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1、ICS65.020.30CCSB44实验动物学会团体标准T/CALASxxx-202x实验动物猫外科解剖操作规程1.aboratoryanimal-Operatingrulesforcatanatomy（征求意见稿）202x-xx-xx发布202xxxxx实施中国实验动物学会发布1刖S本文件按照GB/T1.1-2020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国实验动物学会归口。本文件由全国实验动物标准化技术委员会(SAC/TC281)技术审查。本文件由中国实验动物学会实验动物标准化专业委员
2、会提出并组织起草。本文件起草单位：吉林大学、大连医科大学、中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。本文件主要起草人：权福实、袁宝、王亮、李昌文、陈健、任文陟、胡进平、高安崇。实验动物猫外科解剖操作规程1范围本文件规定了实验用猫外科解剖前准备事项和解剖操作的目的、要求、原则、生物安全及废弃物处理等内容。本文件适用于实验用猫的外科解剖操作，也适用于在生物学、医学专业教学与科研，在解剖学，组织学、病理学相关实验过程中进行的猫解剖。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修
3、改单）适用于本文件。GB14925实验动物环境及设施GB50346生物安全实验室建筑技术规范GB/T35892实验动物福利伦理审查指南GB/T39760实验动物安乐死指南GB19489实验室生物安全通用要求3术语和定义以下术语和定义适用于本文件。3.1解剖anatomy借助解剖器械（刀、剪、锯等），采用切割的方法，通过肉眼观察，来研究动物各器官的形态、构造、位置及相互关系。3.2器官Organ几种不同类型的组织经发育分化，并相互结合，构成具有一定形态和功能的结构。3.3系统system能够完成一种或者几种生理功能的多个器官，按照一定的次序组合在一起的结构叫做系统。3.4人类疾病动物模型anim
4、almodelofhumandisease生物医学研究过程中所建立起来的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象及相关实验材料。4生物安全按GB19489规定执行。5解剖前准备5.1 动物的准备5.1.1 解剖前单独饲养进行解剖之前可用方便移动的笼具进行单独饲养。5. 1.2解剖前检查检查项目里包括常规检查、血液、生理和生化检查。a）常规检查：包括视诊、听诊、触诊及体重测量。b）血液：白细胞、红细胞、血红蛋白及血小板。c）生理：体温、呼吸及心跳。d）生化检查：检查项目包括ALT、ALKPTP、BUN、CRE、GLU等六项。5.1 3除毛去除解剖切口区域内的被毛（逆毛方向进行），然后用剃刀或刮胡刀等，
5、顺毛方向剃毛。5. 1.4消毒消毒包括对注射及穿刺术部的消毒和解剖区的消毒两种。注射及穿刺部位的消毒。常用的消毒程序为局部剪毛一5%碘酊涂擦一70%酒精脱碘一实施注射或穿刺术。解剖区的消毒。目前临床上常采用5%碘酊2次涂擦术部消毒法和新洁尔灭或洗必泰溶液消毒法两种方法。a）5%碘酊2次涂擦消毒法。消毒的步骤：局部剪毛一剃毛fK2%来苏尔洗刷解剖区及其周围皮肤f纱布擦干一涂擦70%酒精一第1次涂擦5%碘酊一局部麻醉一第2次涂擦5%碘酊f隔离一70%酒精脱碘一实施解剖。c）新洁尔灭或洗必泰溶液消毒法。消毒步躲：剪毛一剃毛f温水洗刷、擦干一0.5%新洁尔灭或洗必泰溶液洗涤2次、擦干一实施解剖。切口消
