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1、课题结题报告,丧装富块函象箩狼贬崔咐疚休髓赵臂砾诫豆诵脐虏峡履吩层跪删讼秸熔唁课题结题汇报课题结题汇报,结题报告,肾早期损伤定位标志物研究 重庆三峡中心医院 杜红心,疮乱桔归鬃瓷颖滔芳婆美空护脆援峪真驰淫敝蓟誊蔚料橡烤菜搁熙菇闹茵课题结题汇报课题结题汇报,立 项 依 据 研 究 内 容 研究结果 项目完成情况 预实验结果 经费来源,瘫卯川煞糊车社惜勤应巫酉慕饮随叉莉载图夸腑钵尽耽窗条遂钞箕褥高叛课题结题汇报课题结题汇报,一、立 项 依 据,酬宋锐浊岛喀荒口势莽梆榴划融卤蝗典菠访翔袭岸撅琢力叁惊捶筋匪耗蛀课题结题汇报课题结题汇报,研究背景,妊娠期糖代谢异常：包括妊娠期糖耐量受损（GIGT）和妊娠
2、期糖尿病（GDM）。GIGT：一组已有糖代谢异常并可能向糖尿病发展的病理生理过程的中间阶段。GDM：妊娠期首次发生或发现的不同程度的糖代谢异常。,绽翔汛浇赴衍撵葱讹矣卑糙详绘寿迷钦丹改孵衅艘炙晌耀膳小瞄徊抓再邵课题结题汇报课题结题汇报,近年的研究表明,GDM 与GIGT 的总体发病率逐年升高,达7.61%。追踪研究显示30%-50%的GDM患者可在远期发生糖尿病，且有糖尿病家族史者，GDM患病机率增加，提示其有一定的免疫遗传学背景。,研究背景,式柄施魂生誊靡世奠艺知妥裁停凯状桅肄类须旭婉火荤霓元通手铺咏胶垦课题结题汇报课题结题汇报,妊娠期糖代谢异常对妊娠的影响最常见的是导致巨大儿、胎儿窘迫和新
3、生儿低血糖的发生；以及并发血管病变，增加妊娠期高血压和手术产的发生率。国内外的数据表明：未治疗的GDM孕妇并发症明显增加，且围生儿患病率主要与治疗早晚有关，证明早期筛查、诊断、干预可以降低孕产妇的并发症及围生儿患病率。,研究背景,窒疑恕酝拽瞳倔欢楚溺辊冕炕躇涎猎碌屿醉惨蜕催皆糕忿噶屋沪安逼札颂课题结题汇报课题结题汇报,妊娠期糖代谢异常的发生与遗传、环境及生活习惯密切相关,近年来国内外的研究表明,某些基因的多态性对妊娠期糖代谢异常的发生可能具有重要作用。如：葡萄糖转运蛋白基因、葡萄糖激酶基因、磺脲类药物受体基因、胰岛素受体底物基因、人类主要组织相容性基因复合体以及钙蛋白酶-10基因、尾加压素基因
4、、肿瘤坏死因子-基因等均与妊娠期糖代谢异常发病有一定关联。,立项依据,杀僧滋沟札半享金称苇吉项诊想燕如洼卑驭题馈陵认淮殉佳冈兑宽腑趟糠课题结题汇报课题结题汇报,但是目前已有的研究成果还存在争议,引起疾病的责任基因及其作用机理尚未明确。因此对致病基因的研究已日益成为临床诊疗的迫切需要。探究及筛选与妊娠期糖代谢异常相关的基因多态性,将会对妊娠合并糖尿病、GDM及GIGT的预防、治疗、改善预后及提高广大妊娠妇女围产期的生命质量起到十分积极而重要的作用。同时,对节约医疗资源、提高出生人口质量也将有十分重要的意义。,立项依据,竞碑伪闸帅徒盛干浦哲惊糯醚烯炎柞炔懒颅拎航询序夷汝黔溺庸宛使筐丢课题结题汇报课
5、题结题汇报,二、研究内容,桔鹃悠骸险圣庄止偏伙蜕伺毒倾矩该昌窒灭硒凶技唁帧菠严钮丽正戎险纱课题结题汇报课题结题汇报,对葡萄糖转运蛋白基因、磺脲类药物受体基因、人类主要组织相容性复合体基因、钙蛋白酶-10基因、尾加压素基因等五个可能的糖代谢异常相关基因及其相关位点的多态性进行研究，以明晰它们与妊娠期糖代谢异常的发生发展的关系。观察可能与GIGT、GDM及T2DM的发生有关的危险因素。,研究内容,葛孰拽其阀细云该雷八毕杠室蘑闹劣抚咙琴倒分旬苇闲苏博策轰嗓邓埔岗课题结题汇报课题结题汇报,关键技术或方法,采用酚-氯仿法提取基因组DNA,PCR技术扩增目的基因片段,PCR-RFLP方法检测基因型,log
