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1、硕士老住卷文及其致病机制研究DioCnMdnnfxZmutMI大小8Bio1.ogica1.CharacteristicsofGrayMo1.dofGinsengandPathogenicMechanismSbenyangAgricuhura1.UniversityMarch2016独创性声明本人/明本论文是我个人在导伸指导下完成的研汽工作及取得的成果.尽我所知，除了文中特别体注和致谢提到之处外.本论文不也含JttHI人的研尢成果和已姓发表的文字表述，也不包含本人或他人为获得沈阳失业大学成其它故力机构的学位、记书等而使用过的材科.本论文对勺我同工作的同志为本研究所做的贡欹均己做了说明并我达了试
2、禁的谢ftS时间：年月日导师签名:时皿年月日关于论文知识产权和使用授权的说明本人完仝/解沈阳农业大学行关保Wf、使用本校半业生学位论文的规定.即本论文知识产权单位为沈阳农业大学：沈阳农业大学有权保拓本论文的ftU页文本和电磴介崂文本，有“允许也人代阅和附阅本论文各种文本，有权采用影印、缩印或扫描等方式红制、保存、汇Jtt本论文.权以不同方式在体上发表.传播本学位论丈的内容.（保宙的学位也文在I幡后建守3D研完生卷名：时间：隼月日导师芨名I时间1年月H基金项目本论文得到了以下项目的资助：1 .衣业部行业科技专项(201303111)：人参产业化技术研究与示范。2 .沈阳农业大学研究生创新项目(2
3、015)目录熟耍.IABSTRACT2第一章人参灰毒病及灰前篇他致病机制研究进展5I)、Aq.F.、,f51.1 参简介51.2 人英级树的发生-:未定义书签.1.3 人参庆18病的危杏一:来定义书家.2次俯的也研冗进展._.72.1 72.2 版Iiee1.布生物学特性_.3的h(来定2.3.1 灰前的抱的侵入过程.暂决未定义书家.2.3.2 次前笥胞优手出勤加收程序性死亡H*来定义书宴.2.3.3 前5胞毒素的效栖作用暂褒:未定义书笠.2.3.4 灰筑曲池草酸的致茄作用*未定义书签.2.3.5 的匐他送住辄的致病作用H*朱定义书筌.2.3.6 版1饱细胞续降解雨的致病作用H*未定义书家.2
4、.3.7 灰前的胞果皎IW的致病作M.Iti1.t未定义书笠.2.3.8 版前的抱纤雄发作，的致病作用Iti*未定义书签.2.3.9 灰韵曲苑的信号於导得恨:未定义书签.3问IS与辰里.12第二章人参灰蠡病菌生物学及其致病性比较研窕_.121 才-j方.-.-.-.121.2人卷灰探帆匕校生物学研亢131.2.1 ifXj”.131.22温度对蜩时的影响131.2JPH值对病I1.S的影晌131.2.4宗源书树曲的影响.:来定义书筌.1.26 弑源对病帝的彩响.IH1.来定义书笠.1.27 6光黑对我的的影晌.-.Iti*未嵬义书宴.1.3灰奇韵致病性比较131.4数据分析142结果142.1
5、 人吞灰百硝菌生物学特性比较-.142.1.1 1IiAZ刃JI，2.1.2 温度对踌丽的彬响152.1.3 PH对他用的影响-152.1.4 碳源对我M的影响17216光照对灰病菌的影峋172.2 灰面荷也不同菌株的数场力”IHt:未定义书签.1.1 .1灰前外胞不同倒株对人辱叶片的致病力i172.22 灰珀匐他不同1林对草偿果实的较我力.朱定义书筌.2.23 灰0fij抱不同演株对雨茄果实的钗晒力一储：来定义书家.3结论与时论18第三难人参灰耳做ISSR标记体系的建立及遗传多样性分析.奥未定义书鬟.1材料。方也MMwMM1.I材料一：未定义书筌.1.1.1供试曲株.沐定义书筌1.13仪潺*
