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1、花生疮痂病菌侵染对寄主防御酶活性的影响摘要：本文对花生受疮痂病菌侵染后,寄主体内相关防御解系活性的变化进行了研究.目的是进一步认识PA1.（笨丙纪酸解依醉）、PPO（多酚氧化醉）、PoD（过氧化物的）、CAT（过就化乳筋）和SoD（超氧化物歧化府等解与花生疮榭病抗性的关系及特性,结果表明接种疮痴病菌后不同抗病性花生M种体内的防御的活性普遍升高，本试验研究冽定联系在.24-72h内均有G大俏出现，但抗衲品种一般比感病品种防御的活性开高快，且配活性峰值饯离于感病品种。关健词：花生疮揄病：病菌侵染：抗病性：击主防御前前言辽宁花生因品质优良，色泽鲜艳、美味可口、不含黄曲轴毒素等特点，在国际市场上享有更
2、高的声誉。近年来，随着花生.经济效益的不断提高和农业产业结构的调整，花生种植面积逐渐增大，截止2012年仅辽宁省种植面积已突破40万hm?（600万亩），继玉米和水稻之后成为第：大主栽作物（周如军，2013）.随着种植面积的不断增大，花生病需问题逐渐凸显，尤其以花生疮痂病增幅最大，自20H年在辽宁阜新、锦州和葫芦岛等主要产区爆发流行以来，每年都给花生产量造成严重损失，该病害目前已经成为生产上主要病害之一.然而，由于花生疮揄病是近年来新流行病害，对于花生疮痂病的研究国内外主要集中在发生调查、病原学（根岸宽山，1979：蔡学清,2000）.化学防治（方树民,2006）和抗性鉴定（方树民，2（X）7
3、：周如军，2014）等领域，郭陞j:体积(m1.)=1.U的比例加入4倍体积O.1.mo1./1.pH7.0的磷酸缓冲液(SOD)于研钵中，置于冰浴条件下研磨至1.()%(Ctr),20%(SOD)的匀浆液后再转移到I。m1.离心管，混合均匀后于4匕、4(XX)r/min离心IOmin,取上清液即为酶提取液，置4C保存备用。CAT、SOD活性测定按南京建成生物工程研究所提供的检测试剂盒说明书介绍的方法进行测定。2结果与分析2.1病情调查结果从表2结果可以看出，阜花17病情指数较小，比较抗病，且品种鉴定和田间表现基本一致，说明这些品种的抗性遗传稳定。调杳还发现，病菌较易侵染嫩叶，尤其是分枝顶端嫩
4、叶，白沙1016分枝顶端嫩叶发病率高达78.1%,般不侵染老叶，病菌在白沙1016上的潜育期比阜花17短1.d品种感病程度越高潜育期就越短。表2病情调查结果Tab1.e2Theresu1.tofdiseaseindexAA种幺称Vanciies分枝顶端峨叶Theabove1.crIc叶部病情指数茎部病忸指数Diseaseiikicx游窃期1.i1.y病情指数Di*c*ciXrxM2RqpikMtkm2*M3RqMicMkm3平均Amgc白沙!01678.128.39.69.212.410.424.24中花171954.71.72.42.22.14.952.2病首侵染过程对花生防御募活性影响2.
5、2.1笨丙氨酸解第ShPA1.)活性变化图1表明，在病菌侵染过程中，两个不同花生品种的叶片PA1.活性有明显升高，在测定时间范用内，活性曲线都有一个明显峰值出现。抗性品种早花17在接种拖痂病菌24h后，PA1.达到峰值1135Ug,之后迅速下降，72h后PA1.活性基本稳定，PA1.活性与其对照相比分别升高了19.5%,28.4%,15.4%,10.8%,11.3%,8.9%,6.5%,8.0%,8.0%,8.4%,6.2%和4.9%；而感病品种白沙1016在接种病菌后PA1.活性增加缓慢，接种60h后才出现活性高峰997Ug,峰值比阜花17显著低，之后又迅速下降，PA1.活性与其对照相比分别
6、升高/3.8%,9.7%,10.2%,5.7%,15.7%,13.6%,10.4%,4.7%,2.1%,3.4%,4.4%和2.3%。总体来看，抗病品种比感病品种升高的幅度相对较大。2c,e1.斜Iad华妲建Nd-11yoi6c-臼沙1016TR-宰花17CK-17TR01224364S60728496108120132144处理时向Treatmenttime（三）图I病菌侵染过程对花生叶片PAI.活性的影响Fig.1.EffectonP1.activityin1.eavesofpeanutafterinocu1.ationwithSphace1.ofniirac1.idis2.2.2多酚氧化
7、UiPPO)活性变化图2表明，在病菌侵染过程中，花生叶片中的PPO活性变化显著。抗病品种阜花17曲活性在接种处理后I2h内增加比较缓慢,I2h后迅速提高,在36h时达到最大值IO24Ug,之后活性谖慢下降，到72h时趋于平稳，PPO活性与其对照相比分别升高了1.5%,16.5%,36.0%,21.9%,17.9%,9.4%,7.6%,7.1%,9.5%,6.1%,6.0%和8.7%：而感病品种白沙1016酶活性在60h内增幅不大,从60h开始施活性迅速升高，到72h达到最大值91.4Ug,明显不及阜花17活性最大值高，PpO活性与其对照相比分别升高了0.3%,5.3%,9.7%,103%,12
