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1、输血科ABO型试剂红细胞制备标准操作规程1 .目的为规范A、B、0型试剂红细胞制备的技术操作,保证血型血清学实验的准确性,依据输血实验室管理程序4.1,9(6)条款的要求制定本规程。2 .适用范围适用于医疗机构输血科制备A、B、0型试剂红细胞。3 .职责医疗机构输血科技术人员负责A、B、0型试剂红细胞的制备。4 .原理将已知A、B、0型的红细胞洗涤并配成试验所需浓度,用单克隆抗-A、抗-B试剂验证红细胞血型抗原特异性、直接抗球蛋白实验(DAT)证实没有被抗体致敏后用于血型血清学试验。5 .所需设备和材料5.1 设备普通离心机,血型血清学专用离心机,微量移液器,普通显微镜。5.2 材料已知A、B
2、、0型健康献血者抗凝血,红细胞不规则抗体筛选阴性的AB型血清,单克隆抗-A、抗-B试剂,抗球蛋白试剂。6 .环境条件室温应保持在1827C,湿度应保持30%707 .步骤与方法7. 1取3支试管,分别标记为Ac、Be、Oco7.2 选取已知ABo血型的A、B、。型健康献血者抗凝血各3份,每份ImL7.3 将A、B、0型献血者各3份抗凝血分别加入对应标记的Ac、Be、Oc试管中。7.4 将3支试管离心去血浆,将压积红细胞用生理盐水洗涤3次,去除最后一次洗液后分别用生理盐水配成10%的红细胞悬液,4C保存,7天内使用,使用时根据试验要求再用生理盐水配成需要的浓度。8.质量控制8.1 质量控制操作步
3、骤8.1.1观察配制的A、B、。型试剂红细胞悬液有无凝块,离心观察悬浮红细胞上层生理盐水颜色,判断有无溶血。8. 1.2取试管9支,使配制的A、B、O型试剂红细胞(浓度3%,每管50UI)分别与单克隆抗-A、抗-B及红细胞不规则抗体筛选阴性的AB型血清反应(每管加相应试剂或血清100Ul),鉴定红细胞的抗原特异性。8. 1.3取试管3支,分别加配制的A、B、O型试剂红细胞(浓度3%,每管50u1),生理盐水洗涤3次后做DATo8.2A、B、。型试剂红细胞的质控要求见表9-1.9. 注意事项9.2 用于配制试剂红细胞的血液要新鲜,A型或B型红细胞与单克隆抗-A或抗-B凝集强度达不到“4+”的血液不能用于制备A、B、0型试剂红细胞。9 .2红细胞洗涤过程中应放置不同血型红细胞之间交叉污染。10 .相关文件及表单(略)