6、!未电义书奖.1.2方法IMHtatX*1.1 .1齿叙:的培并与模板DNA的加番.H*未定义书签.1.22 !SSR反应体系和反应参数-.It来定义书婆.1.23 各叫初退火淞度优化及引物谛选.Iti*朱Jt义书笠.1.24 4电泳谱帝的记隶及数品统H分析”.得慢:未嵬义书签.2 结果2.1 ISSR优化体系的建立与如增效果H*未定义书筵.2.2 ISSR引的的筋通与PCR扩拊玷米.朱定义书签.2.3 聚类分析结果与13传相似性分析-.Itm朱定义书笠.3 ?/i讨错R-未定义书*沈阳业大学WH:学位论第四章人参灰带病器病组织细胞壁降解而动态及其影响因素储除定义税!二I材料与方法原定义书筌1
7、.1 供试材料”深定义书维.1.2 活体外IH胞壁除蟀危的提取-未定义书笠.1.3 活体内如胸壁降解信的提取幡恨:未定义书笠.1.4 缰麻般降解灌活性的测定方法三*X*三IAI七聚半孔W!精微的(PG)Ij聚甲坛半孔端峥酸侪(PMG)活力测定WH*未定义书冬.1.4.2枚甲超纤椎素两(Cx)5.简的WHHft活力测定:未定义书签.1.5 人参灰骞娴胞谏障解那条件优化WR!*XMI.1.5.1的&定1.52旗将条件的影响幡奥来定义书筌.153增度的影晌未定义书家.2结果Wft!未AXM2接触人卷灰存病薄后叶片中期腺球降解院活性的变化4H*未定义书签.2.2得体外细胞蜃降第侪产生维件优化.-.幡决
8、俅定义书签.2.2.1 培养时间对细胞壁降*的产生的Bj啊-惴*来定义书家.222震然条件对蒯M1.St降解他产生的影响!朱Mt文书签.123祝境对细胞空降竦IW产生的影响惴*未定义书奖.2.2.4 pH对细触壁降用假产生的影晌!未Jt义翎13结论与讨论.俅定义书签.第五堂细胞壁降解彼与人参灰塔病雨致病力相关性研究.幡误:未定义书签.I*I方法1.1 HH1未电义书签.1.2 灰尊朗致病性比较M!未J+义械.1.3 活体外组脸谯降蟀粉的提取一未定义书筌.1.4 活体内正咆愫降解佛的搬取来定义书签.1.5 细胸壁Pf解侑活性的测定方法惴*来定义书釜2WiJR1*!未嵬义书婆.2.1 灰奇窗致构性
9、比较H*未定义书签.2.2 通体外灰的目施续Ifi跑障解醉活性与致甥性关系._一_!来定义他.2.2.1 efPG活性.*：来定义书冬.2.22 I*G系2.23 版前的胞PMG活性-未嵬义书婆.2.24 4PMG活性与致病力的关系I1.1.2.25灰Iii曲但IMiWHf*活性-226fte期作解活性与致物力的关系It恨:未定义书筌.2.2.7灰IIIfiJ饱CX活性.帽决未定义书筌.2.23CX活性与致病力的关系”橘出未定义书笠.2.3，体内灰葡萄把蒯SISt降解IW活性与致栖性关系m*未定义书笠.2.3.1 PG、致他力的关系W!械义桃232 PMG.，致科力的关系tt*X*23Ji(f
10、i3WJn;IWij致助力的关系.幡修：来先义书签.233 .4Cx与致病力的关系.I1.mt义书系2.4灰葡萄也生长质与致病力的关系未嵬义书裳.2.4.1 灰前的胞丽丝生长未定义书签.2.4.2 灰简曲也曲绶I：.:未定义书签.3结论与讨论.幡恨原定义书禁.-t24致谢.一俅定义书筌攻读硕士学位期间发表论文-30IVCONTENTS摘要IABSTRACT2第一章生觎类衣崩诉素的作用及其致病机制研究进展5I芜IK关化合悔SU茶津美化含两扁介一-5茶期美化速化拄谖.一.一一.一一一一一一-62制依人留聿索的允股机W研g2 .ift)t*j一一，1-，-73 -a-aat*-*a(aa(三(*三t