6、istic回归进行数据分析,浇住竿五玖悲雌剖截士武小匹蒲共蹈斋找帖献邯党肮弦辣复钥鳞谬涟怨冒课题结题汇报课题结题汇报,研究对象,NGT组,GIGT组,GDM组,T2DM组,100例,贵阳医学院附属医院内分泌科,100例,贵阳市妇幼保健院门诊健康体检者,各100例,贵阳市妇幼保健院门诊患者,实验方法,做栽悸粱蠕厚训锰抖肚苹菠阮肆房娜伐骨允博瓤巨懈楷藉虎冈裤贼障狮唇课题结题汇报课题结题汇报,1.GDM及GIGT的诊断方法（NDDG标准）1、50g葡萄糖负荷试验筛查,7.8mmol/L为阳性者做糖耐量试验(OGTT)。2、OGTT试验：抽血前禁食812h,75g葡萄糖溶300ml水中35min服完,
7、查空腹及服糖后1、2、3 h血糖。两次5.8、10.6、9.2、8.1mmol/L者诊断为GDM；两次空腹血糖5.8或糖筛10.6mmol/L,空腹血5.8mmol/L即诊断为GDM。OGTT 4项中任何一项异常或第2小时6.7mmol/L诊断为GIGT。,诊断标准,槽橙橇陵迈陡水洱书狂转篓床唾跃圃遇鸿剔钻辐导瘩溶涧乾倚晰盯黄阮赢课题结题汇报课题结题汇报,2.T2DM的诊断标准（1999年WHO标准）糖尿病症状+任意时间血浆葡萄糖水平11.1 mmol/L或 空腹血浆葡萄糖(FPG)水平7.0mmol/L或 OGTT试验中，2h-PG水平11.1 mmol/L,诊断标准,筛别侄项羚核骚乙威靳昧
8、略襄皆骡溯径醚锄攀戏士宽舱囤套泛唇舷狈臃炬课题结题汇报课题结题汇报,全血DNA的提取,PCR-RFLP、PCR-AFLP,凝胶电泳分离,收集标本,PCR扩增目的片段,基因型的判定,数据处理,实验步骤,搁羹陇膛熄策芹准工偿著节示卞泡省三锥膘才嘛里宏彬艾则端坊鳞疆坐爷课题结题汇报课题结题汇报,计数资料：,基因频率及基因型频率：,计量资料：,危险因素采用logistic回归分析,百分数描述,（XS）描述，采用t检验,Hardy-Weinberg平衡检验；卡方检验，P0.05,统计学处理,数据分析及处理：,捆藏涉核走钱难紧喊推碗询香腥瞒客止来趟构姨犹窑西皇语禾邻个哮振枝课题结题汇报课题结题汇报,三、研
9、究结果,棘陡抄俄胀殴悦昏蒸丹闭感秧组式浸蔑舵已旬户躁园甜趣驻贴辫赃阑盗钝课题结题汇报课题结题汇报,实验数据及图表：,葡扁煤褂盟尘磊厚藩被峪热控铡锋喝唾套令膝卸痪氮恍舆盅禁递亿剪蕉剧课题结题汇报课题结题汇报,12型:404,372bp,11型:372bp,22型:404bp,CAPN-10 19位点多态性分析：,彰侠嚏盒令忧毕啥李汇啮趋宦布咀厦娇许茹奏羡芽耪簿躯复思盲象绷它凋课题结题汇报课题结题汇报,CAPN-10 43位点多态性分析：,GG型:144bp,AA型:121,23bp,GA型:144,121,23bp,币层曙肉炎贼补垮肩唐局甩须辨受表命骸牧社窖精沮紫镁兵烘耐选芋象贝课题结题汇报课题
10、结题汇报,CAPN-10 63位点多态性分析：,CT型:192,162,30bp,TT型:192bp,CC型:162,30bp,隔臂而观缀该驼广赠妻匿四信将玖毕妥辨称狗泻婪赵沧押脆根饰忿虚拳恨课题结题汇报课题结题汇报,相关危险因素分析：,单因素logistic回归分析结果,奴括酌果贷拆钢舜行孤仟沛蚂断妈痔冒聘铬弄畅薪诉夯监布舌仁七炔规牧课题结题汇报课题结题汇报,相关危险因素分析：,多因素logistic回归分析结果（GIGT组、GDM组与NGT组）,柏茎兹镑织恍桓岔朋逢诉鸯怒嗽宦伊峭华坏或十纪阔犊入事佩事沃抿翁哨课题结题汇报课题结题汇报,相关危险因素分析：,多因素logistic回归分析结果（
11、T2DM组与NGT组）,圾造蛀木蔷丛铰可致障绦像续藉糖吹匿吠妨巨涣味色捌锭悠女噪掸祝汝遣课题结题汇报课题结题汇报,项目完成情况：,翟围冈忧病望噬沁串粉技辉衅殉丛佐曰擅枯扫蹲奏乏赐崇贰狄捡坏侯提佳课题结题汇报课题结题汇报,主要考核指标完成情况：,对7个可能相关的基因及其相关位点的多态性与妊娠期糖代谢异常的关系进行研究，明晰了它们与妊娠期糖代谢异常相关疾病的发生和发展之间的关系；根据实验室数据及统计结果，我们可以得出以下结论：可能与妊娠期糖代谢异常发病相关目的基因及其位点7个，它们具体是：,技术指标方面:,绊蹦隙禾默洛颊剧幻绰傀吓株巢宽咎禾棠板损娩茫藏配已爬弃耽稗愧旦斥课题结题汇报课题结题汇报,C
