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1、临床检验标本采集规范,“正确的临床医学检验始自正确的标本采取。临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领。”著名的临床微生物检验专著Manual of Clinical Microbiology 的主编Patrick Murray,失误的不同分布,第一部分检验标本正确采集和运送的重要性,采集标本要选择最佳时间 采集标本要选择最具代表性 采集标本要最大满足要求 重视标本惟一性标志,临床检验血液标本原则上晨起空腹时采集，其结果准确可靠，因它避免了摄入成分和生理活动对检测指标的影响。比如需做血脂检查，在化验前24h要禁高脂饮食，12h禁流质。若要做大便隐血试验，则要在收集标本前3天禁动物血饮食。特定时
2、间采血因人体生物节律昼夜的周期变化，所以24h内不同时间所采集的标本其检测结果是不同的,如糖、激素及药物疗效监测等。尿常规采集晨尿，由于肾脏浓缩功能，易发现病理成分.,采集标本要选择最佳时间,急诊检验采血不受时间的限制，但在检验单上应注明采血时间和急诊字样，以便临床医生根据其特殊性综合分析检验报告。受饮食影响较少的检验项目，如某些抗原、抗体的检测，某些酶类、尿素、肌酐、胆固醇测定等，也不受时间限制。,细菌培养应尽量争取在抗生素使用前采集标本；临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者，需做血液细菌培养，采血宜在患者发冷、发热期间，越早越好，最好在抗菌治疗前，以正在发冷、发热时或发冷、发热前
3、半小时为宜。,采集标本要选择最具代表性,由于患者标本采集不当，常导致阳性率降低，因此标本的采集应具有代表性，比如大便标本应采取新鲜标本，且选取异常成分的粪便，如含有黏液、脓、血等病变成分的标本取35g送检;应避免混有尿液、消毒剂及污水等杂物。如痰液也要求新鲜，一般检查以清晨第1口痰作标本最适宜，做细胞学检查则以上午9：0010：00留痰为好。骨髓穿刺、脑脊液穿刺应防止外伤性血液的渗入，还应避免凝固。血标本采集时患者应采取坐位或仰卧位，还应防止压脉带时间过长等。,采集标本要最大满足要求,抗凝剂、防腐剂的正确应用：临床上很多检验项目涉及到抗凝剂、防腐剂的应用，如血沉检查，但由于抗凝剂比例不当造成血
4、沉减慢的现象也常发生。容器清洁度或无菌程度：如24小时或12小时尿中某成分分析需加防腐剂，而细菌培养的容器绝对不能有防腐剂；微量元素测定对容器洁净度的要求远远高于其他检测。因此标本容器必须干燥、清洁、无污染物、无渗漏。防溶血、防血脂、防污染：溶血标本引起的血细胞计数、血细胞比容、电解质离子及一些酶类、尿素、肌酐、尿酸、血糖等项目的变化临床上经常碰到。脂血标本、被污染标本引起对实验吸光度的干扰，这些都应引起重视。,采集标本运送应注意一些问题：首先标本要专人输送，除门诊患者自行采集的某些标本允许患者自行送外，其他情况原则上一律专人运送。其次送检标本保证安全，防止过度震荡，防止容器破损，防止污染，水
5、分蒸发等。最后保证运送及时性，标本采集后立即送检，标本在室温放置时间直接影响检测结果的真实性。,防止过失采集：不可利用输液、输血通道采集血液标本。除急诊抢救外应尽量避免在输液、输血的同时采集标本；如确需抽血要在另一侧肢体抽取。一般要求在输液、输血前或后1小时采集血液标本。,重视标本惟一性标志,标本采集容器标签上应注明送检科别,床号，患者姓名，与检验单上应相对应，防止张冠李戴。化验单上住院号，项目也应明确.总之，规范实验室标本采集和运送至关重要，除以上涉及到的诸多因素外，还有许多能影响体液成分或干扰测定，如患者年龄、性别、情绪、饮食、运动和药物等的影响，因此在标本采集前应尽可能排除这些因素的干扰