6、毒应注意：消毒一般应从中心开始逐渐向周围涂擦，但在感染创或肛门等处消毒时，则应自清洁的周围开始，再涂擦到感染创或肛门；口腔、阴道等黏膜均不能耐受碘酊的刺激。因此，宜用刺激性较小的消毒剂，如2%红汞溶液、2%雷佛诺尔溶液和0.1%高镒酸钾溶液等。5. 2人员的准备操作人员在更衣室内更换专用的衣裤和鞋帽、口.罩，以免将外部灰尘带入室内。必须遵守以下原则：1）帽子要盖住全部头发；2）口罩要遮住口和鼻；3）上衣袖口平上臂的上1/3,下襟放在裤内；外套长袖手术服：4）操作人员的指甲要磨平，剪短，洗净后还需消毒水消毒。临床上的标准就是用苯扎溪铉水溶液浸泡3-5分钟；5）手臂化脓性感染和患呼吸道感染者不能参
7、加。5.3器械和用品的准备对猫实施外科解剖所使用的外科绷带、手术服以及医疗器械要经过高压蒸汽灭菌。分离动物体组织的手术刀、手术剪、镒子以及扩创钩、止血钳等根据不同的内容而选择不同型号。而部分解剖选择一种连柄的手术刀，这种手术刀韧柄结合在一起，持刀方便且切割力度容易掌控，对于切割皮肤组织筋腱等硬组织非常好用。而再切割皮肤下的软组织时一般选用一种刀柄和刀片可拆卸的手术刀，因其材质特殊，一般不用于分离组织或切割坚硬的组织。为了减少出血量，加速止血，也可选择使用动物专用高频电刀。6.外科解剖操作规程6. 1原则解剖观察应由表及里、先实质器官、后空腔器官。解剖过程用测量专用尺对器官的长短、直径及厚度等进
8、行准确的测量，并做好记录，拍照留下图像资料。6.2外形观察解剖前首先进行外形观察，判定其健康状况。6.2.1皮肤观察皮肤是否有皮疹、痂皮和溃疡等现象。6.2.2粪便观察是否便秘或下痢，并注意形状、内容和颜色。6.2.3口腔观察口腔是否流涎，有无吞咽困难，口臭，检查口腔、牙周是否发炎。6.2.4四肢观察四肢有无脓包、趾部损伤、跛脚。6.2.5肛门观察肛门是否清洁、无红肿、无结痂、无脓包。6. 2.6精神状态观察精神状态，对外界刺激的反应是否正常，饮食是否正常。6.3 麻醉实验用猫解剖前需要进行全身麻醉。（推荐：戊巴比妥钠100nIgkg静脉注射麻醉）。6.4 动物安乐死猫处于深度麻酹后暴露出一侧
9、颈总动脉，两端用止血钳夹住后穿线，用剪刀向近心端剪一小口，将动脉导管向近心端方向插入，用线将血管和内部插入的导管一起固定，打开近心端止血钳，开始放血，待血液流出速度变慢时打开另一端止血钳，继续放血。为使放血彻底，可将动物股部垫高或轻轻挤压动物身体。6.5 内部解剖6.5.1剪开皮肤放血处死后，动物置仰卧位，沿腹中线将猫皮肤剪开。6.5.2观察皮肤表面摘出下腹部的皮肤和乳腺（雌性）。6.5.3观察浅表淋巴结观察浅表淋巴结有无肿大、充血、出血及粘连等的情况。6.5.4盆腔内器官观察6.5.4.1腹壁：将腹壁从耻骨前端至胸骨剑突沿中线打开后，沿最后肋骨的左右季肋部及下腹部的左右肠道外角剪开，将腹壁向
10、左右翻转。观察有无腹水及腹膜粘连。6.5.4.2外生殖器：检查外生殖器之后，在耻骨联合接缝部切断，暴露盆腔。6.54.3膀胱：膀胱内有尿液时，挤压出后从膀胱颈部切断，摘出。6.5.4.4生殖器官：雄性动物一从阴囊中一起摘出睾丸和附睾将其分离，观察大小、硬度等。观察前列腺的大小、色泽、硬度等，将其摘出。雌性动物一摘出左右卵巢，观察其大小，卵泡状态等。将子宫及阴道周围的脂肪和血管分离后一起摘出。子宫和阴道可从子宫颈的外子宫口进行分离。6.5.5腹腔内器官观察6.5.5.1脾脏：摘除脾脏，观察色泽、大小后轻轻牵引，切断胃脾及肾脾韧带后，切取与脾脏相连的胰腺约2cm,分离脾脏和胰腺，切开脾脏，观察切面
