食管癌CT征像与研究.ppt

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1、食管癌螺旋CT征象与MVD、VEGF及MMP-7表达间关系的研究,前言 材料与方法 结果 讨论 小结,前 言,食管癌的一般概述,消化道常见恶性肿瘤之一最新统计表明,其死亡率在河南省女性恶性 肿瘤中排首位,在男性中排第二临床治疗效果差,发现晚、转移和复发是治疗失败的主要原因,食管癌的影像学检查,钡餐造影:能提供解剖及功能改变,定位定性诊断有一定优势,但无法显示有无邻近脏器侵犯、淋巴结转移及远处器管转移 螺旋CT检查:可弥补钡餐造影不足,得到更多诊断信息,微血管密度(Microvessel density,MVD),1971年 Folkman 首次提出肿瘤血管生成概念血管生成:当肿瘤直径大于2-3

2、mm 时,其营养不能靠原来的弥散提供,需要诱导产生新生血管1995年Weidner等建议以MVD来评价肿瘤的血管生成,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),1996年 Hanahan 等提出肿瘤血管生成开关学说,认为肿瘤从静止状态发展到伴随血管生成的浸润状态,需要突破促血管生成因子和抑血管生成因子所组成的平衡VEGF:最重要的促进血管生成因子之一,基质金属蛋白酶-7(MMP-7,Matrilysin),恶性肿瘤浸润和转移的过程伴有细胞外基质的降解,基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases,MMPs)是降

3、解细胞外基质的主要酶类之一 MMP-7:具有强大的基质降解活性和广泛的底物特异性,在消化道肿瘤发展中起重要作用,研 究 目 的,研究食管癌浸润和转移的螺旋CT表现与 MVD、VEGF 和MMP-7表达间的关系 探讨食管癌浸润和转移过程中宏观影像 学表现与分之生物学内在联系,材料与方法,研 究 对 象,手术病理证实食管癌标本46例(男35例,女 11例,年龄33-75岁,平均55岁)术前均有详细的SCT资料,且没有行针对肿 瘤的任何治疗 术后标本固定、包埋、切片,分别行HE染 色和免疫组化染色,螺旋CT检查,检查设备及药品 美国GE Hispeed Advantage RP22螺旋CT机 美国M

4、CT/MCT Plus高压注射器 非离子型对比剂欧乃派克或优维显,螺旋CT检查,检查方法 扫描前10分钟肌肉注射盐酸山莨菪碱15mg,口服温开水800-1200ml。扫描范围 包括下颈部、纵隔及上腹部。直接行增强 扫描,用高压注射器注入非离子型对比剂100ml,注射速度3ml/s,于对比剂注射开始后40s扫描,期间闭气一次,螺旋CT检查,检查方法 参照食管造影片或食管镜检,病变 部位准直 5 mm,其它部位准直10mm,螺距均为1,重建厚度5mm,螺旋CT检查,原发病灶诊断标准 正常食管壁适当扩张时厚3-5mm,癌组织生长引起管壁增厚,厚度大于5mm,可以是局限的或环形的,明显增厚即形成轮廓不

5、规整的肿块。较小的肿块呈均匀强化,大的肿块如有坏死则呈不均匀强化,螺旋CT检查,邻近结构受侵犯的判定标准 邻近脏器受侵犯表现为食管外壁不光整,脂肪层消失且与邻近器官界面不清,附着面增宽以及局部有软组织增厚及肿块,螺旋CT检查,参照文献制定如下重要器官受侵犯标准:气管支气管受侵犯:气管支气管后壁出现移位、切 迹并表面不规则或壁增厚、气腔明显狭窄主动脉受侵犯:采用Picus接触面弓度大于90、椎前三角脂肪间隙消失或主动脉致密环影中断三种方法中两种同时存在为受侵犯标准心包及邻近胸膜受侵:心包及胸膜的表面不规则、局限性增厚或形成软组织肿块与食管癌肿块相连,螺旋CT检查,淋巴结转移的判定标准气管食管沟出

6、现可辨认的异常软组织结节影即认为淋巴结转移奇静脉食管窝及膈脚后淋巴结大于6mm诊断为转移其它部位大于10mm的淋巴结诊断为转移,螺旋CT检查,结果判定 采用盲法,由两位高年资放射科医生分别阅片进行食管癌 SCT诊断,主要观察邻近结构有无侵犯及淋巴结有无转移,并将结果与手术病理对照,免疫组织化学实验,试剂 鼠抗人CD34单克隆抗体 免抗人VEGF多克隆抗体 鼠抗人MMP-7单克隆抗体 各抗体为即用型,免疫组织化学实验,方法 采用SP法,严格按照说明书上的程序并在专业人员的指导下进行实验,免疫组织化学实验,对照 阳性对照 阴性对照,免疫组织化学实验,结果判定:MVD计算方法:先在低倍镜下(40)全