6、，获取准确的检验结果，为临床提供科学可靠的诊断依据。,第二部分 各种临床检验标本的正确采集方法,检验标本的采集是保证检验结果准确的前提。因此，要求各临床科室医护人员、送检者及相关人员认真、严格的按照检验标本的采集方法操作取材。,血液常规检查标本,1.静脉血采集静脉血标本采集前病人应注意的问题:1）避免剧烈运动，一般主张抽血前24h内不做剧烈运动，清晨取血，住院病人可在起床前采血，匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后采血。）注意合理饮食。除了急诊或其它特殊原因外，一般主张在禁食12h后空腹取血，延长空腹时间(饥饿)或餐后血液的化学成分都会引起变化，饮酒实验亦有影响。）药物的影响：很多的药物进入人
7、体后可影响某些化验项目的结果，病人在化验前应尽可能停服对实验有干扰的药物。,静脉采血时护士应注意的问题：）采用一次性真空采血管，多项化验采血顺序应是：血培养无添加剂管有添加剂管管。血常规、血凝、血沉抽血量务必准确抽取规定的量，并轻轻颠倒混匀。）采血时的体位建议以坐位5分钟后取血为宜，止血带使用应少于1分钟，以免引起血液淤滞，造成血管内溶血或血液某些成分改变。）当一侧手臂输液时应从对侧手臂取血，以免影响血糖、血钾等的浓度。）血标本应防止溶血，影响溶血的因素有：用止血带时间过长；抗凝管使用不当或抗凝混合时过度振荡；容器污染；血液中泡沫注入试管；标本放置时间长或突然冷却和受热；离心力过大等。）正确使
8、用抗凝剂。,（一）血常规检验标本 一般用EDTA-2K(EDTA-K22H2O)1.52.2mg/ml抗凝（EDTA抗凝管,紫色帽）采血。采血注意事项：.应按抗凝管刻度准确采静脉血1.5-ml，不能超过2ml。.采血后立即轻轻颠倒混匀（5-8次，不可用强力震荡,以免造成溶血。）；.采血后应尽快送检（为保证结果准确需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定，因为超过2h WBC形态会发生改变）。,(二）凝血检测（PT、APTT、TT、FBG）标本 静脉采集抗凝血（最好真空负压系统采血），抗凝剂用枸橼酸钠（109mmol/L，即32.06g/L,抗凝剂:全血=0.2：1.8）抗凝血（枸橼酸钠抗凝管
9、、蓝绿色帽）。采血注意事项：1.空腹采静脉血（餐后脂血影响检测结果，使因子活化，导致PT延长）；2.采血时患者应保持平静状态30min以上（剧烈活动可使因子活化，APTT明显缩短）；3.应单独1管血,必须准确采血至刻度线2ml；4.采血后应立即上下颠倒混匀5-10次，不可有凝块；5.采血后应尽快送检（必须2h内检测）。,（三）血型与血交叉标本 用EDTA-2K(EDTA-K22H2O)1.5-2.2mg/ml抗凝（EDTA抗凝管、紫色帽）采血.采血注意事项：1.按抗凝管刻度准确采静脉血,采血量分别为1.5ml-2ml；2.采血后立即上下颠倒混匀（510次）,不可有凝块,且不可用强力振荡，以免造
10、成溶血。3.最好血型与血交叉各采1管血，便于标本保存。,（四）红细胞沉降率（血沉，ESR）检验标本 静脉采集枸橼酸钠（109mmol/L，即32.06g/L）抗凝血（枸橼酸钠抗凝管采血,黑色帽）。注意事项：1.单独采1管血,按抗凝管刻度准确采血至2ml（抗凝剂：全血=0.4：1.6）；2.采血后立即上下颠倒混合5-10次,不可用强力振荡；3.采血后应尽快送检（为保证结果准确,必须2h内检测）。,（五）临床生化检验标本 临床生化检验多用非抗凝血标本，应使用真空负压采血管。临床生化检验血标本采集主要注意事项是：1.多项化学检测一般可采1管血；2.采血量视检查项目多少不同而异，单管通常为4.05.0