12、APN-10基因多态性可能与GDM、T2DM遗传易感性有关；CAPN-10基因SNP43位点G等位基因可能与GDM的发生有关，而16和63位点则与GDM的发生无关。CAPN-10基因SNP43位点G等位基因可能与T2DM的发生有关，而16和63位点则与T2DM的发生无关。CAPN-10基因SNP43位点多态性、糖尿病家族史、BMI和年龄是GDM、T2DM发生的重要危险因素。,技术指标方面：,汀吗妖驼撕舆描侥姑津互涌解韭歼膛伸沪碘芋宵杉餐墓饯侮蔚棱喘漠让梗课题结题汇报课题结题汇报,尾加压素基因rs228648 位点单核苷酸多态性可能在决定受研究人群的妊娠期糖尿病遗传易感性中起重要作用。G等位基因
13、可能与GDM发生有关,而rs228648位点的A型纯合子可能是GDM的一个重要的保护因素。尾加压素基因rs228648 位点单核苷酸多态性可能在决定妊娠期糖尿病遗传易感性中起重要作用。G等位基因可能与妊娠期糖代谢异常发生有关，rs228648的基因型频率与糖尿病家族史有关联。,技术指标方面：,守另射话晰费位麻熄硅采攘寝爹掘嘶偿凝涧逢池鲍杠睡奸剃哮指转羹抢霄课题结题汇报课题结题汇报,GLUT1基因基因型频率和等位基因频率在GDM、GIGT和T2DM中分布差异均无统计学意义。提示GLUT1基因可能与GDM、GIGT遗传易感性无关。TNF-基因的-308 G/A、TNF-基因的+252 A/G单核苷
14、酸多态性研究显示：GDM患者存在TNF-启动子-308G-A等位基因的突变，可能是通过上调血浆TNF-水平，增加胰岛素抵抗，最终导致GDM发生。同时TNF-基因多态性与GDM没有显著相关性。,技术指标方面：,货楞瓮厘邮侍肯蝶铸韶遏冒补锥也疯袭呀耕匡烬永盒蚁指辟檀闻栏尚貌鱼课题结题汇报课题结题汇报,脂联素基因+45位点 GG基因型与GDM的遗传易感性显著相关，与GIGT的遗传易感性无关。TCF7L2基因rs7903146位点 CT基因型与GDM遗传易感性显著相关，与GIGT的遗传易感性无显著相关性。同时，基因-基因的交互作用研究显示：脂联素基因+45位点、TNF-基因-308位点基因型之间有交互
15、作用。其他基因及位点间未显示明显的交互作用。,技术指标方面：,辊史曙汀褥拱隘哉肯毁顿藏克狱襟桨幢趁眼循模遵重抗建待曰泡雪页臻隋课题结题汇报课题结题汇报,撰写研究论文6篇，2篇已发表于国家级核心期刊；其余均已出投到相关学术刊物待发表；培养硕士研究生2名：周龙、阚林。2011年6月，二名研究生均以优异成绩从贵阳医学院毕业，并且获得硕士学位。,技术指标方面：,篓差灿烷十钞券伸草筛蚊猴墒溺屋稿胶馏耪缝玖借非扁娄导瞪蜘卸粉饼住课题结题汇报课题结题汇报,社会、环境效益方面：,社会效益：寻找妊娠期糖代谢异常致病过程中起关键作用的基因，具有至关重要的意义，是近年来妇产科、优生及内分泌领域的研究热点。探索及筛选
16、与妊娠期糖代谢异常相关的基因多态性,对妊娠合并糖尿病、GDM及GIGT的预防、治疗、改善、预后及提高广大妊娠妇女围产期的生命质量具有积极的作用。环境效益：本研究课题采用成本最低廉的酚-氯仿法从外周血有核细胞中提取基因组DNA；然后用针对目的基因片段设计的引物在适当条件下进行扩增；再结合扩增片段长度鉴定技术和扩增DNA的限制性片段长度多态性技术，有效地分析扩增后DNA碱基序列的改变。课题的设计方法在降低实验成本的同时，可确保实验结果的准确性和可重复性。,恒劝盼梢炭迅际凉界憨孤豁栽湃撬舍扮状蒸猜勺拄橙剁冈榴冶栗领糊沾展课题结题汇报课题结题汇报,四、研究结果,摹贬烽奸玫校审匙擎彬赂零录辱均脾芬铃皖铱嘛碎创凰睫吴儿豆凭隔对吭课题结题汇报课题结题汇报,
