《植物源性食品中氰氟草酯及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《植物源性食品中氰氟草酯及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱联用法.docx（14页珍藏版）》请在课桌文档上搜索。
1、ICS 67. 050CCS X 04B34安 徽 省 地 方 标 准DB 34/T XXXX-XXXX植物源性食品中氧氟草酯及其代谢物残留量的测定Determination of the residues of Cyanofluoride and its metabolite in plant-derivedfoodsXXXX -XX-XX 发布XXXX -XX-XX 实施安徽省市场监督管理局发布本文件按照GB/T 1. 1-2020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省食品质
2、量安全检验方法标准化技术委员会提出。本文件由安徽省市场监督管理局归口。本文件起草单位：安徽省食品药品检验研究院（安徽国家农副加工食品质量监督检验中心）、安徽 省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所、安徽省产品质量监督检验研究院本文件主要起草人：暂略植物源性食品中氟氟草酯及其代谢物残留量的测定一、植物源性食品中氟氟草酯的测定 气相色谱-质谱/质谱法1范围本文件规定了植物源性食品大米、小麦粉中锐氟草酯残留量的测定方法。本文件适用于植物源性食品大米、小麦粉中氟氟草酯残留量的测定。本文件中的锐氟草酯方法的最低检出浓度（LOQ） 0.02 mg/kgo2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性
3、引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。GB 2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法。3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4原理试样用乙酸乙酯提取，提取液经净化，气相色谱-质谱联用仪检测，外标法定量。5试剂与材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水为GBZT6682规定的一级水。1 .1试剂5 . 1. 1无水硫酸镁。6 .1.2乙酸乙酯：色谱纯。5.2 标准品氟氟草酯（C20H20FNO4，CAS号：122
4、008-85-9）,纯度295.0%。5.3 标准溶液的配制5. 3. 1匐氟草酯标准储备液（1000gmL）：准确称取按其纯度折算为100%质量的制氨草酯（5.2） 标准品10. OnIg （精确至0.1mg）于IOmL容量瓶中，用乙酸乙酯（5.1.2）溶解并定容至刻度，摇匀，配制成浓度为Img/mL的标准储备液，溶液转移至试剂瓶中，-20C保存，有效期3个月。5. 3. 2氟氨草酯标准使用液（IoOgmL）：准确移取鼠氟草酯储备液（14. 3.1）2. 0矶（精确至（HmL） 于20mL容量瓶中，用乙酸乙酯（5. L 2）溶解并定容至刻度，摇匀，配制成浓度为100gmL的标准使 用液，溶液
5、转移至试剂瓶中，-20保存，有效期1个月。5.4材料5. 3. 1陶瓷均质子：2 cm （长）1 cm （外径）。5. 3.2微孔滤膜（有机相）：0.22m或性能相当者。5. 3.3 乙二胺N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：粒径40wn60m6主要仪器和设备1.1 气相色谱三重四极杆质谱联用仪：配有电子轰击源（EI）。1.2 恒温振荡器。1.3 涡旋装置。1.4 电子天平：感量0.0Ig和0.1 mg。6. 5 离心机：转速24200 r/min。7分析步骤6.1 试样的制备与贮藏按照GB 2763中附录A的规定执行。随机取不少于500 g样品混匀，粉碎后充分混匀，放入聚乙烯 瓶或袋中，置于C及以
6、下条件保存。6.2 试样处理称取5 g试样（精确至0.01 g）于50 mL塑料离心管中，加5 mL水涡旋混匀，静置30 min,再加入IomL 乙酸乙酯5.1.2） , 3 g无水硫酸镁（5.1.1）及1颗陶瓷均质子（5.4.1）,盖上离心管盖，剧烈恒温（40 5C）振荡1 min后，4200 r/min离心5分钟，吸取上清液5 mL加）至IJ内含750 mg硫酸镁（5.11）和250 mg PAS 粉（5.4.3）的20 mL塑料离心管中，涡旋混匀1分钟，4200 r/min离心5分钟，吸取适量上清液过微孔滤 膜（5.4.2）,待测定。6.3 测定7. 3.1仪器参考条件a）色谱柱：DB-