11、ml；3.如果生化和免疫单独有申请单，应该分开采血；4.多项检测同时采血时应按下列顺序采血：血培养；无添加剂管；凝血管；有添加剂管的顺序为：a橼酸盐管；b肝素管；cEDTA管。,附:真空采血管采集血液标本一览表,尿液常规检查标本.尿液常规检查标本应按以下原则进行采集：（1）新鲜晨尿最佳，门诊病人亦可留随机尿；（2）尿液采集于干净带盖容器中，不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿；（3）避免混有经血、白带、精液和粪便；（4）尿液成分定量检查应留取24h防腐混合尿100200ml（须记取24h尿液总量）；,.尿液常规检查标本采集方法：（）晨尿最好（安静状态下留取清晨第一次尿，浓缩，无其他影响）；（）
12、随机尿较常用（随时留尿，适用于门诊和急诊病人，结果易受多种因素影响）；（）清洁尿（中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿，用于病原微生物学培养、鉴定和药敏）；（）24h尿（用于尿液成分24h定量检查分析，一定要教会病人留取24h尿正确方法）。（）、等计时尿和餐后尿等特殊实验尿，则应按医嘱要求进行留尿。,粪便常规检查标本 1.一般应为新鲜的自然排出的粪便，必要时可肛拭子采取；2.送检粪便应盛于洁净带盖的塑料盒中送检，要做好标记；3.要选取粪便的脓、血、黏液等异常成分进行检查；4.检查蛲虫卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或早晨排便前，于肛门周围皱襞处拭取标本，并立即送检；5.做便隐血试验时，应嘱病人检查前3d
13、内禁食肉类、含动物血的食物及某些蔬菜，禁服铁剂和维生素C等对实验有干扰作用的药物。,5.检查血吸虫卵时应取黏液、脓、血部分，如须孵化毛蚴应留取不少于30g的粪便，并尽快送检，必要时留取整份粪便送检。6.检查痢疾阿米巴滋养体时，应床边留取新排出的粪便，从脓血和稀软部分取材，并立即保温送实验室，并且实验室接受标本后应立即进行检查。,其它体液常规检查标本浆膜腔积液检查标本（1）浆膜腔积液标本一般由医生无菌穿刺采取；（2）送检标本量：理学检查、化学检查、细胞学检查各留取ml；细菌学检查用无菌管采集标本，厌氧菌培养留取ml，结核菌检查留取ml。（3）标本采集后必须立即送检（否则可出现细胞变性，标本凝集，
14、细菌溶解）；（4）用于细胞学检查时，可在标本中加适量EDTA盐抗凝，但还须留取管不加抗凝剂的标本用于观察积液的凝固性；化学检查标本宜用肝素抗凝。,微生物学检验标本,微生物学检验标本的正确采集运送及处理，与细菌的培养鉴定结果有十分密切的关系；医生护士检验人员均应重视微生物学检验标本正确采集的有关问题，并有责任向患者及其家属进行正确采集标本的宣传和指导。,标本收集部位,非无菌部位 无菌部位 眼 血液 耳 脊髓液 呼吸道 胸膜液 消化道 腹膜液 泌尿道 关节液 皮肤 毛发,无临床意义的标本 在有正常菌群出现的感染部位（皮肤、粘膜、消化道和上呼吸道），可能会出现正常菌群过杂、过度生长，掩盖真正的病原菌
15、，这类标本建议临床重取替代标本或说明不处理的原因。,1微生物学检验标本采集、运送、验收和处理注意事项（1）标本采集 1）申请单标记必须清楚（姓名、性别、年龄、病例号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等），以便实验室能够合理选择培养环境和培养基；2）尽量在抗生素应用前采集标本，以避免漏检和提高阳性检出率；3）标本采集应严格执行无菌操作；4）咽拭、肛拭、伤口拭子等拭子标本，应加入适量生理盐水保湿送检；5）痰、尿液、伤口拭子等混有正常菌群的标本，采集后应立即送检；6）采集标本的容器必须是无菌培养杯。,（2）标本运送 1）标本采集后应尽快送到微生物实验室；2）标本采集后在室温下超