11、af(*三a三*a1.(1.*-6H遢与展型“一一一“一一12第二章光对花生疮梅病I雨生长发行、毒素含疑和致病性的影响12It!,1JhOiaaxaa*MBm(Marta*aM*aMa三*a三a(Maaa-aa*I3“科一-131.2银萩嵌K定蜒力出.-131.2光电杀弁对病室得生长发育的蝌1.一一-一.一.“-”.-.-/J1.2.I光烧对烧康良物找生长,产他及他了萌发的影响-131.22比强对我I曲倩位生长、产的及施丁萌发的影响-13I.2J光照时向对病草曲菌蛭生长、产胞及毡子萌发的影响13t.3比懿奈件对花生延会铺编盒次汽盘的崔也.一.一_.一.一3I3IfiIfe1由*、Iftft,J
12、it?响a(1(131.3.2Xt4q1I力，3*.fhH,JC141.3.3U11fJ1N，1IS*1.,1Ji1.MMB*BaMM，,Jt卜fcft?rf?Xf1.?,4aaM/dA-，一一，1-IJ2FAM1.142.1 %照条件对拿戒儡*长双汽的怅京_.一.一_.一._一._1.1 .1光版对我曲曲值丝生长产布及池子明发的影响142.12 光强刈病康曲微生K产饱及他萌发的影响iIS2.13 光照时间对病原的苗蛭生长、产胞及抱子萌发的影响IS沈阳农业丁士学位论文2.2 龙府菱弁财稗%W。分成加费也.一.一_.一.一.一一.一172.2.1 光一对洞j光零素合成的影响.172.2.2 JA
13、A|dy/.0a*2(1.43SOD1.活性分析20I4.51.P(.)IiG1*1.U20I4.6POD夕Ai斤20i7,Zt，r21，：1.6花2域金虢敬寿率对肉:除含敛的泼审一-.2/2站臬“一一,“一,”一“212M1.傅屈性分策，IIP1.11：，ti212.1bf，r2二I3“：f1./tr1222.11fI，*0*v*0v22I5POIYT222.1.6APX曲活性分析222.2花生庵梅酶的君*W不科松双嫩球的般0222J在支酸麻牖前说豪N下科热织西班分农科殷朝一“_“一-22第四章花生寤病毒素对活性也产生幼杳及细息亡的作用机制23IJ方1.itaI*a-aaaaaMaMNMMa
14、NMnNBNaanM*aII123SM补一“_231.2a衣掇取&定思力法.,“.一一一“-23/J侵冷收取样_231.4环怦K黎位&寤.“.一.“.一.一.,.一.“.-231.4.1过辄化氢检测-23If”251.43取线态式也测-23V1.沈阳业大宠雄十学位论文2FAJi1.242.1/而?城二二二二二二二一二二二二二二一.,二二Z二二二二二二二24三1.1/f，r*3”一-(IIfII-(e24IJM科一-24t.2詹案犍取收定坡方注.U参考文献24攻读硕士学位期间发表论文30V1.1.摘关位词：ABSTRACTKeyword:沈阳农业大学领士学一-女第一章花配类真菌毒素而作甫及真致病
15、机制研究进展花假类在曲海索足由口府产生的类只有光域性并乩徒够产生活性辄的有色化含物.Jt包括被用于长学，农业.材料科学以及在自然界中具有用卷功能的化合物.近年来和杵对共研究的深入.在尾施苗屉、杨格强陋及板网也税等引致植物病古的硒朦的中发现花喀类“荫毒素在桁吼菌，机构在作过程中发挥衣怅妥的软柄作用和格力作用.为病炭菌在植伤体内诙如外养及钠陵倒的定植起到或变作用。I花醍类化合物概况I1.花期类化合物简介MtrtMkmiZ.1.ounJW.Ptacrcuk2MK11ww*tnag”iZJ1.RkrrrMkvy&(heyjtmI9W.63(U;I-35.UIIittM1.户2.4hMECK2Pk)kM
16、1.va1.n1f3%nnurB)*eTmRrMimhpSpnrrrBrrtn“i%11.北叨Igu优花梨类化合物pcocnwuinnnoid.PQ,具有相同的3.10二地第49K玷构图I),由于泥SZ为五环人铺生色网结构，因此又被移为抗祖炎色东，广泛分布于植物.动物和微生物体内.供中大部分由广囊窗门.半山或类等”防产为I&|必依烟花忸用好结构闾jW能团的取代位置及H化学形式可E像色索分为弗米苗秦皇,交为他诲索型及其他类型.弗莱西索型在母体结构的2.6.7,I1.位一甲氧施取代,或者在6,7位由次甲氨菸取代，在1位和2tZWa,在12a和Ub之位存在位上结构,包括弗莱茵发(PhkiChmme八