7、面观察以确定微血管密度最高的区域,然后在高倍镜下(200)计数此区域的微血管数,每张切片选择3个血管最高区域,在高倍镜下计数,求其平均数,免疫组织化学实验,VEGF阳性判定标准:胞浆有棕黄色颗粒为阳性细胞,随机取5个高倍视野(400),平均阳性细胞数10%定为阳性,阳性细胞数10%定为阴性 MMP-7阳性判定标准:胞浆有棕黄色颗粒为阳性细胞,随机取5个高倍视野(400),平均阳性细胞数25%定为阳性,阳性细胞数25%定为阴性,统计学分析,MVD以均数标准差表示 计量资料的比较采用t 检验 计数资料的比较采用 2 检验 相关分析采用spearman检验 一致性分析采用Kappa检验 SPSS 1

8、0.0统计软件包进行分析,=0.05为显著性检验水准,结 果,食管癌SCT诊断结果与手术病理对照,邻近结构有无受侵判断准确率89.13%淋巴结有无转移诊断准确率为86.96%,免疫组织化学实验结果,46例食管癌中 MVD变化范围17.33-41.67,值29.895.36 VEGF 阳性表达18例,阳性率为39.13%MMP-7阳性表达28例,阳性率为60.87%,MVD、VEGF和MMP-7表达与SCT征象的关系,VEGF、MMP-7表达与MVD的关系,VEGF与MMP-7表达的相互关系,SP200,SP400,SP400,SP200,SP400,SP400,讨 论,讨 论,螺旋CT对食管癌

9、的诊断价值MVD与食管癌SCT征象间的关系VEGF与食管癌SCT征象间的关系VEGF与MMP-7表达的相互关系MMP-7与食管癌SCT征象间的关系,螺旋CT对食管癌的诊断价值,本研究46例食管癌原发病灶检出率为93.48%邻近结构有无受侵判断准确率为89.13%淋巴结有无转移 判断 准确率 为86.96%同时所有病例SCT检查均未发现肝脏转移,螺旋CT对食管癌的诊断价值,优点:显示癌肿生长范围 邻近结构的侵犯情况 有无淋巴结转移和远处脏器转移应该作为食管癌患者治疗前检查方法指导制定治疗方案,螺旋CT对食管癌的诊断价值,本研究SCT没有明确显示 3例壁厚度小于5mm的 原发灶 漏诊3例邻近结构早

10、期侵犯;按 Picus接触面弓度 大于90和椎前三角脂肪间隙同时消失,高估2 例主动脉受侵 2例诊断淋巴结转移,术后为炎性反应;3例壁旁 淋巴结转移与原发肿瘤融合及1例小淋巴结转移 被漏诊,螺旋CT对食管癌的诊断价值,缺点:管壁厚度小于5mm的食管癌 邻近结构早期侵犯 壁旁及微小淋巴结转移 需结合其它检查方法进行综合诊断,讨 论,螺旋CT对食管癌的诊断价值MVD与食管癌SCT征象间的关系VEGF与食管癌SCT征象间的关系MMP-7与食管癌SCT征象间的关系VEGF与MMP-7表达的相互关系,MVD与食管癌SCT征象间的关系,检测MV的方法 血管内皮细胞形态学检测 影像学检查,MVD与食管癌SC

11、T征象间的关系,检测MV的意义 许多学者研究发现MVD与多种肿瘤的浸润和转移相关,认为血管生成在肿瘤的进展中发挥重要促进作用,MVD与食管癌SCT征象间的关系,本研究示邻近结构侵犯阳性组及淋巴结转移阳性组的MVD 值显著高于邻近结构侵犯阴性组及淋巴结转移阴性组(P0.05)表明:血管生成可能是食管癌进展的重要促进因素 MV的多少在一定程度上可以反映食管癌 的恶性程度,MVD与食管癌SCT征象间的关系,作用机制 丰富的肿瘤血管网为肿瘤组织提供了营养,加速 肿瘤生长、向周围侵袭和浸润 新生血管基底膜脆弱,易于渗漏,增加了肿 瘤细胞进入循环中的机率 肿瘤细胞侵入与毛细血管伴行的淋巴管,或通过 静脉淋

12、巴连接进入淋巴管,从而促进淋巴转移,讨 论,螺旋CT对食管癌的诊断价值MVD与食管癌SCT征象间的关系VEGF与食管癌SCT征象间的关系MMP-7与食管癌SCT征象间的关系VEGF与MMP-7表达的相互关系,VEGF与食管癌SCT征象间的关系,VEGF的特征 VEGF为一种糖基化多肽性分泌因子 人VEGF基因位于染色体6p21.3,全 长14kb,含8个外显子、7个内含子,VEGF与食管癌SCT征象间的关系,本实验发现VEGF阳性组的MVD值显著高于VEGF阴性组(P0.05)表明VEGF在食管癌的血管生成中发挥重要促进作用,VEGF与食管癌SCT征象间的关系,作用机制 VEGF 是内皮细胞选