16、过2h未送达实验室，可视为不合格标本。（3）标本验收 1）实验室只能接受和处理合格标本；2）实验室对不合格标本退回必须说明原因，并应及时与临床联系。,2微生物学检验标本采集和处理（1）尿液标本采集和处理 通常留取晨起第一次尿液（此时尿液在膀胱内储存4h以上）；尿液采集后要及时送检，并保证2h内接种；尿液微生物学检验标本采集方法如下。;1）中段尿采集法：成年男性和女性分别用肥皂水清洗尿道口和外阴部，再用灭菌水冲洗尿道口，然后排尿弃去前段尿液，于带盖的无菌容器中留取中段尿液510ml,2）导尿法：用导尿管导取1015ml尿液，置灭菌容器中送检；长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿；留置导尿时，用无菌
17、消毒法消毒导尿管外部及导尿管口，用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检（不可采集尿液收集袋中的尿液送检）；3）集尿法：怀疑结核分枝杆菌感染时，于清洁盛器中留取24h尿液，取其沉渣1015ml送检；4）耻骨上膀胱穿刺法：培养结果与临床病情矛盾时可采用此法，一般较少应用；5）肾盂尿采集法：必须由临床医生采集。,（2）粪便标本采集和处理 1）采集时间：腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便；伤寒患者于发病2天以后采集粪便；怀疑霍乱时立即采集粪便送检。2)采集方法：自然排便：取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分，2-3g或1-2ml，盛无菌容器内或置于保存液或增菌液内送检；直肠拭子：用于难以获得粪
18、便或排便困难的患者和婴幼儿，标本采集后插入灭菌试管内送检。,（3）痰及下呼吸道标本采集和处理 1）自然咳痰法：晨痰为佳；先冷开水漱口清洁口腔和牙齿；再用力咳出呼吸道深部的痰；痰量不得少于1ml；痰咳出困难时可先雾化吸入NaCl溶液（100g/L，加温到45）使痰容易咳出。2）小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子深入咽部，小儿因压舌板刺激引起咳嗽，喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上可送检。3）支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞灌洗等采集法：此采集方法必须由医生操作。,（4）血液及骨髓培养标本 采血时机:在患者寒战时，发热高峰前采集,最好在抗菌治疗前。此时阳性率高。1)抗生素治疗前，严格无菌静脉采血5
19、10ml（儿童14ml）；2）无菌注入专用培养瓶（成人、儿童、需氧菌、厌氧菌）中送检；3）如已用抗生素不能停用时，可于48h内分别于下次用抗生素之前，采取6份血液标本送检；4）必要时可需氧菌、厌氧菌（占10%）和L型菌同时培养；5）疑为心内膜炎时，为提高阳性检出率，可酌情不同部位、不同时间，多次采血或动脉采血进行培养；6）必要时可取骨髓12ml，无菌注入专用培养瓶中送检,(5）脑脊液培养标本 1)采集时间：怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液，最是在应用抗生素之前采集脑脊液。2)采集方法：无菌腰穿采集脑脊液35ml，分装到3个无菌小瓶中（各12ml）。用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于1ml；用于真菌
20、和抗酸杆菌检测脑脊液量不少于2ml。,（6）穿刺液培养标本 1)采集时间：一般在用抗生素等抗菌药物治疗之前，或在停止使用抗菌药物之后2-3d采集标本。2)采集方法：无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本；标本采集量应1ml（结核分支杆菌培养时应为15ml）；标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检；可在容器中先加入灭菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固（0.5ml肝素可抗凝5ml标本）,（7）胃液及胆汁培养标本 抽取空腹胃液5ml，置无菌管内送检；胆汁培养标本由十二指肠引流法或胆囊穿刺法或手术中留取胆汁，采集胆汁量为5ml，置无菌管内送检；胃液和胆汁采集后必须立即送检。,（8）脓汁和病灶分泌