17、技胞4：(CIadixhromc),Ift1.t腔候素E1.siiwchmme)、尾把附索ICCrCoSPorin)和竹红的嫩，(HypocrcIIins)等.交钱胞梅素F在母体玷构的1.I2a,12b位有炫基取代，或W在I.2,11.12位连行依桥.包括交链饱毒毒素(A1.1.emarin.I.II.I1.D、交山花即(A1.1.emaric1).J1.他类型Ii括存在于贯叫金丝It1.pferiumwnnnih花中的金丝桃素1.S1.ructere*ffui1.pkrr*Mn%9-2-ptfr*kvauinmnm(rfMdIMTvrin0dMim沈阳我业大学项土学位论Z1.2花酸类化合物理
18、化性质范也先在条而索大部为红色或紫红色用体,在仃机溶剂中的溶解度不向，大都程橙色tt1.户1/MvnjnGUh.JhniM1.S-4;tmyttnykkh.Ctne1.PGHVrm+.mdpotrZtk3”小5eofbePbJ“yrhocfCeraMWd.*xemRMNriNmiI；Saiun1.1.ycrnn/jvn,.Tia|MrK*w*In:IErrMnCnMr1.Pmhvuctf*MbyHchH.KUW.uadTtfnMCHXu:SmMXrvW1.F叩I-?!.Mfct5;-.ittt*nARJM分圻AH1.用什辍*我示丸”.化学KH.WK555*6-t?红色,发出红色黄光,还原态时中
19、.黄绿色.并发出晚觉的绿色荧光（触.1.红外光溶UR）.核梃共振:七清.NMR）和X-射技衍射试验均证前该类化仑物中含疔附轻堪,并H存在分子内级怯,遇改变为绿色,加入酸性溶剂后又恢复红色,颜色反应灵蚊，旧被川。枪破指示批本对/般类1.（曲翼的结构研亢过程中发现.4“粕体系中存在H-1.跋迁和分子内的帧子传递,由此在紫外可见光谱中才4Wnm.53Onm和570IUn三个特征吸收峥.aMA由产生的光敏性非JB化合物TJhNPhoUXK1.imedNr,ICrKqUjnotfft1.CiChCRctrcaA1.tcichin1.r1.oimAhEaXin%AttfrtWfUi*p.SfrmpMw“N
20、iyMMniPaI1.ZfeSfmwyhpp.AhCeMic1.a1.(2OQ5jCcvp(riKocercoodn/Xoe1.iMXcrcrnSa，Z“MAumkifft7xora(vmn6”R1.RjjcnCMPhMiIICC1.ajmpfMiiiiiirU1.*MUM,1.1.1.Uft1Wheatph(cnrrxneeCUd1.XhnMntfCWIMAnMrAorkijP1.ttucn).ofpUnt:timodnguv.R必M)OandJaUM1992)UVrne1.aH1987)EntiWphJckhnMneCwffiPr11iph)te%anPh1.vichrvmeherbaru
21、mCmswWiUMIpMeikudp*Hma1.eridYmhihan1.ad4975)EMmnsfJk11vpcdc%S1.=fMMpXSIconvo1.v1.iPMbU1.XfBOrCi1.rUK1.khvnAIuMKie1.a1.(2005).WeKrI疝”987)Ihpocn-IkiDiwu(19951.FAntHypocfe1.1.in*umwfPjbagcnofMmhe1.XsA1.Stack1,1.c(qun*ncsG早珀Am*fxHyfMMiycvt4Pp.Shiraiuhumhwin)是指在染料和*t的作用下.生物学过程中或细胞受可见光照射后产生的变化、搅伤接至死亡的现象，化
