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1、组织学 绪论,第一章组织学绪论,提 要,组织学的内容和意义组织学发展史和当代组织学组织学的学习方法组织学技术简介,一、组织学的内容和意义,人体解剖学,光学显微镜 放大40倍,组织学研究哪些内容？,放大400倍,细胞,什么是组织？细胞群+细胞外基质,上皮组织结缔组织肌组织神经组织,：四大基本组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官。,器官,小肠HE切片,组 织,学好组织学的意义,促进了生理学的进步 是病理学的基础 促进人类对自身的深入了解,二、组织学发展史和当代组织学,1、光学显微镜,简称光镜（light microscope，LM）,1590年前后，荷兰眼镜匠詹森（H.Janssen）发明了世
2、界上第一台光学显微镜。1665年英国科学家罗伯特胡克改进了复式显微镜，并发现了植物细胞结构。,cell,意大利人马尔比基观察了脾、肺、肾、表皮；列文虎克发现红细胞、精子、肌纤维；格拉夫发现卵泡1801 年比沙提出“组织”概念,精子涂片,卵泡光镜图,红细胞血涂片,提出：施万、施莱登（1838、1839）内容：细胞是一切动、植物体的基本结构和功能单位；细胞内进行着复杂的化学反应；新细胞由原有细胞产生,2、细胞学说,3、电子显微镜,简称电镜（electron microscope,EM）发明：1932 年 卢斯卡、科诺尔，使分辨率提高到 0.2nm超薄切片术（5080nm）超微结构（ultrastr
3、ucture）：即细胞膜、细胞器、染色体等亚细胞结构,4、当代组织学,新仪器、新技术的发明和应用免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景,审视角度 组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞 细胞水平：主要细胞的分布、结构特点（含重要细胞的超微结构）及功能2.形态和结构相统一 结构是功能的基础，功能是结构的必然表现3.培养观察能力：重视实习课和图像观察 培养空间思维能力：将二维图形还原为三维构像,三、如何学好组织学,四、组织学技术简介,（一）光镜技术,石蜡切片术（paraffin sectioning）：取材、固定、脱水、包埋、切片（5 10 m 厚
4、）、染色苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining，HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色 嗜酸性（acidophilia)：易被酸性染料着色的结构 嗜碱性(basophilia)：易被酸性染料着色的结构特殊染色,HE染色，垂体远侧部,镀银染色，大脑皮质神经元,（二）电镜技术,1、透射电镜术（transmission electron microscopy,TEM）用于观察组织细胞的超微结构 戊二醛、锇酸双重固定树脂包埋超薄切片（50 80nm 厚）电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅）根据电子束在不同结构上被散射
5、程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）,透射电镜图，浆细胞,2、扫描电镜术（scanning electron microscopy,SEM）用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片,图8 扫描电镜图，血细胞,1、一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到。糖类：PAS（过碘酸-希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈紫红色。,（三）组织化学术,过碘酸,紫红色的反应产物,糖 多醛,品红硫酸复合物（希夫试剂，无色）,图9 PAS反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒,2、免疫组织化学术：,图10 免疫组织化学原理模式图,图11 免疫组织化学（荧光素标记）毛细血管内皮细胞呈vWF阳性,图12 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记）胰岛B细胞呈胰岛素阳性,图13 免疫组织化学电镜图示上皮细胞膜MAM6蛋白（A 胶体金标记 B 辣根过氧化物酶标记）,图14 原位杂交 主动脉平滑肌细胞呈弹性蛋白mRNA阳性,即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA）,3、原位杂交术,图17 体外培养的HeLa细胞相差显微镜图,4、细胞培养,图18 体外培养的平滑肌细胞（免疫组织化学染色显示肌动蛋白）,图19 实验中的组织工程耳,5、组织工程,