21、物培养标本采集前局部消毒，然后无菌采取脓汁或病灶分泌物或组织。标本采集后立即置无菌管内送检。,封闭性脓肿：在病灶局部外表消毒后，以 无菌注射器抽取脓液5-10ml 置无菌试管中送检。若怀疑 厌氧菌感染时，抽取脓液后 立即排尽注射器内的空气，刺入无菌橡皮塞中送检。,开放性脓肿：先消毒病灶周围，用无菌生 理盐水擦去表 面渗出物，然后用无菌棉签采取病灶深部脓液及分泌物，置无菌试管中送检。,（9）眼.耳.鼻.咽拭子培养标本用拭子常规采集各种标本。标本采集过程中应注意避免被黏膜上的正常菌群污染，标本采集后连同拭子一起置无菌管内送检。,（10）泌尿生殖道培养标本 1）尿道分泌物：清洗尿道口采取尿道口溢出的
22、脓性等分泌物，或用无菌拭子插入尿道24cm处轻轻转动后取出，置无菌试管中送检。2）阴道、宫颈分泌物：通过阴道扩张器，用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管12cm处分泌物，置无菌试管中送检。3）前列腺液：清洗尿道口冲洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液送检。4）精液：受检者应5d未排精，清洗尿道口后手淫或体外排精法，射精于无菌容器内送检。5）溃疡分泌物：灭菌生理盐水溶液清洗患处，用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物，置无菌试管中送检。,(11）烧伤感染培养标本 烧伤12h后用无菌棉拭子无菌操做采集标本；要注意从多个创面取样；烧伤严重感染时易发生败血症，创面取样的同时应该采集血样送做血培养（最好同时做需氧菌培
23、养和厌氧菌培养）。（12）厌氧菌感染培养标本 1）标本采集 要注意避免标本污染和与空气接触，严格遵守无菌操作；用注射器抽取胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液或无菌手术抽出脓液；抽出液体标本后，要尽快排除注射器内的空气。,2）标本运送 标本采集后不得冰箱储存，必须尽快（半小时内）送实验室；运送方法：a注射器运送（标本抽取后尽快排除空气）或接种到专门的运送培养基中直接运送；b含运送培养基的无氧小瓶运送；c厌氧罐运送（组织块）；d 大量液体标本运送时要装满标本瓶并立即驱氧，加盖运送；e一般不采用棉拭子法。,(13）真菌感染培养标本 1）浅部真菌感染标本采集 皮肤：常规消毒皮肤，从皮肤癣菌皮损边
24、缘刮取鳞屑，置无菌平皿内送检；皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织；指（趾）指甲：消毒指（趾）指甲并去掉其表面部分，取可疑病变部分，用刀片修成小薄片56片，置无菌容器内送检；毛发：采集根部断折处，至少56根送检。,2）深部真菌感染标本采集 血液：无菌采血810ml，注入未用过抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中，立刻送检；如不能立刻送检时血培养瓶应放室温，但不可超过89h；脑脊液：采样量不少于35ml，分别注入两支无菌试管中送检（一管做真菌培养和墨汁染色；一管测隐球菌抗原和其他培养）；呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染标本采集同一般菌培养标本。,标本采集常见的注意事项,棉花纤维+竹/木条,抑菌区是因为：植物分泌出来的：脂肪酸；树脂；福尔马林,