7、5MS,（5%-苯基卜甲基聚硅氧烷的苯基芳基聚合物毛细管柱，30 m0.25 mm0.25 m,或相当者；b）色谱柱温度：40 C保持1 min,然后以40 每分钟升到120 ,再以5 每分钟升到240 C, 再以12 每分钟升到300 ,保持5min；c） 载气：氮气，纯度299.999%,流速LomL/min；d）进样口温度：280 ；e）进样体积：lL;f）进样方式：分流进样：分流比10： 1；g）离子轰击源：70 eV；h）离子源温度：230 ；i）传输线温度：280 ；j）溶剂延迟：3 min；k）多反应监测：银氟草酯的保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压见表1：表1氟氟草酯的
8、保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压名称保留时间 min定量离子对碰撞电压V定性离子对碰撞电压V毓氟草酯30.25256.1-120.112357.1-256.1107. 3.2标准工作曲线选择与被测样品基质性版相同或相似的空白样品按照7.1-7.2部分进行前处理，得到空白基质溶液。 精确吸取一定量的标准溶液，逐级用空白基质溶液稀释成质量浓度为0.01 mg/Ls 0.02 mgL, 0.05 mgL 0.10mgL 0.20 mg/L. 0.40 mg/L的基质匹配工作标准溶液，供气相色谱.质谱联用仪测定。以锐氟草酯 定量离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量
9、浓度为横坐标，绘制基质 匹配标准工作曲线。7. 3.3定性及定量7. 3. 3.1保留时间被测试样中锐氟草酯色谱峰的保留时间与相应锐氟草酯标准色谱峰的保留时间相比较,相对误差应 在2.5%之内。7. 3. 3. 2定量离子、定性离子计子离子丰度比在相同试样条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相比一致，并且在扣 除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一-化合物，样品 中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表2规定的范围， 则可判断样品中存在目标农药。表2定性时相对离子丰度比的最大允许偏差相对离子丰度5
10、020-50 （含）10-20 （含）WIO允许相对偏差202530507. 3. 3. 3 定量外标法定量。将基质匹配标准工作溶液和试样溶液依次注入各1 L气相色谱-质谱联用仪中。保留时间和离子丰 度比定性，测得定量离子的质量色谱图峰面积，待测样液中农药的响应值应在仪器检测的定量测定线性 范围之内，超过线性范围时应根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。7.5 平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。7.6 空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。8结果计算试样中的鼠氨草酯残留量以质量分数/计，单位为亳克每千克（mgkg）,按公式（1）计算:式中：样品中辄氟草酯残留
11、量（mgkg）；C从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中氟氟草酯的质量浓度的数值，单位为亳克每升 （mg/L）；V样液中最终定容体积（mL）；/试样溶液稀释倍数；m称取的试样量（g）。计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留2位有效数字，含量超过0.1 mg/kg时保留3位有效数字。9方法的准确度和精密度准确度本方法在0.020.80 mg/kg的添加浓度范围内，锐氟草酯的回收率在87.0%112%。精密度在重狂性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。二、植物源性食品中鼠氟草酯代谢物的测定 液相色谱-质谱法本文件规定了植物源性食品大米、小麦