22、学上表现为物质受到m化而降姊，乂称为光动力学作用phoi)umkaction),在光物作用过程中H接吸收光的染料称为光敏剂(hoJ(3)|光敌剂在光动力作用过期!中足G.j4WgRMtIo.Arte”H8cct1.covfv)11.ZBi11kw效：5J4-546,IttX1.拄户XY”41.JDP1irtM.,1tn：Ib.SkICCKVPtIO”4H(ARHrJedIW1.ttUbySwiihKC.NeVYafVPkrMnPb.19网pp.7110.(M)光小剂的种类家多,汴植物、劝物.Ia生功物和徵生物中发现的许妥天然产物均为光一滋创(IH1.包拈叶绿索，吓咻和核於初吞立案和躯乙快，以及
23、常用的色制如单比位，业一甲携流和玫瑰红等.光粉N在.光存在下转化为可定村里高.寿命更长的三战态.可通过自由地或能量转移两种类皇的作用机刖送物分f|冏反应.“IR反应一中.：或态九依一Ij还i竹塔底反HWnGgUAW.R1.:：”.w-tuukbtuninb31.%y3m.PhHtvkanFt4w1.险转为还151态，Hi后与划胞大分子(1.!Si.蛋向质或核酸)反应，引起软化技愕、脂质过就Mwwo-化物以及其它化合物的产生。还Ki茶的光敏剂还可以与领反应，产生超微化物0?).过翻化氢)或设基(OH-).mJI4反应.中光敏剂可以通过徙Ift转杵H接与氧反应,可产生高/性的审找态气(,O).Rd
24、icMNT”“ISutu1.m1.cSo1.vtn1.OxyfenMixIproduct*S.CeMP3U相EMx)ChZmCA作为饪他统和标网抱M桁坡荫钦柄过程中的小要因干与其光桃作用过程中产生的有毒性的单戏态第1和超欲叨离子奇不可分.在却明中,由光坡作用导饮的损伤类里是由光桃刑分子定位帽篝和甜菜讥织的出f深泅以及抗领化剂ftttM户1叫：H-MbIIM1.1.h1.P.r.iOipfd1.CFMJnxmx4pfxin1.oxXEEMtKactfjIixdIiAtfkoRmrapvkdefersJmItMoercoponnpkoxni(uySCmocjP1.wxfefnRMi.N.i1.71
25、135I4M.3MWKkMM11ha*Auzudi，“：此1.k*c11raertxIS.Prrykmncn1.Moe“x*.p，“nx，p1*rk3yK-(11minnfqrnfjirawrMuk皿r1111rrvfBIK14.1.IW5MEIB1.U1.户1.2|”h，“,EiDC”dAqKCS.nixi1.in1.kty11AraMitis.rCAMi1.eY.XnI.1.cH.GJY.dZhmJ.Aw*dd1.rh11cArnjnc:4价MhOfdnjfde1.HCQrjEExtFrUIVKkii%y;*xfetry.jrjrrxnvin:rraUccu1.tra%cvCfprrifr
26、Qfi(rm*tBnP-IX.(1.)7SttIMtRI户151：AfTW”“DYEBINDINGANDP”OmDYNAM1.CACn6J.PtQ“01Hg&ZokywuN6N7-5SttIitWe户16：族hfcjP.1.iMY.EUC“tuf1.Y.dd.Sf%ijm-te-PdrkfeMetfJ1.tDerrvA1.ivoArcE1.TkHUS蚱HOnQjetwcrmmJKxnt1.idFUU1.fUrt3ud*nMJ.Pkj4vkrarri1.ioMda；XDft?M2X12d1.*.MtUUI*ih4,PDWJbM1.OpuUCI.Dirot次zt*tr1.d*envmkrib1mcIhxnccrij1.arWturiRiAurw|JJMCg7,nmo1.(y.X02.352.41-5ZMftIMW户噂I：0ubMEI1.叱MUTRP.UpH-t11ck111.PCXkK1.K1Mrkec*xyjrr;ndvp*r11Hi(febyhrfmp4mwi,cv
