和进步起到巨大的推动作用。,具体可分为以下几个方面:,一、应用分子生物学技术进行中药优良品种的培育二、利用分子生物学技术探讨中药作用机理三、利用基因芯片技术筛选和开发新药,应用分子生物学技术进行中药优良品种的培育,运用分子生物学中基因工程技术和细胞工程技术,一方面可对药用植物品种实施遗传改造、构建新型的抗逆力强的优良品种,以加强中药高产、优
2、质、多抗新品种的选育;另一方面,用基因工程技术培育出的抗病毒、抗虫害的新型中药能减少农药施用,杜绝农药和重金属污染,保证中药的安全性。,利用基因工程技术对植物改造的一般步骤,转基因植株的鉴定,重组DNA的制备,目的基因的获取,载体系统及其改造,植物的遗传转化,具体可分为以下几个方面:,一、应用分子生物学技术进行中药优良品种的培育二、利用分子生物学技术探讨中药作用机理三、利用基因芯片技术筛选和开发新药,1、张幸国等探讨复方丹参注射液对血管内皮细胞基因表达谱的影响,培养人脐静脉内皮细胞;复方丹参注射液作用细胞18h,以正常培养的细胞作对照,用心血管疾病及细胞因子相关的基因芯片研究复方丹参注射液对培
3、养的人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影响,并用RT-PCR方法对表达上调与表达下调的基因进行了扩增和电泳检测。基因芯片分析筛选出复方丹参对内皮细胞的影响基因9个,其中上调基因3个,下调基因6个,包括一些与免疫、血管舒缩、细胞黏附及抗氧化的相关基因;对差异表达的基因用RT-PCR 扩增及电泳检测结果与基因芯片结果一致,证实了基因芯片的检测结果复方丹参可通过多种途径在基因水平调节内皮细胞的功能,2、李孟秋等研究雷公藤红素对小鼠的免疫抑制作用及对细胞因子IL-6mRNA表达的影响,采用碳粒廓清、迟发型变态反应、血清溶血素测定和T淋巴细胞转化实验,观察雷公藤红素对小鼠免疫功能的影响;运用RT-PCR半定量
4、法研究雷公藤红素对小鼠肝脏IL-6mRNA 表达影响。雷公藤红素能抑制小鼠血清溶血素水平(400ug/kg),且与剂量呈依赖关系;小鼠耳廓肿胀度研究表明,雷公藤红素能使迟发型变态反应程度减轻(400ug/kg);雷公藤红素剂量在0.25ug/mL时,可以明显抑制植物血凝素(PHA)诱导的细胞增殖;雷公藤红素800ug/kg能对抗CCl4引起的急性肝损伤小鼠肝脏IL-6mRNA含量的升高。雷公藤红素在一定程度上能抑制小鼠的免疫功能,能抑制炎症细胞因子IL-6基因的过度表达。,3、郑欣岳等观察了四物汤对小鼠脾淋巴细胞产生IL-6的影响,郑欣岳等观察了四物汤对小鼠脾淋巴细胞产生IL-6的影响,结果发
5、现四物汤可显著提高IL-6mRNA的表达水平,从而使IL-6的分泌量增加,推测这是四物汤增强机体免疫和补血作用的机制之一。,4、史大卓等研究了防治细胞缺氧缺糖的主要机制,史大卓等认为川芎嗪注射液可促进缺氧缺糖心肌细胞蛋白质RNA的合成,同时诱导NOSmRNA的表达,认为川芎嗪增强NOS基因的表达是其防治心肌细胞缺氧缺糖的主要机制。中药的抗癌机制可能是通过调控c-fos和P53、PC1-2、c-myc 等基因的表达来诱导肿瘤细胞凋亡。绿茶抗氧化剂复合儿茶素对促癌剂12-氧-4-烷佛波醇-13-乙酸酯(TPA)的影响有明显拮抗作用,即复合儿茶素能抑制促癌剂引起的c-fos、c-myc的基因表达,而
6、对抑癌基因Rb表达有调控作用。陈记藩等认为通痹灵可使RA大鼠滑膜细胞TNF-amRNA表达水平降低,提示通痹灵治疗RA作用机理之一是通过抑制滑膜细胞异常表达的TNF-amRNA,从而下调TNF-a的产生。,4、史大卓等研究了防治细胞缺氧缺糖的主要机制,史大卓等认为川芎嗪注射液可促进缺氧缺糖心肌细胞蛋白质RNA的合成,同时诱导NOSmRNA的表达,认为川芎嗪增强NOS基因的表达是其防治心肌细胞缺氧缺糖的主要机制。中药的抗癌机制可能是通过调控c-fos和P53、PC1-2、c-myc 等基因的表达来诱导肿瘤细胞凋亡。绿茶抗氧化剂复合儿茶素对促癌剂12-氧-4-烷佛波醇-13-乙酸酯(TPA)的影响
7、有明显拮抗作用,即复合儿茶素能抑制促癌剂引起的c-fos、c-myc的基因表达,而对抑癌基因Rb表达有调控作用。陈记藩等认为通痹灵可使RA大鼠滑膜细胞TNF-amRNA表达水平降低,提示通痹灵治疗RA作用机理之一是通过抑制滑膜细胞异常表达的TNF-amRNA,从而下调TNF-a的产生。,具体可分为以下几个方面:,1、应用分子生物学技术进行中药优良品种的培育2、利用分子生物学技术探讨中药作用机理3、利用基因芯片技术筛选和开发新药,利用基因芯片技术筛选和开发新药,在后基因时代,随着基因结构和功能研究的突破,致病基因的发现,药物的研究的目标之一是在基因水平上寻找要用的靶标,通过比较药物处理前后细胞基
8、因表达的差异来推测筛选药物作用的靶,从而找到“导向药物”。目标之二是用基因芯片技术检测药物的毒性或副作用,进行毒理研究。生物芯片技术所具有的高集成与组合化学相结合,为新药研究的初筛提供超高通量筛选。目前,Gene logic inc公司用美国橡树岭研究所技术制作的流过芯片(Gene logic READS)已成功用于药物开发、靶标寻找。这将有利于确定中药的有效活性成分和有效活性部位,为开发中药新药提供一个简便、快捷的新途径。,总结:,中药学界已经开始将分子生物学技术运用到中药的研究中来,也取得了一定的成绩。但仍处于起步阶段,对中药作用机理的研究还有待于进一步深入,对中药优良品种的培育、质量标准的控制、药物的有效部位有效成分的筛选还有待于进一步深入和完善。分子生物学的迅速发展,带动了各学科的发展,后基因组时代作为21世纪生命科学发展的主要特征,已成为科学界的共识,面对这样的时代,中药研究应把握好时机,在继承祖国医学特长的基础上,大胆的借鉴新的观念、新的技术,以基因组学为突破口,宏观结合微观、综合结合分析,将中医药与现代医药学结合起来,迎接中医药发展的新时期。,ThankYou!,