12、粉中策氨草酯代谢物残留量的液相色谱-质谱联用仪测定方 法。本文件适用于植物源性食品大米、小麦粉中制筑草酯代谢物残留量的测定。本文件中的新氟草酯代谢物制氨草酸、虱氨草二酸方法的定量限浓度(LOQ)分别为0.02、0.05 mg/kgo11规范性引用文件下列文件对于本文件的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的 引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改 单)适用于本文件。GB 2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法。12术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。13
13、原理试样用乙月青-水提取，经滤膜过滤后经液相色谱-质谱联用仪检测，基质匹配标准溶液外标法定量。14试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水为GBZT6682规定的一级水。14.1试剂14. 1. 1乙脯(CH3CN)：色谱纯。14. 1.2甲醇(CH3OH)：色谱纯。14.1.3乙胞水溶液(1：1,体积比)：量取50 mL水加入50 mL乙睛中，混匀。14. 1.4 甲酸(HCooH)：色谱纯。14. 1.5 0.01% (WV)甲酸水：量取0.1 mL甲酸用水定容到IOoomL,混匀。14.2标准品14.2. 1 鼠氟草酸(Cl6Hi2FNC4, CAS 号：122008-78
14、-0)；纯度295.0%。14.2.2 氯氟草二酸(CI6H3FO62, CAS 号：52564-94-6 )：纯度298.0%。14.3标准溶液的配制14. 3. 1氟氟草酸标准储备液(IOogmL):准确称取按其纯度折算为100%质量的冢氟草酸(14. 2.1)标准品1. Omg (精确至0.1mg)于IOmL容量瓶中，用乙糖(14.1. 1)溶解并定容至刻度，摇匀，配制成 浓度为100gmL的标准储备液，溶液转移至试剂瓶中，-20C保存，有效期3个月。14. 3. 2氯氟草二酸标准储备液（IOOgmL）：准确称取按其纯度折算为IoO与质量的氯氟草二酸（14. 2.2）标准品LOmg （精
15、确至O.lmg）于IomL容量瓶中，用乙胎（14.1.1）溶解并定容至刻度，摇匀，配制成浓度为100gmL的标准储备液，溶液转移至试剂瓶中，-20保存，有效期3个月。14.33氟氟草酸标准中间液（10gmL）：准确移取氟氟草酸标准储备液（14. 3. 1） LOmL,用50% 乙懵水（14.1.3）稀释至IOmL,摇匀，制成10gmL的氟氟草酸标准中间液，-20C保存，有效期1个 月。14.3.4氯氟草二酸标准中间液（10gmL）：准确移取氟氟草二酸标准储备液（14. 3.2） 1. OmL,用 50%乙懵水（14.1.3）稀释至IOmL,摇匀，制成10gmL的氨氟草二酸标准中间液，-20保存
16、，有效 期1个月。14.4材料14. 4.1微孔滤膜（有机相）：022 m或性能相当者。15主要仪器和设备15.1高效液相色谱-三重四级杆液质联用仪，配ESl源。15. 2电子天平：感量0.1 g和0.1 mg。15. 3 离心机：转速28000 rmin（）15.4 恒温振荡器。15.5 涡旋混合器。16分析步骤16.1 试样的制备与贮藏按照GB 2763中附录A的规定执行。随机取不少于500 g样品混匀，粉碎后充分混匀，放入聚乙烯 瓶或袋中，置于/8 及以下条件保存。16.2 试样处理称取5.0g试样（精确至0.0Ig）于50mL塑料离心管中，加入5 mL水混匀,涡旋2 min,静置IOm
17、in, 加入10 mL乙靖水（14.1.3）及1颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，摇匀，恒温（37C5C）振荡15 min 后，5000rmin离心5分钟，上清液转入20 mL容量瓶中，于残渣中加入5 mL乙脯.水（14.1.3）涡旋，恒 温振荡，离心5分钟后，将上清液转入同一20mL容量瓶中，用乙月茶水（14.1.3）定容，混匀。吸取适量 上清液过微孔滤膜（1421）,待测定。16.3 测定a）色谱柱：C8色谱柱（2.1x10Omm, 1.74m）或性能相当者；b）柱温：40 ：c）流动相：A为0.01%甲酸水，B为甲醇，梯度洗脱条件见表3；d） 流速：0.30 mL/min；e）进样体积：1 L
18、。表3流动相梯度洗脱条件时间 min流动相A %流动相B %0.019551.009553.0050506.0030709.0059510.0059510.595511.595516. 3.2质谱参考条件a）离子源：电喷雾离子源（ESI）；b）扫描方式：负离子扫描；c）检测方式：多反应监测（MRM）；d）雾化气流速：3.0 L/min；e）加热气流速：10.0 Lzmin;f）干燥气流速：8.0 L/min;g）离子源接口电压：3.0 kV；h）脱溶剂管温度：250 ；D 接口温度：350 ；j）加热模块温度：400 ；其他质谱参数见表4。表4定性离子对、定量离子对和质谱分析参数化合物名称定性