11、，有无穹隆，脾小梁与滤泡的清晰程度等。6.5.5.2切除消化道：观察胃、小肠及大肠。在贲门附近切断食道，从近心端至远心端将小肠及大肠切离躯干部，切除肛周的皮肤，保留肠系膜，胃肠一起摘出。6.5.5.3胃：胃粘膜的观察方法把幽门用缝合线系紧，从贲门处用动物灌胃注射器适量注入10%中性福尔马林，将食道用止血钳等夹住，切离。把胃浸入10%福尔马林液中，约15min后，沿胃大弯切开，用生理盐水轻轻漂洗，观察粘膜面。6.5.5.4肠管：肠道的观察固定方法无特别指定时，通常先取十二指肠、空肠、回肠、结肠中段各2cm。加标签后用无菌纱布包好放于相应位置。其余部分沿肠系膜对侧部切开，用生理盐水轻轻漂洗后，观察
12、粘膜面。若发现异常变化，再在异常部位取材。6.5.5.5肠粘膜：肠内充满内容物时，轻轻推出后，从十二指肠断端或肛门用动物灌胃注射器，向肠道内注入适量10%福尔马林，再将其浸入固定液中，给15min后，从十二指肠近心端至肛门部沿系膜对侧部切开用生理盐水轻轻漂洗，观察粘膜面。6.5.5.6淋巴结：摘取肠系膜淋巴结。6.5.5.7肝脏、胆囊：将动物头部向上，躯干保持倾斜，切断冠状镰状韧带及肝门部血管等，摘出肝脏。观察各叶的膈面、脏面及胆囊。6.5.5.8肾上腺：分离左右肾上腺周围的脂肪组织等并摘出。65.5.9肾脏：观察肾脏周围淋巴结有无异常，有无尿路扩张等之后，在肾门部摘出分离肾周围脂肪组织，并摘
13、出肾脏。观察色泽、大小等，切开肾脏，观察色泽，三层结构的边界的清晰程度，肾盂的状态等。剥离被膜，观察其难易，在被膜与实质粘连时，不要强行剥离。6.5.6胸腔内器官观察6.5.6.1暴露胸腔：提起剑突，沿最后肋骨剪开横膈膜后，将左右侧肋骨沿肋软骨结合部向颈部剪断后切断胸锁关节，切开胸骨及肋骨，然后观察胸膜及包括胸腺在内的胸部器官。检查与胸水等异常内容物有关物质的量、色泽等性状，取胸骨时，尽量沿肋缘切取。6.5.6.2摘出胸腺。6.5.6.3心脏：夹起心底部。检查心包色泽，光滑度及心包积液的量、色泽等性状后，观察心底动静脉。切断心底的动静脉的起始部，摘出心脏。必要时可将心脏沿前或后室间沟平等于左右
14、心房及心室切开，检查血液量、心内量及瓣膜有无异常。6.5.64肺：把肺与气管、食道剥离。观察肺的背侧面和腹侧面，必要时也要检查切面。6.5.6.5腺体：摘取唾液腺（主要指颌下腺）及颌下淋巴结后，切开颈部的胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌，暴露气管后，沿下颌骨的连接，在软颌和硬颌交界处切断。切断舌骨关节后，将会厌、气管、食道、甲状腺一起摘出。然后从气管侧面剥离甲状腺。必要时切开气管和食道，观察粘膜。另外，甲状腺可在10%福尔马林中固定一夜后，从气管上分离。6.5.6.6血管：摘出腹主动脉。6.5.7头部器官观察6.5.7.1眼球及视神经：摘出眼球和尽可能长的视神经。对于眼球原则上是用注射器从角膜边缘注入适
15、量2.5%戊二醛固定液，再放入2.5%戊二醛固定液内。65.72脑：剥开头部皮肤，使颈部弯曲，切断头后部肌肉，切开后头骨和第一颈椎关节部，剪断脊髓。简单剔除左右咬肌后，将头盖骨除去。摘出并观察脑组织。观察脑底部的垂体，划开被覆于其上的膜，把垂体轻轻向上撮起、摘出。6.5.8四肢肌肉、神经和骨骼的观察6.5.8.1肌肉、神经：剥开左大腿部皮肤，观察露出的大腿二头肌后摘出，此时，连同附在其内侧的坐骨神经一起摘出。6.5.8.2骨骼：去除左侧大腿部的肌肉，露出大腿骨，摘出整个大腿骨，在股骨头上直接切断，并观察露出的大腿骨的股骨头及切面色泽等6.5.8.3脊椎：取出颈（颈椎第3-5节）、胸（胸椎6-8节）、腰（腰椎3-5节）三段脊椎7动物尸体处理方式解剖结束后，动物尸体及废弃物需要根据实验室生物安全防护相关要求进行集中无害化处理。8档案管理记录解剖全过程，动物信息、解剖顺序，器官状态，操作时间、日期和操作人员等。