8、.4%,23.8%,6.6%,6.4%,4.2%.5.5%,3.1%和3.7%,上升速度及活性强度均低于阜花17.Is1FS0出)EA二ZOddW1.odd-白沙06CKT-白沙1016TR毕花17CK-9t1.7TR01224364860728496108120132144处理时间Treatmenttime（三）图2病曲侵柒过程对花生叶片PPO活性的影响Fg.2EffectonPPOactivityin1.eavesfpeanutaftericu1.u1.inwithSp1.uiie1.oniaarachidis2.2.3过氧化物等(PoD)活性变化图3表明,在病菌侵染过程中，花生叶片中的P
9、OD活性变化显著。抗性品种早花17接种后I2h内PoD演活性虽有升裔但并不显著，I2h后急剧增加，36h达到最大值82.1Ug,然后迅速卜.降，72h趋于稳定，POD活性与其对照相比分别升高了8.1%,22.3%.30.8%.19.9%,13.9%,10.2%,9.5%.5.7%.11.3%,6.2%,5.9%和6.3%：而感病品种白沙1016中POD活性在48h内变化不大，48h到60h之间活性剧增，之后急剧卜.降，到96h时的于平稳，PoD活性与其对照相比分别升高了7.0%,5.9%,9.5%.10.7%,22.8%.10.2%.3.7%.2.9%,3.7%,3.1%.6.2%和5.2%,
10、PODM活性最大值与平稳后的活性均不及阜花17“75-白沙1016CK-M-白沙1016TRuu-8运)r二。BaFE-1.p一T-辛花17CK-用花17TR012243648607284%108120132144处理时间Treatmenttime（三）图3病的侵案过程对花生叶片POD活性的影响Fig.3EffectnPODactivityin1.eavesfpeanutafteriiHru1.ationwithSp1.utce1.omaarachidis2.2.4过氧化氢II(CAT)活性变化图4表明，在病的侵染过程中，花生叶片中的CAT活性变化显著。抗病品种早花17受病j侵染后酣活迅速提高
11、，在24h时达到最大值9.1.2Umgpro1.,之后活性迅速卜降，到48h时用于平检，CAT活性与其对照相比分别升高了30.4%,68.0%.38.8%,19.0%,16.7%,15.2%,16.2%,20.6%,16.6%,16.1%,16.5%和14.7%；而感病品种白沙1016的活性在48h内增幅不大，从48h开始前活性迅速升高，到60h达到最大值8.47Umgprot.之后活性迅速卜降，到84h时活性基本稳定，PA1.活性与其对照相比分别升高了7.0%,12.6%,14.0%,20.2%,47.0%,20.7%,11.2%,10.4%,10.3%,13.8%,11.0%和8.8%,到
12、达活性高峰时间明显低于阜花17。10GoJd置/己1.二。EB定.1.Vo-1016CK.1二。Bos三运0。S-白沙1016CKT-白沙1016TR-卓花17CK-阜花17TR01224364860728496108120132144处理时间Treatmenttime（三）图5病第侵染过程对花生叶片SOD活性的脂响1.*ig.5EffectonSODactivityin1.eavesofpeanutafterimu1.ationwithSphace1.omaarachidis3结论和讨论抗性鉴定试验证明花生不同品种之间对疮痂病的抗性存在差异，阜花17抗疮痂病，而白沙1016感病严重且潜育期较
13、阜花17短Id。目前，辽宁省花生.主栽品种为白沙106占种植面积的65%-70%,个别地区甚至全部种植该品种(周如军，2013),生产中大面积种植抗性较差的白沙1016是造成花生疮痂病在辽宁省流行成灾的重要原因。病原菌的侵入可流导植物产生一些生理活性物质，它们参与许多生理代谢过程，如氧化反应、木质化反应和对病原物毒素的反应等，防御的系在这些生理代谢中起重要的作用。本试验寄主体内主要防御酸PA1.、PPO、POD、CAT、SOD施活性变化及升高都是在接种后才发生，通常变化规律为2472h内达到活性高峰.随后快速下降，最后在较长的一段时间内持续保持比对照活性显著高的而活性期：不同抗性品种之间防御隧
14、变化曲线、活性峰值出现快慢也不同，抗性品种阜花17酹活性峰值均要早于感病品种白沙1016。另外，同一花生品种主要防御施活性变化曲线也存在差异，不同的防御施到达的活性峰值的时间也不尽相同.抗性品种阜花17接种疮痂病菌后主要防御阱活性达到高峰的时间都要早于感病品种白沙1016,且活性最大值明显高于白沙1016。而感病品种白沙1016酶活性的下降速度耍快丁抗病品种阜花17,说明抗病品种在植株体内能够更为迅速地产生防御醛体系，更为有效的抵御病菌的侵害。综上所述，可以看出花生植株受病原菌侵染后，防御的系活性变化是其抗病性的重要生理生化基础，病菌侵染过程中防御旃在寄生生理代谢中起重要作用，而寄主的抗病性是建立在一系列的物质代谢的基础上，是有关抗病性基因通过表达，来控制物质的产生来实现的。防御施活性可以作为品种对花牛.疮摭病抗性的个重要指标，而病菌侵染后有关防御前基因的表达还有待于今后进步研究。