19、离子对 m/z定量离子对 tn!zQl Pre Bias V碰撞能量 eVQ3 Pre Bias V新氟草酸299.95 228.00299.95 228.00111313299.95 208.00222130讯氟草二酸319.00247.(X)319.00247.00161415319.00203.0017221916. 3.3基质匹配工作标准曲线选择与被测样品基质性质相同或相似的空白样品按照16.1-16.2部分进行前处理，得到空白基质溶 液。分别精确吸取一定量的氯氟草酸标准中间液（14.3.3）和氟氟草二酸标准中间液（14.3.4）,用空白 基质溶液稀释作为系列混合标准工作液,氟氟草酸浓
20、度依次为5.0 ngmLJ0 ngmL.20 ngmL.50 ng/mL、IOO ngmL,虱氨草二酸浓度依次为12.5 ng/mL、25 ngmL 50 ng/mLs 125 ng/mLs 200ngmL的基质匹 配工作标准溶液，供液相色谱质谱联用仪测定。以农药定量离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对 应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。16. 3.4 定性与定量16. 3.4. 1保留时间被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在+2. 5% 之内。16. 3.4.2离子丰度比在相同试样条件下进行样品测定时，如果检出的色
21、谱峰的保留时间与标准样品相比一致，并且在扣 除背景后的样品质谱图中，目标化合物选择的子离子均出现，而且同一检测批次，对同一化合物，样品 中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质标准溶液相比，其允许偏差不超过表5规定的范围， 则可判断样品中存在目标农药。表5定性时离子丰度比的最大允许偏差相对离子丰度5020-50 （含）10-20 （含）10允许相对偏差2025305016.3.4.3 定量外标法定量。16.4 试样溶液的测定将基质匹配标准工作溶液和试样溶液依次注入各1 L液相色谱.质谱联用仪中。保留时间和离子丰 度比定性，测得定量离子的质量色谱图峰面积，待测样液中农药的响应值应在仪器检测的
22、定量测定线性 范围之内，超过线性范围时应根据测定浓度进行适当倍数稀释后再进行分析。16.5 平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。16.6 空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。17结果计算试样中的氟氟草酸、银氟草二酸残留量以质量分数G计，单位为毫克每千克（mgkg）,按下式（2） 计算：cV f8m式中：试样品中冢氟草酸或锐氟草二酸残留量（mgkg）；c从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中氨氨草二酸、虱氟草酸的质量浓度的数值，单 位为毫克每升（mgL）；V样液最终定容体积（mL）；f试样溶液稀释倍数；m称取的试样量（g）。计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测
23、定的算术平均值表示，保留2位有效数字，含量超过0.1 mg/kg时保留3位有效数字。18方法的准确度和精密度18.1 准确度本方法鼠氟草酸在0020.8 mgkg-l的添加浓度范围内，样品的回收率在81.3%105.0%；鼠氟草 二酸在0.051.0 mg/kg的添加浓度范围内，样品的回收率在87.2%109.5%。18.2 精密度在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。附录A(资料性)氟氟草酯的色谱图氯氟草酯色谱图如图A.1和图A.2。图A.1氨氟草酯TIC色谱图(0.01 mgL)图A. 2氟氟草酯MRM色谱图上祖祖拿.酸 3I9.CXX)O247.OO(-)CE: 14.03.04.05.06.0 min附录B（资料性）氟氟草二酸和氟氟草酸的色谱图鼠氟草二酸和氟氟草酸的MRM色谱图如图B.L40000 .XXXXb20000 .10000 图B.1鼠氟草二酸（0.2ngmL）和鼠氟草酸（0.1 ngmL）标准溶液MRM色谱图