13、择性有丝分裂原,与相应受体结合,直接作用于血管内皮细胞,诱导内皮细胞钙浓度短暂升高、形态改变、分裂及运动,影响内皮细胞基因的表达,加快基底膜的降解,从而发挥促进血管生成的功能,VEGF与食管癌SCT征象间的关系,作用机制 VEGF 还可以增加微血管的通透性,使血浆蛋白等大分子物质外渗,形成血管化纤维蛋白基质,为内皮细胞迁移形成了网架,VEGF与食管癌SCT征象间的关系,本研究结果显示,邻近结构侵犯阳性组及淋巴结转移阳性组的VEGF阳性表达率显著高于邻近结构侵犯阴性组及淋巴结转移阴性组(P0.05)提示VEGF可能是食管癌浸润和转移的重要调控因子,VEGF与食管癌SCT征象间的关系,食管癌患者体

14、液VEGF定量检测 一种更简便且适合于临床应用的评估食管癌生长、浸润程度及转移和预测预后手段,讨 论,螺旋CT对食管癌的诊断价值MVD与食管癌SCT征象间的关系VEGF与食管癌SCT征象间的关系MMP-7与食管癌SCT征象间的关系VEGF与MMP-7表达的相互关系,MMP-7与食管癌SCT征象间的关系,MMP-7的特征 又称基质水解素,是MMPs中最小的一个 具有强大的基质降解活性和广泛的底物特异性,包括型 胶原、层粘蛋白、纤维结合素、蛋白多糖、型明胶和 可溶性弹性蛋白等底物 基因定位于11q21-q22,分子量为28KD 缺乏末端的 血红素结合蛋白同源区域,使特异性抑制 剂(tissue i

15、nhibitors of metalloproteinases,TIMPs)无法 与其结合,具有抵制TIMPs活性的作用,MMP-7与食管癌SCT征象间的关系,本研究结果显示,邻近结构侵犯阳性组及淋巴结转移阳性组的MMP-7阳性表达率显著高于邻近结构侵犯阴性组及淋巴结转移阴性组(P0.05)提示MMP-7与食管癌浸润及转移有密切关系,MMP-7与食管癌SCT征象间的关系,作用机制 主要通过基质降解作用,使肿瘤细胞周围的物理屏 障遭到破坏而对肿瘤的浸润和转移直接起作用 通过裂解细胞表面的E-cadherin,从而抑制E-cadherin对肿瘤浸润与转移的对抗作用,间接地促 进肿瘤浸润与转移 通过

16、裂解FasL来延长肿瘤细胞的生存,MMP-7与食管癌SCT征象间的关系,本研究显示MMP-7阳性组的MVD值显著高于MMP-7阴性组(P0.05)表明 MMP-7 可能在食管癌的血管生成中发挥促进作用,MMP-7与食管癌SCT征象间的关系,作用机制 参与MMPs 降解细胞外基质的过程,为新生血管 提供空间,使血管内皮细胞以发芽的方式从原有 的血管发出新的分支 参与释放或激活贮存在基质中与血管生成有关的 因子,使这些与血管生成有关的因子能发挥作用,讨 论,螺旋CT对食管癌的诊断价值MVD与食管癌SCT征象间的关系VEGF与食管癌SCT征象间的关系MMP-7与食管癌SCT征象间的关系VEGF与MM

17、P-7表达的相互关系,VEGF与MMP-7表达的相互关系,本研究中,VEGF和MMP-7同时阳性表达者32.61%(15/46);VEGF和MMP-7同时表达为阴性者32.61%(15/46),统计结果示食管癌中VEGF与MMP-7表达相关(rs值=0.369),且它们的表达与MVD均正相关 提示 VEGF与MMP-7在食管癌的发展及血管生成中发挥协同作用,但确切机制目前还不清楚,VEGF与MMP-7表达的相互关系,VEGF和MMP-7的表达受某些共同因素的调节也许可以部分解释它们在食管癌中表达的相关性,VEGF与MMP-7表达的相互关系,Burke等研究缺氧对人单核细胞起源的吞噬 细胞的11

18、85种基因mRNA表达的影响时,发 现VEGF和MMP-7的mRNA均增加 Giambernardi等研究表明myc、ras等癌基因 能使MMP-7表达上调,Rak等发现P53及ras 基因的突变可上调VEGF的表达 研究还证明某些激素能使VEGF和MMP-7的 表达升高,其在增殖期子宫内膜的表达就是一个 例证,小 结,小 结,SCT增强扫描是食管癌治疗前一项颇有价值的诊断技术 MVD与食管癌SCT征象上的邻近结构侵犯及淋巴结转移相关,提示血管生成可能对食管癌浸润和转 移起促进作用 VEGF、MMP-7高表达与食管癌SCT征象上的邻近结构侵犯及淋巴结转移相关,提示它们可能对食管 癌进展起促进作用,小 结,VEGF和MMP-7可能是食管癌血管生成的重要调控 因子,它们都可促进肿瘤血管生成食管癌中VEGF表达与MMP-7表达相关,提示VEGF与MMP-7在食管癌的发展及血管生成中发挥协同作 用根据食管癌SCT表现,并结合肿瘤组织MVD、VEGF和 MMP-7的表达进行联合分析,有助于判定邻近结构侵犯、淋巴结和/或远隔器官转移状况及估计预后,为临床选择治疗方案提供有价值的理论依据,

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